【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种pa28γ-t23位点磷酸化抗体的制备及应用。
技术介绍
1、肿瘤性疾病是威胁人类健康的一大类别，其治疗方法主要包括手术治疗、放化疗、免疫治疗和分子靶向治疗。其中分子靶向治疗因疗效佳、毒副作用小等优势受到密切关注，因此，探究肿瘤发生发展的标志新分子的作用机制，对于筛选出新的治疗靶点和预后指标，提高肿瘤患者生存率及节约社会资源具有重要意义。
2、蛋白酶体激活因子28亚基γ(proteasome activator 28subunit gamma，pa28γ)是一种11s-20s-11s蛋白酶体激活因子，能在不依赖泛素和腺苷三磷酸(adenosinetriphosphate，atp)下介导肽段和蛋白质降解，目前已发现多种依赖pa28γ蛋白酶体系统的底物分子。pa28γ的基因名称是psme3。
3、已有多项研究表明pa28γ表达与肿瘤性疾病密切相关，其高表达在头颈鳞状细胞癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌等的发生发展中起重要作用，与患者的不良预后相关，但其详细调控机制仍不明确。
4、蛋白翻译后修饰对蛋白结构和功能产生巨大的影响，但对于pa28γ的翻译后修饰报道较少，特别是关于研究最广泛的磷酸化修饰方式，pa28γ至今仅报道过在人骨肉瘤细胞中与细胞凋亡相关的s247位点磷酸化修饰。
5、为解析pa28γ促癌功能的具体机制和为寻找新的肿瘤治疗靶点和预后指标提供更多可能，还需要更多特异性识别pa28γ蛋白的磷酸化位点。p>
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种pa28γ-t23位点磷酸化抗体的制备及应用。
2、本专利技术提供了一种新的pa28γ蛋白，它是t23位点被磷酸化修饰的pa28γ蛋白。
3、本专利技术还提供了一种抑制pa28γ-t23位点磷酸化水平的试剂在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途。
4、进一步地，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、子宫癌和/或宫颈癌；优选地，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺腺癌和/或宫颈癌。
5、本专利技术还提供了一种pa28γ-t23位点磷酸化的多肽，其特征在于：其氨基酸序列如seq id no.1所示。
6、本专利技术还提供了一种用于检测pa28γ-t23位点磷酸化水平的抗体，其特征在于：它是以seq id no.1所示多肽为免疫原制备的抗体。
7、所述的抗体在制备检测pa28γ-t23位点磷酸化水平的试剂中的用途。
8、进一步地，所述检测pa28γ-t23位点磷酸化水平的试剂是elisa检测用试剂、斑点杂交检测用试剂、免疫印迹检测用试剂、免疫组化检测用试剂、免疫细胞化学检测用试剂。
9、本专利技术还提供了检测磷酸化pa28γ-t23位点表达水平的试剂在制备肿瘤筛查用试剂中的用途。
10、进一步地，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、子宫癌和/或宫颈癌；优选地，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺腺癌和/或宫颈癌。
11、本专利技术还提供了一种肿瘤筛查试剂盒，其特征在于：它包括任选的用于检测磷酸化pa28γ-t23位点表达水平的试剂。
12、pa28γ-t23位点，是指pa28γ蛋白的第23位氨基酸位点，且第23位氨基酸为苏氨酸(t)。
13、人pa28γ蛋白的氨基酸序列(seq id no.3)：masllkvdqevklkvdsfreritseaedlvanffpkklleldsflkepilnihdltqihsdmnlpvpdpilltnshdgldgptykkrrldeceeafqgtkvfvmpngmlksnqqlvdiiekvkpeirlliekcntvkmwvqllipriedgnnfgvsiqeetvaelrtveseaasyldqisryyitraklvskiakyphvedyrrtvteidekeyislrliiselrnqyvtlhdmilkniekikrprssnaetly
14、迄今为止，特异性识别pa28γ蛋白t23位点磷酸化修饰的抗体未见报道。本专利技术制备pa28γ-t23位点磷酸化修饰检测抗体，将为解析pa28γ促癌功能的具体机制和为寻找新的肿瘤治疗靶点和预后指标提供更多可能。
15、实验结果表明，本专利技术提供了一种pa28γ-t23位点磷酸化抗体的应用，并且通过实验验证，pa28γt23位点磷酸化修饰促进了口腔鳞状细胞癌的增殖。本专利技术证明了通过检测pa28γt23位点磷酸化水平，t23位点磷酸化水平高口腔鳞状细胞癌肿瘤生长的速度相对于t23位点磷酸化水平低时肿瘤生长的速度快，可以通过检测pa28γt23位点磷酸化水平检测，检测患有口腔鳞状细胞癌、肺腺癌或宫颈癌等含有psme3基因的肿瘤的风险。本专利技术提供的pa28γ-t23位点磷酸化抗体的应用可以为患者采取相关的治疗措施或者决策提供有效的依据，临床应用前景良好。
16、本专利技术还通过pa28γt23位点拟去磷酸化和拟磷酸化，证明pa28γt23位点磷酸化促进了癌细胞增殖；且抑制pa28γt23位点磷酸化，能够抑制癌细胞增殖。因此抑制pa28γt23位点磷酸化的试剂可以用于制备治疗肿瘤的药物，具有良好的应用前景。
17、显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
18、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种新的PA28γ蛋白，其特征在于：它是T23位点被磷酸化修饰的PA28γ蛋白。
2.抑制PA28γ-T23位点磷酸化水平的试剂在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、子宫癌和/或宫颈癌；优选地，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺腺癌和/或宫颈癌。
4.一种PA28γ-T23位点磷酸化的多肽，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.一种用于检测PA28γ-T23位点磷酸化水平的抗体，其特征在于：它是以SEQ ID NO.1所示多肽为免疫原制备的抗体。
6.权利要求5所述的抗体在制备检测PA28γ-T23位点磷酸化水平的试剂中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：检测PA28γ-T23位点磷酸化水平的试剂是ELISA检测用试剂、斑点杂交检测用试剂、免疫印迹检测用试剂、免疫组化检测用试剂、免疫细胞化学检测用试剂。
8.检测磷酸化PA28γ
9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、子宫癌和/或宫颈癌；优选地，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺腺癌和/或宫颈癌。
10.一种肿瘤筛查试剂盒，其特征在于：它包括任选的用于检测磷酸化PA28γ-T23位点表达水平的试剂。
...【技术特征摘要】
1.一种新的pa28γ蛋白，其特征在于：它是t23位点被磷酸化修饰的pa28γ蛋白。
2.抑制pa28γ-t23位点磷酸化水平的试剂在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的用途。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌、子宫癌和/或宫颈癌；优选地，所述肿瘤为口腔鳞状细胞癌、肺腺癌和/或宫颈癌。
4.一种pa28γ-t23位点磷酸化的多肽，其特征在于：其氨基酸序列如seq id no.1所示。
5.一种用于检测pa28γ-t23位点磷酸化水平的抗体，其特征在于：它是以seq id no.1所示多肽为免疫原制备的抗体。
6.权利要求5所述的抗体在...
【专利技术属性】
技术研发人员：李敬，孙思露，陈谦明，钟兵，曾昕，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：
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