【技术实现步骤摘要】
本申请涉及医药，特别是一种以当归为原料的苯酞二聚体化合物提取分离方法及其所得化合物的应用。
技术介绍
1、炎症是动物体组织对有害刺激的复杂生物反应，no的升高可能导致细胞毒性和促炎症作用，这些现象表明抑制no释放是治疗炎症疾病的重要治疗靶点。jian-bo yang,ai-guo wang,qian wei,jin ren,shuang-cheng ma,ya-lun su.new dimeric phthalidesfrom ligusticum sinense oliv cv.chaxiong.[j].journal of asian naturalproducts research,2014,16(7):747-52.doi:10.1080/10286020.2014.914501.中公开了从当归中提取得到的4种具有抑制no表达效果的苯酞类二聚体，该化合物的提取方法为：将干燥的当归根茎粉碎后，用95％乙醇通过回流法提取，然后通过减压蒸发得到残渣，并将其悬浮在蒸馏水中，依次用ch2cl2和etoac进行提纯，得到ch2cl2、etoac和h2o的可溶性部分。其中，ch2cl2可溶性部分进一步用石油醚溶解并与90％ meoh分配以去除低极性的脂肪油，得到的90％ meoh部分通过闪柱色谱法(cc)并用梯度洗脱法分离，最终通过hplc纯化得到目标化合物。但该方法仅为简略说明，缺乏实操可行性。
2、另外lu huang,cheng peng等于2022-06-16发表于bioorganic chemistry(if4.
3、苯酞类二聚体主要用于心脑血管疾病的治疗、抗脑缺血和神经修复、抗肿瘤、舒张血管中。苯酞二聚体具有复杂的多环骨架和多手性中心特点，因其丰富的化学结构和重要的药理活性而成为研究的热点。
4、然而现有苯酞类二聚体的来源主要为天然药物提取或人工手段通过生物或化学方法合成，其中天然药物来源为川芎、当归和芹菜籽。
5、当归为伞形科植物当归(angelica sinensis(oliv.)diels)的干燥根，当归的化学成分复杂而丰富，包括挥发油、多糖、阿魏酸、苯酞类化合物等，这些成分共同赋予了当归其独特的药理活性；在药理作用方面，当归被证实具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗血栓形成等多种生物活性，对心血管系统、免疫系统、神经系统等多个系统均有良好的调节作用。
6、其中，苯酞类化合物被认为是当归主要生物活性成分之一，该类化合物主要包括：苯酞单体和苯酞二聚体。当归主要用于提取苯酞类化合物。
7、但由于当归中成分复杂，例如多糖等物质，会对苯酞类化合物形成包覆，影响苯酞类化合物的提取效率和得率。
8、如cn201610131491.2中公开了一种苯酞类二聚体化合物的提取方法和用途，该方法以超临界co2萃取当归饮片，在对提取物进行多次硅胶柱层析得到具有抗肿瘤效果的3种结构化合物，但由于苯酞类二聚体结构复杂，其中还存在具有特殊效果的多种其他结构的苯酞类二聚体有待进一步的研究开发，以便加以利用。
9、公开于
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域普通技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
1、本申请针对上述技术问题提供了一种以当归为原料的苯酞二聚体化合物提取分离方法及其所得化合物的应用，该方法可实现的当归中苯酞类二聚体化合物的有效提取，获得了新颖结构的10种化合物，且所得化合物均具有抑制no表达的效果，具有抗炎效果，增加了抗炎效果苯酞类二聚体化合物的种类。
2、本申请提供了一种以当归为原料的苯酞二聚体化合物提取分离方法包括以下步骤：
3、1)采用当归提取物fr.c硅胶柱正相色谱分离后，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱液进行梯度洗脱，洗脱流份依据tlc检测结果合并相同流份，得到组分frc-1、组分frc-2、组分frc-3；
4、2)采用硅胶柱进行划段处理组分frc-2后，以二氯甲烷/甲醇为洗脱液梯度洗脱，tlc检测各洗脱流份合并相同流份，得到组分frc-2-1、组分frc-2-2、组分frc-2-3；
5、3)取组分frc-2-2经sephadex lh-20柱色谱洗脱，以甲醇溶液等度洗脱，洗脱流份经tlc检测合并相同流份，得到组分frc-2-2-1、组分frc-2-2-2；
6、取组分frc-2-2-1经半制备型高效液相色谱纯化，得到外消旋体(±)-1即化合物1，(±)-2即化合物2和组分frc-2-2-1-1；
7、组分frc-2-2-1-1继续经硅胶柱色谱分离，用石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱，得到外消旋体(±)-3即化合物3和(±)-4即化合物4；
8、组分frc-2-2-2经半制备型高效液相色谱纯化，得到外消旋体(±)-5即化合物5、(±)-6即化合物6和组分frc-2-2-2-1；
