【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及美洲大蠊发酵产物的制备，具体为一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法及其应用。
技术介绍
1、美洲大蠊在中国分布广泛，入药历史悠久。美洲大蠊体内具有丰富的生物活性物质，其主要化学成分包括信息素、蛋白质、脂肪酸及其酯、氨基酸、生物碱、烷烃、多糖、异黄酮、蟑螂油和多肽。美洲大蠊提取物具有抗菌、消炎、抗氧化、镇痛、解热及抗肿瘤等药用价值，在医药领域具有良好的应用前景，其干燥虫体的醇提取物制成的一种中成药制剂-康复新液在临床上应用广泛。
2、伴随着人们的健康意识不断提高，微生物发酵技术作为一种绿色的生物转化技术逐渐成为了研究的热点。微生物发酵技术能促进底物中化合物发生生物转化作用，刺激生物活性化合物的产生(这些化合物最初可能在未加工的底物中缺乏或少量存在)，减少抗营养成分如蛋白酶抑制剂、植酸、脲酶、草酸的含量，提高食用昆虫微生物安全性的技术，可能控制昆虫产品中有害微生物的生长，改善风味，延长保质期，提高生物质的营养价值以及生物功能特性如抗氧化、抗菌、抗衰老活性、抗糖尿病和抗动脉粥样硬化活性等功能。
3、抗氧化活性的研究在食品、化妆品、药理学和医学等领域一直有着不可磨灭的影响。抗氧化剂在许多慢性疾病的发展中起着重要作用，例如心血管疾病、衰老、心脏病、贫血、癌症、炎症。氧化应激反应是伤口愈合过程中不可避免的环节，尤其是在炎症阶段，因此，抗氧化活性也被认为是理想伤口敷料的基本特征之一。由此可见，美洲大蠊药用价值的发挥离不开它的抗氧化活性。
4、昆虫生物活性肽具有抗氧化、抗高血压和抗菌等作用
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足之处，本专利技术的目的在于提供一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法及其应用。
2、为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，包括以下步骤：
4、s1.美洲大蠊脱脂粉的制备：将美洲大蠊干燥成虫粉碎后，采用索氏提取法脱脂，烘干虫粉，过80目筛即得到美洲大蠊脱脂粉；
5、s2.在美洲大蠊脱脂粉中加入蒸馏水，添加5 -10％的葡萄糖溶液，高温灭菌，冷却至室温后得到发酵底物；
6、s3.在超净工作台中以乳酸乳球菌乳亚种、瑞士乳杆菌、酿酒酵母的先后顺序依次在发酵底物中加入对应菌种5-8％的菌悬液，加入的时间间隔为24h，得到接种菌悬液的样品；
7、s4.将接种菌悬液的样品在30-33℃的温度下，在摇床中培养68-72h，得到基于美洲大蠊的益生菌发酵产物；
8、其中，所述乳酸乳球菌乳亚种、瑞士乳杆菌、酿酒酵母对应的菌悬液的比例为3:2:1。
9、优选的，步骤s3中，所述的乳酸乳球菌乳亚种、瑞士乳杆菌、酿酒酵母的菌悬液的的制备包括以下步骤：
10、s101.乳酸乳球菌乳亚种、瑞士乳杆菌、酿酒酵母分别在各自适宜的条件下静置培养24 -48h得到各自的混合液并做好标记；
11、s102.分别取5-8ml混合液放入盛有100ml液体培养基的锥形瓶中，置于摇床中165-180rpm培养，对浓度大的菌悬液适当稀释，使其光密度值在0.1-0.65，得到各自的单菌落和各自菌液处于对数生长期的时间；
12、s103.将各自的单菌落分别置于摇床中培养，乳酸乳球菌乳亚种培养16h，瑞士乳杆菌培养9h，酿酒酵母培养28h，然后离心除去上清液，用pbs溶液洗涤沉淀再用无菌水重悬，使细菌悬浮液的终浓度为107cfu/ml，得到乳酸乳球菌乳亚种、瑞士乳杆菌、酿酒酵母对应的菌悬液。
13、优选的，步骤s101中，所述各自适宜的条件为：瑞士乳杆菌采用mrs培养基，培养温度为37℃，ph值为6.5；乳酸乳球菌乳亚种采用m17培养基，培养温度为30℃，ph值为7.0；酿酒酵母采用ypd培养基，培养温度为28℃，ph值为5.6。
14、优选的，步骤s103中，所述pbs溶液的组分为：0.24-0.3份磷酸二氢钾、3.6-4份十二水合磷酸氢二钠、8 -10份氯化钠、0.2 -0.4份氯化钾和800-1000份蒸馏水。
15、优选的，步骤s103中，摇床培养的转速为165-180rpm。
