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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子检测,具体涉及一种环境dna福寿螺属pcr检测方法及其应用。
技术介绍
1、福寿螺属中存在多种形态相似种,是瓶螺科中种类鉴定最困难的一个属,例如pomacea canaliculata与pomacea insularum、pomacealineata、pomacea dolioides、pomacea haustrum、pomacea bridgesi和pomacea paludosa等均为相似螺种,其区分主要通过卵的颜色、螺壳的颜色或色带、螺层间夹角等形态特征。
2、福寿螺被列入农业检疫性有害生物补充名单,河道、沟渠及稻田,以及芡实、荸荠、菱角、莲藕、茭白等水生作物田中均已发现福寿螺的危害,因此福寿螺的传入和扩散进行风险分析是必要的。建立一种可以一次性同时检测福寿螺属下所有福寿螺属物种的qpc r方法,为检测环境中福寿螺属的含量提供技术支持,是有待解决的技术问题。
技术实现思路
1、本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。
2、作为本专利技术其中一个方面,本专利技术提供一种环境d na福寿螺属pc r检测方法,其包括pcr检测引物,所述pcr检测引物序列为:上游引物序列:下游引物序列:
3、作为本专利技术所述的环境dna福寿螺属pcr检测方法的一种优选方案:所述福寿螺属包括黄金福寿螺(pomacea bridgesi)、小管福寿螺(pomacea canaliculata)、瓶状福寿螺(po
4、作为本专利技术所述的环境dna福寿螺属pcr检测方法的一种优选方案:所述pcr检测的退火温度为51~57℃。
5、作为本专利技术所述的环境dna福寿螺属pcr检测方法的一种优选方案:所述pcr检测包括普通pcr检测或荧光定量pcr检测。
6、作为本专利技术所述的环境dna福寿螺属pcr检测方法的一种优选方案:所述pcr检测程序为:50℃,2min;95℃,2min;95℃,15s;57℃,1min,40个循环。
7、本专利技术的有益效果:本专利技术检测环境d na福寿螺属的方法,在水体中的检出限低至0.4copies/μl,仅对目标物种福寿螺属成功扩增,对于近源物种(如中华圆田螺等)无法扩增,具有较高的检测灵敏度和特异性。
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1.一种环境DNA福寿螺属PCR检测方法,其特征在于:包括PCR检测引物,所述PCR检测引物序列为:上游引物序列:5′-CACTGAATGAAATGTAATTTCTTCTA-3′;下游引物序列:5′-TCATTCTAAGGCAGTAACTAAATGTAGT-3′。
2.根据权利要求1所述的环境DNA福寿螺属PCR检测方法,其特征在于:所述福寿螺属包括黄金福寿螺(Pomacea bridgesi)、小管福寿螺(Pomacea canaliculata)、瓶状福寿螺(Pomacea doliodes)、斑点福寿螺(Pomacea maculata)。
3.根据权利要求1或2所述的环境DNA福寿螺属PCR检测方法,其特征在于:所述PCR检测的退火温度为51~57℃。
4.根据权利要求1或2所述的环境DNA福寿螺属PCR检测方法,其特征在于:所述PCR检测包括普通PCR检测或荧光定量PCR检测。
5.根据权利要求1或2所述的环境DNA福寿螺属PCR检测方法,其特征在于:所述PCR检测程序为:50℃,2min;95℃,2min;95℃,15s
6.根据权利要求1所述的环境DNA福寿螺属PCR检测方法在福寿螺属鉴定中的应用。
7.根据权利要求1所述的环境DNA福寿螺属PCR检测方法在制备福寿螺属检测试剂盒中的应用,其特征在于:所述试剂盒包括所述PCR检测引物。
...【技术特征摘要】
1.一种环境dna福寿螺属pcr检测方法,其特征在于:包括pcr检测引物,所述pcr检测引物序列为:上游引物序列:5′-cactgaatgaaatgtaatttcttcta-3′;下游引物序列:5′-tcattctaaggcagtaactaaatgtagt-3′。
2.根据权利要求1所述的环境dna福寿螺属pcr检测方法,其特征在于:所述福寿螺属包括黄金福寿螺(pomacea bridgesi)、小管福寿螺(pomacea canaliculata)、瓶状福寿螺(pomacea doliodes)、斑点福寿螺(pomacea maculata)。
3.根据权利要求1或2所述的环境dna福寿螺属pcr检测方...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘燕山,李大命,唐晟凯,钟立强,谷先坤,杨志强,代培,孙晶莹,孟遥,
申请(专利权)人:江苏省淡水水产研究所,
类型:发明
国别省市:
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