【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药鉴别及药物分析，具体涉及一种花椒药材uplc特征图谱的构建方法及不同基原和伪品的鉴别应用。
技术介绍
1、芸香科(rutaceae)花椒属(zanthoxylum l.)的植物在全世界约有250种，广泛种植于亚洲、美洲、非洲及大洋洲的热带和亚热带地区。世界上栽培花椒植物的国家主要有中国、日本和韩国，其中以中国的栽培面积最大、果皮产量最高、种质资源最为丰富。花椒是一种重要的芳香植物，果皮以其独特的风味常作为调味品和香料使用，同时，花椒果皮具有多种活性成分，具有“温中止痛，杀虫止痒”的功效，因此被认定为药食两用植物。
2、《中国药典》2020年版规定花椒基原为青椒zanthoxylum schinifolium sieb.etzucc.或花椒zanthoxylum bungeanum maxim.的干燥成熟果皮，虽然可根据药材性状鉴别区分基原，但也缺乏一种全面的鉴别方法。而市场上也常有其他混淆品作为花椒进行流通。例如市场上常见的青花椒主要是竹叶花椒，也叫藤椒，广泛种植于中国南部地区，其也常作为调味品，深受消费者喜爱。另外，簕欓花椒又称土花椒，在市场上也有流通。而且广泛的种植区域，种类多样的花椒品种类型，以及各地不一的管理栽培方式和采摘干制储藏过程，都会造成市场上花椒质量差异很大。
3、文献研究表明，花椒的颜色、气味、麻味是评价花椒品质的关键指标，其中花椒挥发油和酰胺类物质是反映花椒内在品质的主要指标，前者是花椒的主要挥发性成分，后者是主要呈麻物质。前期大量研究已经探讨了花椒的活性成分及功能，
技术实现思路
1、为了克服上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种花椒uplc特征图谱的建立方法，该方法快速、稳定且专属性强，通过所建立的uplc特征图谱可实现对花椒不同基原及伪品鉴别，为花椒药材质量控制提供科学的新方法。
2、本专利技术是通过以下技术方案实现:
3、一种花椒药材uplc特征图谱的构建方法，包括如下步骤：
4、取金丝桃苷、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素，制备混合对照品溶液；
5、取花椒药材制备供试品溶液；
6、将所述混合对照品溶液与所述供试品溶液分别进行超高效液相色谱分析，构建所述花椒药材uplc特征图谱；
7、其中，所述超高效液相色谱分析的条件包括：流动相a为乙腈和甲醇的混合溶液，流动相b为磷酸水溶液，采用梯度洗脱。
8、在其中一个实施例中，所述梯度洗脱的程序为：
9、0min～3min，流动相a的体积百分数由17％变化至23％；
10、3min～13min，流动相a的体积百分数由23％变化至30％；
11、13min～18min，流动相a的体积百分数为30％；
12、18min～23min，流动相a的体积百分数由30％变化至40％；
13、23min～38min，流动相a的体积百分数由40％变化至75％；
14、38min～40min，流动相a的体积百分数为75％。
15、在其中一个实施例中，在所述乙腈和甲醇的混合溶液中，乙腈和甲醇的体积比为4:3。
16、在其中一个实施例中，所述磷酸水溶液中，磷酸的体积分数为0.05％～0.15％。
17、在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：采用ymc triartc18色谱柱。
18、在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：检测波长为240nm。
19、在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：流速为0.28ml/min～0.32ml/min。
20、在其中一个实施例中，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：柱温为28℃～32℃。
21、在其中一个实施例中，所述制备混合对照品溶液包括如下步骤：
22、将金丝桃苷、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素与体积百分数为70％～100％的第一含醇水溶液混合；
23、所述第一含醇水溶液中的醇选自甲醇或者乙醇。
24、在其中一个实施例中，在所述混合对照品溶液中，所述金丝桃苷的浓度为30μg/ml～40μg/ml，所述羟基-α-山椒素的浓度为245μg/ml～255μg/ml，所述羟基-β-山椒素的浓度为20μg/ml～30μg/ml。
25、在其中一个实施例中，所述制备供试品溶液包括如下步骤：
26、粉碎花椒样品，过筛，与体积百分数为70％～100％的第二含醇水溶液混合，进行超声提取，过滤，取滤液；
27、所述第二含醇水溶液中的醇选自甲醇或者乙醇。
28、在其中一个实施例中，所述超声提取的条件包括：功率为250w～350w；频率为35khz～45khz；时间为25min～35min。
29、在其中一个实施例中，所述花椒药材uplc特征图谱包括11个特征峰，其中，与金丝桃苷参照物峰相对应的峰为s峰，各特征峰与s峰的相对保留时间在规定值的±10％范围之内，所述规定值为：峰1为0.55、峰2为0.60、峰3为0.75、峰4为0.85、峰6为1.04、峰7为1.30、峰8为1.33、峰9为2.47。
30、本专利技术还提供一种用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，包括如下步骤：
31、取不同基原花椒样品或伪品样品，制备待测样品溶液；
32、将所述待测样品溶液进行超高效液相色谱分析，将获得的所述待测样品溶液的图谱与根据花椒药材uplc特征图谱的构建方法所获得的特征图谱进行比较；
33、其中，所述超高效液相色谱分析的条件包括：流动相a为乙腈和甲醇的混合溶液，流动相b为磷酸水溶液，采用梯度洗脱。
