【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，特别涉及基于wdhd1功能的生物标志物在肝细胞癌诊断和治疗中的应用。
技术介绍
1、肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，几十年来死亡率增长最快。肝细胞癌(hcc)是肝癌最常见的病理类型，约占病例的90％。hcc是一种高度异质性的疾病，具有隐匿性起病、高度侵袭性、高复发率和转移率的临床特征。大多数患者在晚期被诊断出来，此时肝脏切除和移植手术并不可行。尽管近年来已经为hcc应用了许多新的有效方法，如手术、化疗、放疗、免疫治疗、天然化学物质和纳米技术；然而，hcc患者的预后仍然很差，5年总生存率低于20％。因此，揭示hcc进展的分子机制并寻找新的治疗靶点以改善预后至关重要。
2、wdhd1是一种融合了wd重复序列和hmg-box dna结合域的蛋白质，其特点是具有多个n端wd40域和一个c端hmg box。wd40域在许多真核蛋白中普遍存在，可能作为信号传导、前mrna加工和细胞骨架组装的适配器或调节模块。研究表明，wdhd1被认为是dna复制和dna损伤修复的关键贡献者，对细胞增殖、胚胎发育和姐妹染色单体粘连起着至关重要的作用。此外，还发现wdhd1的失调与多种类型癌症的发展有关。
3、现有技术中，已有研究报道过wdhd1作为标志物在hcc的诊断及患者预后的预测中具有潜力，例如，专利文献cn103194532a、cn114854834a和科研论文rong-quan he et al,prognosis prediction ability and prospective biologica
4、鉴于此，为了更好的预警肝癌的发生，有必要寻找到被修饰后wdhd1的关键标志物，并将其用于hcc早期诊断和治疗。
技术实现思路
1、为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的之一是，提供一种诊断早期肝癌的产品，使患者在早期就得以治疗，进而提高生存率和生活质量。
2、本专利技术的目的之二是，提供一种治疗手段和药物组合物，实现肝癌的精准分子治疗。
3、本专利技术的目的之三是，提供一种筛选用于预防或治疗肝癌的待筛选物质的方法。
4、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
5、第一方面，本专利技术将wdhd1的修饰形式wdhd1 s141磷酸化作为生物标志物，应用于制备肝癌早期诊断或预测试剂。
6、本专利技术的方案中wdhd1的修饰形式wdhd1 s141磷酸化指的是wdhd1的氨基酸序列第141位发生磷酸化；wdhd1是指具有国际公共核酸序列数据库genebank中序列号为nc_0000014.9的序列的基因。
7、本专利技术所述的方案中，通过使用针对wdhd1 s141磷酸化的免疫检测试剂检测来自受试者的样本中wdhd1 s141磷酸化的表达水平，即可有效地对受试者患肝癌的情况进行初步评估和预测。
8、本专利技术优选的方案中，通过使用针对wdhd1和wdhd1 s141磷酸化的免疫检测试剂检测来自受试者的样本中的wdhd1的表达水平和wdhd1 s141磷酸化的表达水平，即可更加有效地对受试者患肝癌的情况进行初步评估和预测。
9、进一步的，所述的来自受试者的样本是受试者的肿瘤组织。更优选的方案中，为了提高诊断的准确性，所述的受试者的样本还包括癌旁组织。
10、本专利技术优选的方案中，所述的肝癌早期初步评估或预测试剂是基于elisa或western blot方法的免疫检测试剂；最优选基于western blot方法的免疫检测试剂。
11、第二方面，本专利技术还提供一种抗体，所述的抗体是能够特异性扩增所述wdhd1s141磷酸化的抗体。
12、第三方面本专利技术还提供一种可定量或半定量检测蛋白质的试剂盒，内含本专利技术第二方面所述的抗体。
13、本专利技术优选的方案中，所述的可定量或半定量检测蛋白质的试剂盒是可通过免疫印迹(western blot)方法检测蛋白质的试剂盒；所述的试剂盒内有第一抗体和第二抗体；所述的第一抗体是本专利技术第二方面所述的抗体，所述的第二抗体为与所述第一抗体同源的酶标记抗体。
14、第四方面，本专利技术还提供能够特异性扩增所述wdhd1 s141磷酸化的抗体在制备肝癌诊断试剂盒中的应用。
15、本专利技术进一步优选的方案中，所述的试剂盒内还有选自下组的一种或多种物质：容器、使用说明书、阳性对照物、阴性对照物、缓冲剂、助剂或溶剂。
16、其中，使用说明书记载了如何采用试剂盒进行检测，和如何利用检测结果对肝癌发展进行判断、对治疗方案进行选择。
17、第五方面，本专利技术还提供wdhd1 s141磷酸化在制备肝癌治疗药物中的应用。
18、所述的应用中，将wdhd1蛋白141位点的s突变成a得到wdhd1 s141a多肽，该多肽可以抑制wdhd1在141位点的磷酸化修饰，能够降低机体内源性wdhd1 s141磷酸化水平，因此作为一种wdhd1 s141磷酸化抑制剂，用于制备肝癌治疗药物。
19、优选的所述的应用中，选择第一抑制剂作为主要活性成分，与其他药物及药学上可接受的载体和/或辅料共同制备肝癌治疗药物；所述的第一抑制剂是所述的wdhd1 s141a多肽。