16、优选的，步骤s103中，离心的转速为10000-12000rpm，温度为3-5℃。
17、优选的，步骤s2中，美洲大蠊脱脂粉与蒸馏水的比例为1：8-10。
18、优选的，步骤s2中，高温灭菌的温度为121-130℃，时间为15-20min。
19、优选的，步骤s4中，摇床的转速为165-180rpm。
20、一种根据所述制备方法制得的美洲大蠊的益生菌发酵产物在抗氧化方面的应用。
21、与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
22、1、本专利技术通过微生物发酵技术，相比于化学合成具有绿色、安全等特性，不但没有人工合成产物的副作用，同时还伴随着生物化学性能的改善和固有原料有毒成分的消耗。
23、2、相较于单菌种发酵和两种菌混合发酵，本专利技术通过三种菌混合发酵的美洲大蠊产物的多肽含量和抗氧化活性显著提高。
24、3、本专利技术通过微生物菌种混合发酵更好的释放了活性物质，显著提升了美洲大蠊发酵产物的抗氧化活性。
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1.一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述的乳酸乳球菌乳亚种、瑞士乳杆菌、酿酒酵母的菌悬液的的制备包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S101中，所述各自适宜的条件为：瑞士乳杆菌采用MRS培养基，培养温度为37℃，pH值为6.5；乳酸乳球菌乳亚种采用M17培养基，培养温度为30℃，pH值为7.0；酿酒酵母采用YPD培养基，培养温度为28℃，pH值为5.6。
4.根据权利要求2所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S103中，所述PBS溶液的组分为：0.24-0.3份磷酸二氢钾、3.6-4份十二水合磷酸氢二钠、8-10份氯化钠、0.2-0.4份氯化钾和800-1000份蒸馏水。
5.根据权利要求2所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S103中，摇床培养的转速为165-180rpm。>
6.根据权利要求2所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S103中，离心的转速为10000-12000rpm，温度为3-5℃。
7.根据权利要求1所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S2中，美洲大蠊脱脂粉与蒸馏水的比例为1：8-10。
8.根据权利要求1所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S2中，高温灭菌的温度为121-130℃，时间为15-20min。
9.根据权利要求1所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤S4中摇床的转速为165-180rpm。
10.一种根据权利要求1～9任意一项所述制备方法制得的美洲大蠊的益生菌发酵产物在抗氧化方面的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所述的乳酸乳球菌乳亚种、瑞士乳杆菌、酿酒酵母的菌悬液的的制备包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤s101中，所述各自适宜的条件为：瑞士乳杆菌采用mrs培养基，培养温度为37℃，ph值为6.5；乳酸乳球菌乳亚种采用m17培养基，培养温度为30℃，ph值为7.0；酿酒酵母采用ypd培养基，培养温度为28℃，ph值为5.6。
4.根据权利要求2所述的一种基于美洲大蠊的益生菌发酵产物的制备方法，其特征在于，步骤s103中，所述pbs溶液的组分为：0.24-0.3份磷酸二氢钾、3.6-4份十二水合磷酸氢二钠、8-10份氯化钠、0.2-0.4份氯化钾和800-1000份蒸馏水。
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