【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一株裂解牛源沙门氏菌的噬菌体及其应用。
技术介绍
1、牛沙门氏菌病(pulomm disea)是由沙门氏菌属的任意一位或多种原因导致牛的一种急性或慢性病症，各品种、性别、年龄的牛均可感染，其中犊牛最易感，1月龄犊牛发病率最高。患病牛及带菌牛是该疾病的主要传染源，牛沙门氏菌可长时间存活于牛淋巴组织及胆囊内，经粪便、尿液、乳汁、流产胎儿、胎衣、恶露等排出体外，污染周边环境，经消化道进入健康牛体内，导致其感染，也可经交配、人工授精传播。
2、抗生素在养殖业滥用的问题还难以彻底解决，耐药性菌株的不断出现，引起了全社会重视。噬菌体(bacteriophage,phage)是感染细菌并依赖其细菌宿主进行复制的病毒，由单链或双链dna或rna组成的基因组和外层包裹的蛋白质衣壳组成，不伤害动物细胞。近年来，农业农村部禁止在饲粮中添加抗生素，噬菌体作为一种天然的抗菌制剂，靶向杀灭有害菌，是天然的杀菌物质,噬菌体因其高效的、特异性的杀菌作用在治疗或预防疾病具有极大的潜力。
3、据中华人民共和国农业农村部公告第194号，自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。饲料禁用抗生素是生产绿色安全食品，降低环境耐药菌风险的必然趋势。为了减少在养殖过程中抗生素的使用，需要开发新型的减抗替抗技术。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题为预防和治疗牛源沙门氏菌感染提供一种新选择。
2、本专利
3、本专利技术还提供了所述噬菌体seoulvirus gx2401在制备预防和治疗牛源沙门氏菌的制剂中的应用；
4、进一步的，所述制剂为喷洒剂或浸泡剂。
5、本专利技术还提供了噬菌体seoulvirus gx2401的培养方法，，包括如下步骤：
6、s1、取噬菌体和宿主菌作用15min，加入lb液体培养基，37℃培养6h，离心，取上清，过滤，滤液即为噬菌体裂解液；
7、s2、在噬菌体裂解液中加入dnase、rnasea，温育，加入nac1冰浴，离心，取上清加入peg8000，4℃过夜，离心，弃上清，加入sm缓冲液重悬，加入等体积的氯仿温和震荡30s，离心以分离有机相和亲水相，回收含有噬菌体颗粒的亲水相，得到纯化的菌体悬液。
8、其中，噬菌体和宿主菌的用量体积比为1︰1；
9、进一步，步骤s1中，离心条件为4℃、12000rpm离心20min；
10、特别的，步骤s1中，所述过滤采用，0.22μm滤膜过滤。
11、其中，步骤s2中，噬菌体裂解液中加入dnase、rnasea至终浓度各为1μg/ml；
12、具体的，步骤s2中，温育30min；
13、特别的，步骤s2中，加入nac1冰浴1h；
14、其中，步骤s2中，前两次离心条件为4℃、12000rpm离心10min；
15、特别的，步骤s2中，4℃、5000rpm离心15min以分离有机相和亲水相；
16、其中，步骤s2中，加入peg8000后终浓度为10％。
17、本专利技术的有益效果：本专利技术公开了一株裂解牛源沙门氏菌的噬菌体seoulvirusgx2401，是宽宿主谱菌体，能够裂解6种不同的沙门氏菌，抗菌谱较广，可应用于制备预防和治疗牛源沙门氏菌感染的疾病的药物。牛源沙门氏菌噬菌体seoulvirus gx2401能快速杀灭牛源沙门氏菌、且能在较短时间内大量增殖,对温度、酸碱耐受范围广，易制成喷洒剂和浸泡剂；不携带耐药和毒力基因,且毒副作用小，安全性高，对动物无毒害作用，单独使用或与其他药剂配合使用时，对沙门氏菌污染的养牛场环境具有良好的抑制或杀灭效果。
18、本专利技术的裂解牛源沙门氏菌的噬菌体seoulvirus gx2401于2024年6月6日保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏地址：中国·武汉·武汉大学，邮编430072；保藏号为cctcc no：m20241156。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株裂解牛源沙门氏菌的噬菌体Seoulvirus GX2401，其保藏号为CCTCC NO：M20241156。
2.权利要求1所述噬菌体Seoulvirus GX2401在制备预防和治疗牛源沙门氏菌的制剂中的应用；所述制剂为喷洒剂或浸泡剂。
3.权利要求1所述噬菌体Seoulvirus GX2401的培养方法，其特征在于：包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：步骤S1中，噬菌体和宿主菌的用量体积比为1︰1。
5.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：步骤S1中，离心条件为4℃、12000rpm离心20min。
6.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：步骤S1中，所述过滤采用0.22μm滤膜过滤。
7.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：步骤S2中，噬菌体裂解液中加入DNase、RNaseA至终浓度各为1μg/mL。
8.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：步骤S2中，温育时间为30min，加入NaC1冰浴1h。
9.根据权利要求3所述培养方法，
10.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：其中，步骤S2中，加入PEG8000后终浓度为10％。
...【技术特征摘要】
1.一株裂解牛源沙门氏菌的噬菌体seoulvirus gx2401，其保藏号为cctcc no：m20241156。
2.权利要求1所述噬菌体seoulvirus gx2401在制备预防和治疗牛源沙门氏菌的制剂中的应用；所述制剂为喷洒剂或浸泡剂。
3.权利要求1所述噬菌体seoulvirus gx2401的培养方法，其特征在于：包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：步骤s1中，噬菌体和宿主菌的用量体积比为1︰1。
5.根据权利要求3所述培养方法，其特征在于：步骤s1中，离心条件为4℃、12000rpm离心20min。
6.根据权利要求3所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：龚俞，李维，周定勇，姜艳，潘兰兵，赖跃，刘镜，彭昊，王乐平，
申请(专利权)人：贵州省畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
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