【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物培养，具体涉及一种水青树愈伤组织诱导培养基、水青树不定芽诱导培养基、水青树不定根诱导培养基及其应用。
技术介绍
1、濒危植物水青树是昆栏树科水青树属的单属种，具有药用价值、生态价值、观赏价值以及工业价值。近年来植物本身原因和人为因素导致水青树野外生境中种群逐渐衰退。利用组织培养技术可以大量提供愈伤组织和组培苗，进而帮助水青树种群恢复、完善其种质资源库、以及为其遗传转化体系奠定基础。
2、目前公开的一种水青树的组培繁育方法，包括以下步骤：(1)外植体(茎段)的选择及消毒；(2)水青树提取液的制备；(3)初代诱导培养使茎段长出新芽；(4)继代增殖培养使新芽形成丛生芽；(5)将丛生芽的单芽接种到生根培养基中诱导生根；(6)试管苗的驯化和移栽。虽然通过该方法获得了试管苗，但该方法存在以下不足：(1)外植体茎段的获取受时间限制；(2)采摘大量茎段对水青树植株后续生长具有重要影响；(3)茎段消毒用到含毒的消毒剂升汞，对环境及实验人员伤害较大。同时国内没有公开报道水青树的愈伤组织诱导及分化体系，故至今水青树的愈伤组织诱导体系一直未建立，直接影响了以此技术为基础的水青树转基因技术体系的发展。
3、因此当前需要开发一种水青树愈伤组织诱导及植株再生的技术方法，为水青树的快繁和遗传转化体系的建立提供技术支撑。
技术实现思路
1、本专利技术以水青树种子获取无菌苗，再以无菌苗的子叶、胚根、胚轴、茎段等为外植体进行实验，进而不受时间限制获取外植体，同时采收种子后不会对
2、为了达到上述目的，可以采用以下技术方案：
3、本专利技术一方面提供一种水青树愈伤组织诱导培养基，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、蔗糖和琼脂。
4、优选地，6-苄氨基嘌呤的添加量为0.4mg/l-0.6mg/l；和/或2,4-二氯苯氧乙酸的添加量为0.4mg/l-0.6mg/l；和/或蔗糖的添加量为18g/l-22g/l；和/或琼脂的添加量为4g/l-6g/l。
5、本专利技术另一方面提供一种水青树不定芽诱导培养基，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂。
6、优选地，6-苄氨基嘌呤的添加量为0.5mg/l-1.5mg/l；和/或萘乙酸的添加量为0.005mg/l-0.015mg/l；和/或蔗糖的添加量为18g/l-22g/l；和/或琼脂的添加量为4g/l-6g/l。
7、本专利技术再一方面提供一种水青树不定根诱导培养基，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂。
8、优选地，6-苄氨基嘌呤的添加量为0.4mg/l-0.6mg/l；和/或萘乙酸的添加量为0.09mg/l-0.11mg/l；和/或蔗糖的添加量为18g/l-22g/l；和/或琼脂的添加量为4g/l-6g/l。
9、本专利技术再一方面提供一种水青树愈伤组织诱导、不定芽诱导以及不定根诱导的方法，包括：
10、(1)将水青树无菌苗子叶使用本专利技术中的水青树愈伤组织诱导培养基进行培养得水青树愈伤组织；
11、(2)将水青树带叶腋茎段使用本专利技术中的水青树不定芽诱导培养基进行培养得水青树不定芽；
12、(3)将水青树不定芽使用本专利技术中的水青树不定根诱导培养基进行培养得水青树不定根。
13、优选地，方法满足以下条件中的一种或多种组合：
14、(a)步骤(1)的培养条件包括在25℃±2℃黑暗培养；
15、(b)步骤(2)的培养条件包括在25℃±2℃，光照强度1500lx，12h/d进行培养；
16、(c)步骤(3)的培养条件包括在25℃±2℃，光照强度1500lx，12h/d进行培养。
17、优选地，水青树无菌苗子叶的培养包括：将水青树种子浸泡，消毒，接种无菌苗萌发培养基光照培养得水青树无菌苗子叶。
18、优选地，无菌苗萌发培养基包括完全1/4ms培养基、7.5g/l蔗糖和6.5g/l琼脂。
19、本专利技术有益效果至少包括：基于本专利技术中的培养基的培养方法不受季节影响，培育时间短，繁殖速率快，解决了目前水青树扦插成活率低、繁殖周期长、品质退化等问题，实现了水青树良种大规模繁育。
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1.水青树愈伤组织诱导培养基，其特征在于，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、蔗糖和琼脂。
2.根据权利要求1所述的水青树愈伤组织诱导培养基，其特征在于，6-苄氨基嘌呤的添加量为0.4mg/L-0.6mg/L；和/或2,4-二氯苯氧乙酸的添加量为0.4mg/L-0.6mg/L；和/或蔗糖的添加量为18g/L-22g/L；和/或琼脂的添加量为4g/L-6g/L。
3.水青树不定芽诱导培养基，其特征在于，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂。
4.根据权利要求3所述的水青树不定芽诱导培养基，其特征在于，6-苄氨基嘌呤的添加量为0.5mg/L-1.5mg/L；和/或萘乙酸的添加量为0.005mg/L-0.015mg/L；和/或蔗糖的添加量为18g/L-22g/L；和/或琼脂的添加量为4g/L-6g/L。
5.水青树不定根诱导培养基，其特征在于，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂。
6.根据权利要求5所述的水青
7.一种水青树愈伤组织诱导、不定芽诱导以及不定根诱导的方法，其特征在于，包括：
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，方法满足以下条件中的一种或多种组合：
9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，水青树无菌苗子叶的培养包括：将水青树种子浸泡，消毒，接种无菌苗萌发培养基光照培养得水青树无菌苗子叶。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，无菌苗萌发培养基包括完全1/4MS培养基、7.5g/L蔗糖和6.5g/L琼脂。
...【技术特征摘要】
1.水青树愈伤组织诱导培养基，其特征在于，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸、蔗糖和琼脂。
2.根据权利要求1所述的水青树愈伤组织诱导培养基，其特征在于，6-苄氨基嘌呤的添加量为0.4mg/l-0.6mg/l；和/或2,4-二氯苯氧乙酸的添加量为0.4mg/l-0.6mg/l；和/或蔗糖的添加量为18g/l-22g/l；和/或琼脂的添加量为4g/l-6g/l。
3.水青树不定芽诱导培养基，其特征在于，包括木本植物用培养基和添加剂，添加剂包括6-苄氨基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂。
4.根据权利要求3所述的水青树不定芽诱导培养基，其特征在于，6-苄氨基嘌呤的添加量为0.5mg/l-1.5mg/l；和/或萘乙酸的添加量为0.005mg/l-0.015mg/l；和/或蔗糖的添加量为18g/l-22g/l；和/或琼脂的添加量为4g/l-6g/l。
5.水青树不定根...
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