【技术实现步骤摘要】
本申请涉及检测的，尤其是涉及一种检测免疫球蛋白g活性的方法。
技术介绍
1、免疫球蛋白g(igg)是牛初乳中的主要抗体，约占免疫球蛋白总量的80-85％。igg分为两个亚类，igg1(最丰富的免疫球蛋白亚型)和igg2。众所周知，免疫球蛋白有益于人体健康，在免疫反应中具有重要作用。当宿主接触到抗原时，抗体结合、识别作用于细菌、毒素、病毒和其他抗原。当再次接触到相同抗原，机体产生相同抗体，有效地消除感染。
2、免疫球蛋白的活性、稳定性和有效性容易受到以下几个因素的显著影响。温度是一个关键因素，过高或过低都可导致蛋白质变性或功能降低。ph值也是一个关键因素，偏离最适ph值会改变免疫球蛋白的结构构象，影响抗原结合能力。酶降解也会对igg活性造成威胁，其中特定的酶可能会降解免疫球蛋白，导致活性丧失。此外，与其他成分的相互作用，如与其他蛋白质或脂质结合，可以增强或抑制免疫球蛋白的活性。这些相互作用可能会形成复合物，改变免疫球蛋白的有效性或其与病原体结合的能力。
3、牛初乳igg的含量和活性检测在各个领域，尤其是在治疗开发和营养补充剂的配方中至关重要。igg功能的准确检测对于确保产品有效性和安全性十分重要。然而，检测igg活性的传统方法，如elisa或比浊法，往往复杂、耗时且昂贵。这些技术通常需要专门的实验室设备、准确的样品制备和操作熟练的人员，这限制了它们的可及性和可扩展性。此外，温度和ph值等环境因素会降低结果的可重复性和可靠性。
4、因此，需要开发一种方法简单、更有效、更具成本效益和安全性的方法应用
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本申请提供一种检测免疫球蛋白g活性的方法。本申请的目的是解决当前检测免疫球蛋白g(igg)活性方法的复杂性、耗时和高成本问题。
2、本申请中公开的一种检测免疫球蛋白g活性的方法，简化了检测过程，显著降低了检测成本，相比于传统方法，更加经济有效。本申请的最终目的是为igg活性检测提供更实用、高效、可靠的解决方案，从而提高基于牛初乳的产品和疗法的有效性。
3、第一方面，本申请提供一种检测免疫球蛋白g活性的方法，采用如下的技术方案：
4、一种检测免疫球蛋白g活性的方法，具体步骤如下：
5、(1)对牛初乳进行离心脱脂，得到脱脂牛初乳；
6、(2)将脱脂牛初乳的温度升温至40-50℃，调节脱脂牛初乳的ph为4.4-4.6，离心，除去酪蛋白，得到乳清；
7、(3)调节乳清的ph为3.6-3.8，升温至80-90℃，加热1-5min，降温至4℃，离心，得到活性免疫球蛋白g溶液；
8、(4)调节步骤(3)得到的活性免疫球蛋白g溶液的ph，并对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测。
9、通过采用上述技术方案，本申请公开的一种检测免疫球蛋白g活性的方法，该方法利用igg分子在特定ph和离子强度条件下的聚集-分散行为，通过监测可电离氨基酸的变化及其对igg分子净电荷和等电点的影响来准确推断igg活性，特别是其与病原体或抗原的相互作用。
10、优选的，所述步骤(1)中，离心脱脂的步骤如下：采用离心设备对牛初乳进行离心脱脂，离心设备的转速为8000-12000rpm，离心脱脂的时间为20-30分钟，离心设备的温度为4℃-10℃。
11、优选的，所述步骤(2)中，调节脱脂牛初乳的ph为4.4-4.6所用的溶液为酸溶液。
12、优选的，所述步骤(2)中，酸溶液为盐酸溶液或柠檬酸溶。
13、进一步优选的，所述步骤(2)中，酸溶液为0.1m盐酸溶液。
14、优选的，所述步骤(2)中离心的步骤如下：采用离心设备对脱脂牛初乳进行离心，离心设备的转速为8000-12000rpm；离心的时间为20-30分钟；离心设备的温度为4℃-10℃。
15、优选的，所述步骤(2)中离心的过程中控制脱脂牛初乳的温度为40-50℃。
16、优选的，所述步骤(3)中离心的步骤如下：采用离心设备对乳清进行离心，离心设备的转速为8000-12000rpm，离心的时间为20-30分钟，离心设备的温度为4℃-10℃。
17、所述步骤(3)中，调节乳清的ph为3.6-3.8所用的溶液为酸溶液。
18、优选的，所述步骤(3)中，酸溶液为盐酸溶液或柠檬酸溶液。
19、进一步优选的，所述步骤(3)中，酸溶液为0.1m盐酸溶液。
20、优选的，所述步骤(4)中对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测的方法为分光光度法、紫外吸收光谱法、沉淀重量法或色度计法中的任意一种。
21、优选的，所述步骤(4)中对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测的方法为：采用分光光度法对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测时，先调节活性免疫球蛋白g溶液的ph为5.4-6.4，再采用分光光度法对igg的活性进行检测；
22、当紫外吸收光谱法对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测时，先调节活性免疫球蛋白g溶液的ph为3-8，再采用紫外吸收光谱法对igg的活性进行检测。
23、当采用沉淀重量法对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测时，先调节活性免疫球蛋白g溶液的ph为5.4-6.4，再采用沉淀重量法对igg的活性进行检测；
