【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程，涉及水稻乙烯响应转录因子osktr2的基因工程应用。
技术介绍
1、钾(k)是重要的矿物质宏量营养元素之一，广泛参与许多植物生长发育的生理过程，包括渗透调节、酶激活、离子平衡、气孔运动以及对生物胁迫和非生物胁迫的抵抗等(wang et al.,2013；anschütz et al.,2014)。作为一种重要的无机渗透离子，k+可以调节植物细胞的渗透势能，在植物对渗透/干旱胁迫中发挥重要作用。k也可以调节植物的光合作用以及对碳水化合物的转移和新陈代谢，最终决定作物的产量和品质。当k供应不足时，植物会表现出叶片失水发黄、植株弱小以及对干旱等非生物胁迫敏感，严重影响植物的生长发育(munson,1985)。相反，在k供应充足的情况下，植物可以增强对生物胁迫以及非生物胁迫的抵御能力。
2、据报道，低钾胁迫会在根系表皮细胞内产生缺钾信号，包括ca2+、ros、植物激素、micrornas等。这些信号进一步被传导，并通过转录因子触发下游靶基因(尤其是k通道以及高亲和k转运蛋白)的表达，最终实现植物对低钾环境的适应(wang and wu,2013)。
3、ap2/erf是最大的植物转录因子家族之一，包含119-200个家族成员(du etal.2014；nakano et al.2006；rao et al.2015；zhuang et al.2008)，这些成员参与了植物乙烯信号传导、应激反应、新陈代谢以及对外界刺激的响应等生理过程(han et al.,2016；koyama etal.
技术实现思路
1、本专利技术的目是提供水稻乙烯响应转录因子osktr2的基因工程应用，主要是自身启动子超表达材料可以增加分蘖数、提高结实率和产量。
2、本专利技术的目的通过如下技术实现：
3、水稻乙烯响应转录因子osktr2，cdna序列如seq id no.1所示。
4、一种重组表达载体，含有权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子osktr2。
5、所述的重组表达载体为pcambia1305载体。
6、所述的重组表达载体，进一步是将权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子osktr2插到出发载体pcambia1305的saci和psti酶切位点后用ecori和saci双酶切除ubiquitin启动子并插入osktr2基因自身启动子所得。
7、所述的水稻乙烯响应转录因子osktr2的应用，选自如下任意一项或多项：
8、(1)增加作物的总分蘖数、有效分蘖数、结实率；
9、(2)提高水稻产量；
10、(3)促进水稻对钾的吸收；
11、所述的水稻乙烯响应转录因子osktr2在构建转基因水稻中的应用，所述的转基因水稻具有如下任意一项或多项性状：
12、(1)增加作物的总分蘖数、有效分蘖数、结实率；
13、(2)提高水稻产量；
14、(3)促进水稻对钾的吸收；
15、所述的重组表达载体的应用，选自如下任意一项或多项：
16、(1)增加作物的总分蘖数、有效分蘖数、结实率；
17、(2)提高水稻产量；
18、(3)促进水稻对钾的吸收；
19、所述的重组表达载体在构建转基因水稻中的应用，所述的转基因水稻具有如下任意一项或多项性状：
20、(1)增加作物的总分蘖数、有效分蘖数、结实率；
21、(2)提高水稻产量；
22、(3)促进水稻对钾的吸收；
23、本专利技术的有益效果：
24、1.本专利技术中，世界上首次发现由水稻乙烯响应转录因子osktr2构建的重组表达载体，通过农杆菌介导的水稻转基因技术转染到野生型水稻日本晴(oryzasativa.ssp.cv.japonica)中，我们发现osktr2转基因水稻材料的总分蘖数、有效分蘖数、结实率和籽粒产量与野生型水稻相比显著提高。
25、2.本专利技术中的osktr2基因来源于水稻，启动子也是osktr2基因上游的序列，不是外源基因，因此具有生物安全性，所构建的水稻乙烯响应转录因子osktr2植物表达载体可以直接用于农杆菌介导的植物遗传转化，获得可以增加植物总分蘖、有效分蘖的新种质。
26、3.本专利技术中的osktr2基因超表达后可以促进水稻对钾的吸收，尤其在低钾条件下。
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1.水稻乙烯响应转录因子OsKTR2，其特征在于cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种重组表达载体，其特征在于含有权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子OsKTR2。
3.根据权利要求2所述的重组表达载体，其特征在于出发载体为pCAMBIA1305载体。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于所述的重组表达载体以水稻乙烯响应转录因子OsKTR2自身启动子替换pCAMBIA1305载体自带的Ubiquitin启动子。
5.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于所述的重组表达载体是将权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子OsKTR2插到出发载体pCAMBIA1305的SacI和PstI酶切位点后用EcoRI和SacI双酶切除Ubiquitin启动子并插入OsKTR2基因自身启动子所得。
6.权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子OsKTR2的应用，其特征在于，选自如下任意一项或多项：
7.权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子OsKTR2在构建转基因水稻中的应用，其特征在于，所述的转基因水稻
8.权利要求2-5中任一项所述的重组表达载体的应用，其特征在于，选自如下任意一项或多项：
9.权利要求2-5中任一项所述的重组表达载体在构建转基因水稻中的应用，其特征在于，所述的转基因水稻具有如下任意一项或多项性状：
...【技术特征摘要】
1.水稻乙烯响应转录因子osktr2，其特征在于cdna序列如seq id no.1所示。
2.一种重组表达载体，其特征在于含有权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子osktr2。
3.根据权利要求2所述的重组表达载体，其特征在于出发载体为pcambia1305载体。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于所述的重组表达载体以水稻乙烯响应转录因子osktr2自身启动子替换pcambia1305载体自带的ubiquitin启动子。
5.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于所述的重组表达载体是将权利要求1所述的水稻乙烯响应转录因子osktr2插到出发载体pcambi...
【专利技术属性】
技术研发人员：余玲，李梦琪，冯慧敏，徐国华，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：
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