9、组分frc-2-2-2-1继续经硅胶柱色谱分离，用石油醚/乙酸乙酯进行梯度洗脱，得到外消旋体(±)-7即化合物7、(±)-8即化合物8。
10、组分frc.2-3经过sephadex lh-20柱色谱洗脱，以100％甲醇等度洗脱，洗脱流份经tlc检测，合并相同流份，得到组分frc-2-3-1～frc-2-3-2的2个组分；
11、组分frc-2-3-1经半制备型高效液相色谱纯化，得到外消旋体(±)-9即化合物9、(±)-10即化合物10；
12、所得化合物1～10为：
13、
14、优选地，处理组分frc-2-2-1时，半制备型高效液相色谱纯化所用流动相为按体积比为68:32混合的乙腈、水。
15、优选地，处理组分frc-2-2-2时，半制备型高效液相色谱纯化所用流动相为按体积比为63:37混合的乙腈、水。
16、优选地，处理组分frc-2-3-1时，半制备型高效液相色谱纯化所用流动相为按体积比为45:5本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种以当归为原料的苯酞二聚体化合物提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，处理组分FrC-2-2-1时，半制备型高效液相色谱纯化所用流动相为按体积比为68:32混合的乙腈、水；
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，石油醚-乙酸乙酯的洗脱液从石油醚、乙酸乙酯体积比为100:1过渡至石油醚、乙酸乙酯体积比为1:1；
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，当归提取物Fr.C的制备方法：以干燥当归粉末为原料，采用浓度为80％的乙醇浸泡3～5次后，每次浸泡1～2天合并各次所得浸提液后，减压浓缩得到提取物浸膏后，水溶提取物浸膏用D101聚苯乙烯型大孔树脂装柱后，依次用水、甲醇和甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，收集甲醇洗脱部分、减压浓缩、水溶后得到当归提取物Fr.C。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括：对所得化合物1～10分别进行手性拆分，分别得到化合物1～10对应的光学对映体。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，手性拆分条件为：采用手性柱AD-H，通过分析型
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，化合物1、8手性拆分中所用流动相为按体积比96：4混合的正己烷∶异丙醇；
8.一种抗炎组合物，其特征在于，至少包括：如权利要求1～7中任一项所述的方法所得化合物1～10。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，至少包括：化合物2、化合物1的光学对映体、化合物9及其光学对映体、化合物7及其光学对映体中的任一种；
10.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，化合物1～10的添加量小于6.25μM；
...【技术特征摘要】
1.一种以当归为原料的苯酞二聚体化合物提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，处理组分frc-2-2-1时，半制备型高效液相色谱纯化所用流动相为按体积比为68:32混合的乙腈、水；
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，石油醚-乙酸乙酯的洗脱液从石油醚、乙酸乙酯体积比为100:1过渡至石油醚、乙酸乙酯体积比为1:1；
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，当归提取物fr.c的制备方法：以干燥当归粉末为原料，采用浓度为80％的乙醇浸泡3～5次后，每次浸泡1～2天合并各次所得浸提液后，减压浓缩得到提取物浸膏后，水溶提取物浸膏用d101聚苯乙烯型大孔树脂装柱后，依次用水、甲醇和甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，收集甲醇洗脱部分、减压浓缩、水溶后得到当归提取物fr.c。
5.根据权利要求1所述的方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：张于，温红艳，李胜，郭伶俐，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：
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