24、当采用色度计法对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测时，先调节活性免疫球蛋白g溶液的ph为5.4-6.4，再采用色度计法对igg的活性进行检测。
25、通过采用上述技术方案，本申请中通过对活性免疫球蛋白g溶液的ph进行调节，通过在igg溶液中加入碱溶液或酸溶液，调节ph值使可电离氨基酸去质子化，此步骤改变了igg的净电荷；当ph值接近等电点时，颜色变为白色，表明活性igg在响应ph值变化；正负电荷相互吸引，得到沉淀，或继续用氢氧化钠电荷相互排斥。
26、本申请公开的igg的活性检测方法聚焦于igg内部的可电离氨基酸(电荷分析)，降低了处理抗原或病原体相关的风险。本方法不与危险生物制剂直接相互作用，而是通过分析蛋白质的净电荷和等电点检测igg活性，提高了安全性，并为蛋白质活性分析的先进技术在免疫学和诊断学中的广泛应用铺平了道路。
27、在一个具体的可实施方案中，采用分光光度法、紫外吸收光谱法、沉淀重量法或色度计法对活性免疫球蛋白g溶液中igg的活性进行检测：
28、(1)分光光度法：
29、采用分光光度法对igg活性进行测定时，步骤如下：使用氢氧化钠溶液将步骤(4)得到的活性免疫球蛋白g溶液的ph值调节至5.4-6.4，然后在405nm处进行分光光度检测。
30、分光光度测定：用分光光度计在405nm处测量igg活性，计算公式为:igg活性(u/ml)＝c*od*v/w；
31、其中：c---去除酪蛋白后本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：具体步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，离心脱脂的步骤如下：采用离心设备对牛初乳进行离心脱脂，离心设备的转速为8000-12000rpm，离心脱脂的时间为20-30分钟，离心设备的温度为4℃-10℃。
3.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，调节脱脂牛初乳的pH为4.4-4.6所用的溶液为酸溶液；其中，酸溶液为盐酸溶液或柠檬酸溶液。
4.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：所述步骤（2）中离心的步骤如下：采用离心设备对脱脂牛初乳进行离心，离心设备的转速为8000-12000rpm；离心的时间为20-30分钟；离心设备的温度为4℃-10℃。
5.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：所述步骤（2）中离心的过程中控制脱脂牛初乳的温度为40-50℃。
6.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：所
7.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，调节乳清的pH为3.6-3.8所用的溶液为酸溶液；其中，酸溶液为盐酸溶液或柠檬酸溶液。
8.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：所述步骤（4）中对活性免疫球蛋白G溶液中IgG的活性进行检测的方法为分光光度法、紫外吸收光谱法、沉淀重量法或色度计法中的任意一种。
9.根据权利要求8所述的一种检测免疫球蛋白G活性的方法，其特征在于：当采用分光光度法对活性免疫球蛋白G溶液中IgG的活性进行检测时，调节活性免疫球蛋白G溶液的pH为5.4-6.4；
...【技术特征摘要】
1.一种检测免疫球蛋白g活性的方法，其特征在于：具体步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白g活性的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，离心脱脂的步骤如下：采用离心设备对牛初乳进行离心脱脂，离心设备的转速为8000-12000rpm，离心脱脂的时间为20-30分钟，离心设备的温度为4℃-10℃。
3.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白g活性的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，调节脱脂牛初乳的ph为4.4-4.6所用的溶液为酸溶液；其中，酸溶液为盐酸溶液或柠檬酸溶液。
4.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白g活性的方法，其特征在于：所述步骤（2）中离心的步骤如下：采用离心设备对脱脂牛初乳进行离心，离心设备的转速为8000-12000rpm；离心的时间为20-30分钟；离心设备的温度为4℃-10℃。
5.根据权利要求1所述的一种检测免疫球蛋白g活性的方法，其特征在于：所述步骤（2）中离心的过程中...
【专利技术属性】
技术研发人员：阿纳达里，陈晴，应鹏，程歌，贾紫薇，葛忻彤，李海飞，
申请(专利权)人：江苏天美健大自然生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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