34、在检测方法的其中一个实施例中，所述梯度洗脱的程序为：
35、0min～3min，流动相a的体积百分数由17％变化至23％；
36、3min～13min，流动相a的体积百分数由23％变化至30％；
37、13min～18min，流动相a的体积百分数为30％；
38、18min～23min，流动相a的体积百分数由30％变化至40％；
39、23min～38min，流动相a的体积百分数由40％变化至75％；
40、38min～40min，流动相a的体积百分数为75％。
41、在检测方法的其中一个实施例中，在所述乙腈和本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：
3.根据权利要求1所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件满足如下(1)～(2)中的至少一项：
4.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件满足如下(3)～(6)中的至少一项：
5.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述制备混合对照品溶液包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，在所述混合对照品溶液中，金丝桃苷的浓度为30μg/mL～40μg/mL，所述羟基-α-山椒素的浓度为245μg/mL～255μg/mL，所述羟基-β-山椒素的浓度为20μg/mL～30μg/mL。
7.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在
8.根据权利要求7所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超声提取的条件包括：功率为250W～350W；频率为35kHz～45kHZ；时间为25min～35min。
9.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述花椒药材UPLC特征图谱包括11个特征峰，其中，与金丝桃苷参照物峰相对应的峰为S峰，各特征峰与S峰的相对保留时间在规定值的±10％范围之内，所述规定值为：峰1为0.55、峰2为0.60、峰3为0.75、峰4为0.85、峰6为1.04、峰7为1.30、峰8为1.33、峰9为2.47。
10.一种用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
11.根据权利要求10所述的用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：
12.根据权利要求10所述的用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件满足如下(1)～(2)中的至少一项：
13.根据权利要求10～12任一项所述的用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件满足如下(3)～(6)中的至少一项：
14.根据权利要求10～12任一项所述的用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，其特征在于，所述制备待测样品溶液包括如下步骤：
15.根据权利要求14所述的用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，其特征在于，所述超声提取的条件包括：功率为250W～350W；频率为35kHz～45kHZ；时间为25min～35min。
16.根据权利要求10～12或权利要求15任一项所述的用于鉴别花椒药材不同基原及其伪品的检测方法，其特征在于，满足如下(7)～(8)中的至少一项：
...【技术特征摘要】
1.一种花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：
3.根据权利要求1所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件满足如下(1)～(2)中的至少一项：
4.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件满足如下(3)～(6)中的至少一项：
5.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，所述制备混合对照品溶液包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，在所述混合对照品溶液中，金丝桃苷的浓度为30μg/ml～40μg/ml，所述羟基-α-山椒素的浓度为245μg/ml～255μg/ml，所述羟基-β-山椒素的浓度为20μg/ml～30μg/ml。
7.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，所述制备供试品溶液包括如下步骤：
8.根据权利要求7所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，所述超声提取的条件包括：功率为250w～350w；频率为35khz～45khz；时间为25min～35min。
9.根据权利要求1～3任一项所述的花椒药材uplc特征图谱的构建方法，其特征在于，所述花椒药材u...
【专利技术属性】
技术研发人员：马懿飞，周湘媛，李振雨，丘娴，夏天睿，谢远远，何民友，彭娇，罗佩琪，孙冬梅，陈向东，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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