【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及到透皮递送技术，具体地涉及双层负载多糖或蛋白质促进透皮递送的脂质体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、透皮给药系统是指通过皮肤表面给药，使药物以恒定的速率通过毛细血管进入人体血液循环产生全身或局部治疗作用的新途径。皮肤作为人体最大的器官使得透皮给药途径受到广泛关注，其优势显著如药物的吸收可以避免肝脏首过效应、控制给药速度、提高药物利用率、无创给药等。多糖及蛋白质作为人体自身不可缺少的成分，发挥着重要作用，例如透明质酸可以通过参与细胞信号传导促进组织再生及伤口愈合；海藻酸盐可以通过单核细胞产生细胞因子来促进慢性伤口愈合；胶原蛋白可以通过清除人体内的自由基，延缓皮肤衰老；免疫球蛋白可以通过与免疫细胞表面受体结合，调节免疫细胞的功能及活性。但多糖及蛋白的口服使用受到胃肠道ph、复杂酶环境的限制导致利用率低，因此基于多糖及蛋白的透皮装置治疗相关疾病，前景广阔。
2、目前，已开发多种基于多糖及蛋白的经皮给药载体，如水凝胶、薄膜、微针等。例如wang等人通过使用三七多糖制造了一种可溶性微针，其可通过激活皮肤树突状细胞促进药物的透皮递送，在微针的帮助下可穿透角质层并靶向耳部皮肤，促进了免疫细胞的成熟和迁移(pharmaceuticals,2022,15:602)；anirudhan等人制造了一种壳聚糖/透明质酸的透皮薄膜装置，通过对壳聚糖进行改性以及利用透明质酸共价连接表现出对药物利多卡因释放的优异控制以及良好的机械性能和生物安全性(carbohydrate polymers,2016,152:687-69
3、脂质体是由卵磷脂和胆固醇等两亲性物质分散在水相中形成的一层或多层封闭囊泡，能包裹亲水和亲脂性药物，其具有的双分子层结构与细胞膜结构相同，在静脉、皮肤和口服给药等方面应用广泛。使用脂质体作为透皮给药的载体材料，具有以下优势：1、其具有缓释作用，可以将包裹的药物缓慢释放，延缓肾排泄和代谢，从而延长药用时间；2、具有靶向性和淋巴定向性，可以避免因药物的全身吸收而引起不良反应；3、经过脂质体包裹的药物稳定性更高；4、其可以降低药物的毒性，脂质体本身也具有无毒无害，无刺激，应用安全等特点。脂质体的合成方式在很大程度上决定了其性能，本课题组在先前的研究中利用高速均质、逆向蒸发及微射流高压的方式合成了嵌入式脂质体，使得大分子量透明质酸在急慢性光损伤皮肤治疗中的透皮利用率显著提高，为大分子活性物质的非侵入性应用提供了一种可行的途径(acta biomaterialia,2024)。
4、然而，对于多糖或者蛋白质来说，已有的方法并不能稳定得到的可以真正实现双层负载且能够促进多糖或者蛋白质透皮递送的脂质体。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的目的在于提供一种双层负载的、可促进多糖或蛋白的透皮递送脂质体及其制备方法和应用。
2、本专利技术的第一个方面，是提供一种双层负载多糖或蛋白透皮递送的脂质体的制备方法，包括以下步骤：
3、s1.胆固醇和磷脂室温下溶于有机溶剂中搅拌溶解完成后得到混合溶液a；
4、s2.将多糖或者蛋白加入到溶剂中至完全溶解得到溶液，之后将溶液缓慢加入到上述混合溶液a中混合均匀，得到混合溶液b，所述溶剂为水；
5、s3.混合均匀后，将混合溶液b通过旋转蒸发仪蒸发除去溶剂，且旋蒸过程中顺时针逆时针交替旋转，当混合溶液旋蒸至体积剩余为45％-55％时，加入多糖，继续旋蒸，得到固体；
6、其中，所设顺时针转速为90r/min-100r/min，逆时针转速为90r/min-100r/min，每个方向旋转时间为9-11min，所述加入的多糖或蛋白与剩余的混合溶液的质量体积比为0.8-1.2mg/ml；
7、s4.在固体中加入纯水后进行超声水合，通过微射流高压工艺得到所述双层负载多糖或者蛋白的脂质体悬浮液。
8、在其中一些实施例中，步骤s1中，所述磷脂为分子量为700-1000的大豆卵磷脂。
9、在其中一些实施例中，步骤s1中，所述胆固醇的分子量为300-400。
10、在其中一些实施例中，所述磷脂与胆固醇的质量比为30：(1～2)。
11、在其中一些实施例中，所述大豆卵磷脂与有机溶剂a的质量体积比为1～1.5mg/ml。
12、在其中一些实施例中，所述有机溶剂是无水乙醇、氯仿中的至少一种，优选地，所述有机溶剂是无水乙醇的氯仿混合物，更进一步地，无水乙醇与氯仿的用量比为1:1。
13、在其中一些实施例中，所述多糖为分子量为10～15kd的半乳糖阿拉伯聚糖、分子量为1000～1500kd的甘露聚糖、分子量为60～70kd的羟乙基脱乙酰壳多糖、或分子量为100～200kd的支链淀粉。
14、在其中一些实施例中，所述蛋白包括但不限于分子量为8000～10000kd的胶原蛋白，或分子量为50～70kd的弹性蛋白。