20、进一步优选的应用中，选择所述的第一抑制剂和第二抑制剂的混合物作为主要活性成分，与其他药物及药学上可接受的载体和/或辅料共同制备肝癌治疗药物；所述的第二抑制剂是能够抑制wdhd1或涉及wdhd1上游或下游途径的物质的表达的物质；可以选自醋酸巴多昔芬bazedoxifene acetate(bza)或(e)-5-(3,4-dichlorostyryl)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3h)-ol。由此可以实现wdhd1 s141磷酸化抑制剂wdhd1 s141a多肽与wdhd1抑制剂的联用，能够获得更理想的治疗效果。
21、第六方面，本专利技术还提供一种治疗肝癌的药物，包含wdhd1 s141磷酸化抑制剂和药学上可接受的载体和/或辅料；所述的wdhd1 s141磷酸化抑制剂是能够降低机体内源性wdhd1 s141磷酸化水平的物质，优选wdhd1蛋白141位点的s突变成a得到的wdhd1s141a多肽。
22、本专利技术优选的治疗肝癌的药物，进一步包含wdhd1抑制剂；所述的wdhd1抑制剂是能够抑制wdhd1或涉及wdhd1上游或下游途径的物质的表达的物质；可以选自醋酸巴多昔芬bazedoxifene acetate(bza)或(e)-5-(3,4-dichlorostyryl)benzo[本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.WDHD1的修饰形式WDHD1 S141磷酸化作为生物标志物在制备肝癌早期诊断或预测试剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的肝癌早期诊断或预测试剂是用于检测来自受试者的样本中WDHD1 S141磷酸化的表达水平的试剂。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：检测来自受试者的样本中WDHD1 S141磷酸化的表达水平，是基于Western Blot方法实现的。
4.一种可定量或半定量检测蛋白质的试剂盒，内含可特异性扩增所述WDHD1 S141磷酸化的抗体。
5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒是可通过免疫印迹(WesternBlot)方法检测蛋白质的试剂盒；所述的试剂盒内有第一抗体和第二抗体；所述的第一抗体是可特异性扩增所述WDHD1 S141磷酸化的抗体，所述的第二抗体为与所述第一抗体同源的酶标记抗体。
6.WDHD1 S141磷酸化在制备肝癌治疗药物中的应用，其特征在于：选择第一抑制剂作为主要活性成分，与其他药物及药学上可接受的载体和/或辅料共同制备肝癌治疗药物；所述的第一
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述的主要活性成分还包括第二抑制剂；所述的第二抑制剂选自Bazedoxifene acetate(BZA)或
8.一种治疗肝癌的药物，包含WDHD1 S141磷酸化抑制剂和药学上可接受的载体和/或辅料；所述的WDHD1 S141磷酸化抑制剂是将WDHD1蛋白141位点的S突变成A得到的WDHD1S141A多肽。
9.如权利要求8所述的药物，其特征在于：进一步包含WDHD1抑制剂；所述的WDHD1抑制剂是Bazedoxifene acetate(BZA)或
10.一种以WDHD1 S141磷酸化水平为标准的筛选预防或治疗肝癌的物质的方法，步骤包括：1)使用待筛选物质处理表达或含有WDHD1基因的体系；和2)检测所述体系中WDHD1基因的表达；其中，若所述待筛选物质可降低内源性的WDHD1 S141磷酸化水平(优选显著降低，如低20％以上，较佳的低50％以上，更佳的低80％以上)，则表明该待筛选物质能够预防或治疗肝癌的物质；所述的体系包括：细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系或动物体系。
...【技术特征摘要】
1.wdhd1的修饰形式wdhd1 s141磷酸化作为生物标志物在制备肝癌早期诊断或预测试剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的肝癌早期诊断或预测试剂是用于检测来自受试者的样本中wdhd1 s141磷酸化的表达水平的试剂。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：检测来自受试者的样本中wdhd1 s141磷酸化的表达水平，是基于western blot方法实现的。
4.一种可定量或半定量检测蛋白质的试剂盒，内含可特异性扩增所述wdhd1 s141磷酸化的抗体。
5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒是可通过免疫印迹(westernblot)方法检测蛋白质的试剂盒；所述的试剂盒内有第一抗体和第二抗体；所述的第一抗体是可特异性扩增所述wdhd1 s141磷酸化的抗体，所述的第二抗体为与所述第一抗体同源的酶标记抗体。
6.wdhd1 s141磷酸化在制备肝癌治疗药物中的应用，其特征在于：选择第一抑制剂作为主要活性成分，与其他药物及药学上可接受的载体和/或辅料共同制备肝癌治疗药物；所述的第一抑制剂是将wdhd1蛋白141位点的s突变成...
【专利技术属性】
技术研发人员：张思同，丁元，王伟林，毕艳丽，陈霄，项征，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：
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