【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，属于微生物培养与生物酶水解。
技术介绍
1、近年来，随着糖生物工程的兴起，功能性低聚糖因其特殊的生物学功能而作为功能性添加剂在食品、饲料、化妆品上的应用备受关注。功能性低聚糖是指聚合度为2～20的高分子多糖不完全降解产物。功能性低聚糖的生物学功能主要表现为对人或动物体肠道内双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等有益菌有选择性增殖作用、限制病原菌或条件致病菌在消化道中定植、刺激机体产生免疫因子和调节肠道酸碱微环境等。功能性低聚糖常采用稀酸水解、蒸汽爆破或酶水解的方式制备。前期研究成果发现，以高粘度多糖为产酶诱导物时，丝状真菌可分泌相关底物水解酶将高粘度多糖逐级水解成不完全降解产物、低聚糖和单糖。本课题组通过调控液态发酵参数成功实现多糖水解酶与功能低聚糖的同步制备(参照专利：zl202210741463.8)，但功能低聚糖得率不甚理想。究其原因是由于丝状真菌在正常发酵条件下，丝状真菌为了维持自身正常生长代谢，会将不完全降解产物和低聚糖进一步降解为可直接利用的单糖，而不利于低聚糖的积累。因而，如能采用一定的手段限制丝状真菌的正常代谢，并保留发酵液中水解酶的活性，将有助于功能性低聚糖的积累，实现低聚糖的高效制备。
技术实现思路
1、专利技术目的：本专利技术的目的是提供了一种提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法。
2、技术方案：本专利技术提供的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，以丝状真菌作为发酵菌种，利用高粘度多糖为诱导碳源，以两段发酵模式制
3、所述第一段时间发酵时间为0～48h，第二段发酵时间为48～168h。
4、所述丝状真菌为里氏木霉(t.reesei)、黑曲霉(a.niger)、绿色木霉(t.viride)中的一种或多种。
5、所述高粘度多糖包括植物粘多糖。
6、所述植物粘多糖包括半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、阿拉伯木聚糖、岩藻糖或卡拉胶。
7、所述丝状真菌的接种量为5％，接种所用孢子悬浮液的孢子含量为1.0×107～8cfu/ml。
8、所述发酵条件还包括摇床转速设置为170转/min。
9、所述发酵所用培养基还包括葡萄糖、硫酸铵、尿素、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸锌、氯化钴和柠檬酸。
10、所述方法还包括发酵液处理方法为：发酵液经10000转/min离心5min获得上清液，上清液经超滤处理，透过液为阿拉伯低聚木糖溶液。
11、超滤处理时所用的超滤膜为3000～5000da。
12、有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下突出的显著优点：本专利技术的方法通过两段发酵模式，解决了液态发酵过程中丝状真菌高度活跃，会持续将低聚糖水解为可直接代谢单糖，不利于低聚糖积累的问题。通过本方法制备的功能性低聚糖得率可显著提升至78％左右。
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1.一种提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，以丝状真菌作为发酵菌种，利用高粘度多糖为诱导碳源，以两段发酵模式制备低聚糖；其中第一段发酵温度为28～30℃，第二段发酵温度为30～70℃。
2.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述第一段时间发酵时间为0～48h，第二段发酵时间为48～168h。
3.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述丝状真菌为里氏木霉(T.reesei)、黑曲霉(A.niger)、绿色木霉(T.viride)中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述高粘度多糖包括植物粘多糖。
5.根据权利要求4所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述植物粘多糖包括半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、阿拉伯木聚糖、岩藻糖或卡拉胶。
6.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述丝状真菌的接种量为5％，接种所用孢子悬浮液的孢子含量为1.0×107～8cfu
7.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述发酵条件还包括摇床转速设置为170转/min。
8.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述发酵所用培养基还包括葡萄糖、硫酸铵、尿素、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸锌、氯化钴和柠檬酸。
9.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述方法还包括发酵液处理方法为：发酵液经10000转/min离心5min获得上清液，上清液经超滤处理，透过液为阿拉伯低聚木糖溶液。
10.根据权利要求9所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，超滤处理时所用的超滤膜为3000～5000Da。
...【技术特征摘要】
1.一种提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，以丝状真菌作为发酵菌种，利用高粘度多糖为诱导碳源，以两段发酵模式制备低聚糖；其中第一段发酵温度为28～30℃，第二段发酵温度为30～70℃。
2.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述第一段时间发酵时间为0～48h，第二段发酵时间为48～168h。
3.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述丝状真菌为里氏木霉(t.reesei)、黑曲霉(a.niger)、绿色木霉(t.viride)中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述高粘度多糖包括植物粘多糖。
5.根据权利要求4所述的提高液态发酵法制备低聚糖得率的方法，其特征在于，所述植物粘多糖包括半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、阿拉伯木聚糖、岩藻糖或卡拉胶。
6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨磊，罗蓉蓉，仝子叶，宋勇琴，许伟，邵荣，陆欣叶，周龚雨，彭子萌，
申请(专利权)人：盐城工学院，
类型：发明
国别省市：
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