15、在其中一些实施例中，步骤s2中的所述搅拌为室温下的搅拌10～20min。
16、在其中一些实施例中，所述多糖与所述溶剂c的质量体积比为(10～20)mg：20ml。
17、在其中一些实施例中，步骤s2中的所述缓慢加入的时间为3.8-4.2ml/min。
18、在其中一些实施例中，步骤s2中，通过高剪切分散乳化机进行混合均匀，所述高剪切分散乳化机功率为200～300w，转速为7500-8500rpm，每次时间为4.5-5.5min。
19、在其中一些实施例中，所述旋蒸仪所设的温度为60～65℃，所设转速为80-120r/min优选90-100r/min，旋转蒸发时间为30～50min，蒸发瓶的真空度为70～100kpa。
20、在其中一些实施例中，所述固体e与纯水的质量体积比为1g：8-12ml，在超声仪中水合的时间为5～10min。
21、本专利技术的第二个方面，是提供有上述制备方法得到的双层负载多糖或蛋白透皮递送的脂质体。
22、本专利技术的第三个方面，是提供所述的双层负载多糖或蛋白透皮递送的脂质体在制备中的应用。
23、在其中一些实施例中，所述产品是药物或者护肤品。
24、本专利技术通过旋转蒸发的方式，以及在旋转蒸发的适当时候，加入合适量的多糖或者蛋白，能够获得真正实现双层负载的，且能够促进多糖或蛋白本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种双层负载多糖或蛋白透皮递送的脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的脂质体的制备方法，其特征在于，所述多糖为分子量为10～15kD的半乳糖阿拉伯聚糖、分子量为1000～1500kD的甘露聚糖、分子量为60～70kD的羟乙基脱乙酰壳多糖、或分子量为100～200kD的支链淀粉；
3.根据权利要求1所述的脂质体的制备方法，其特征在于，所述磷脂与胆固醇的质量比为30：(1～2)；和或
4.根据权利要求1所述的脂质体的制备方法，其特征在于，所述多糖或蛋白与所述溶剂的质量体积比为(10～20)mg：20mL。
5.根据权利要求1-4任一项所述的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤S2中，通过高剪切分散乳化机进行混合均匀，所述高剪切分散乳化机功率为200～300W，转速为7500-8500rpm，每次时间为4.5-5.5min。
6.根据权利要求1-4任一项所述的脂质体的制备方法，其特征在于，所述旋蒸仪所设的温度为60～65℃，所设转速为80-120r/min，优选90-100r/min，旋转蒸发
7.根据权利要求1-4任一项所述的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述固体与纯水的质量体积比为1g：8-12mL，水合的时间为5～10min。
8.根据权利要求1-4任一项所述的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤S2中的所述搅拌为室温下的搅拌10～20min；和或
9.由权利要求1-8任一项所述的制备方法获得的双层负载多糖透皮递送的脂质体或双层负载蛋白透皮递送的脂质体。
10.权利要求9所述的双层负载多糖透皮递送的脂质体或双层负载蛋白透皮递送的脂质体在制备预防或治疗皮肤损伤的产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种双层负载多糖或蛋白透皮递送的脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的脂质体的制备方法，其特征在于，所述多糖为分子量为10～15kd的半乳糖阿拉伯聚糖、分子量为1000～1500kd的甘露聚糖、分子量为60～70kd的羟乙基脱乙酰壳多糖、或分子量为100～200kd的支链淀粉；
3.根据权利要求1所述的脂质体的制备方法，其特征在于，所述磷脂与胆固醇的质量比为30：(1～2)；和或
4.根据权利要求1所述的脂质体的制备方法，其特征在于，所述多糖或蛋白与所述溶剂的质量体积比为(10～20)mg：20ml。
5.根据权利要求1-4任一项所述的脂质体的制备方法，其特征在于，步骤s2中，通过高剪切分散乳化机进行混合均匀，所述高剪切分散乳化机功率为200～300w，转速为7500-8500rpm，每次时间为4.5-5.5m...
【专利技术属性】
技术研发人员：马栋，赵子祎，邢辉，李国巍，胡云峰，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：
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