【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，尤其涉及一种多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂。
技术介绍
1、微量元素硒在生物体内，发挥着抗衰老、增强机体免疫力、促进生长发育等十分重要的生物学功能。缺硒会造成机体免疫力降低、白肌病、腹泻、水肿、肝脏坏死等疾病，从而导致动物发育迟缓、生产水平下降、繁殖力减退。但是，硒在营养剂量和中毒剂量之间的安全限度非常狭窄，实际生产中，人们长期采用在饲料中添加无机硒(以亚硒酸钠为主)来满足动物生长的需要，由于亚酸钠较强的毒性作用，给其生产和使用带来诸多不便，一些国家已限制使用无机盐形式作为硒的营养补充剂，以开发高效的有机硒源作为硒营养研究的重点。近年来，随着研究的深入，人们发现与无机硒相比，有机硒具有更高的吸收率与生物安全性，高效有机硒源的开发成为国内外动物营养学的研究热点之一。
2、微生物因生长快、易于培养，具有硒转化能力和富硒能力，利用微生物将无机硒(亚硒酸盐)转化为有机硒是制备动物硒元素补充剂的有效途径。但是，野生菌种的硒转化能力是以微生物正常生长为基础，富硒能力有限。通过基因工程技术在具有富硒能力的微生物中引入外源硒蛋白，从而提高其富硒能力，进而大量发酵制备有机硒制剂，可有效解决有机硒资源短缺的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂，属于生物
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：
3、其一，本专利技术提供了一种多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂，所述有机硒制剂为重
4、进一步地，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白w的氨基酸序列为seq id no.1。
5、进一步地，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白w的表达基因的dna序列为seq id no.2。
6、进一步地，所述有机硒制剂的制备方法如下：
7、(1)表达多硒代半胱氨酸硒蛋白w的重组毕赤酵母按体积比1％的比例接种ypd培养液，30℃，250r/min摇床培养24h作为一级种子液；
8、(2)根据发酵量，将一级种子液按体积比1％的比例接种ypd培养液，制备二级种子液、多级种子液；
9、(3)多级种子液按体积比1％的比例接种含亚硒酸钠浓度为100mg/l的ypd培养液，发酵罐参数设置为搅拌速度500～800r/min，罐内压力9psi，温度30℃，设定do值(溶解氧)在30％以上，发酵培养24h；
10、(4)将发酵温度调整为25℃，发酵培养96h；
11、(5)发酵菌液经喷雾干燥机干燥处理成粉末状，密封分装制成多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂。
12、其二，本专利技术提供了一种多硒代半胱氨酸硒蛋白w，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白w的氨基酸序列为seq id no.1。
13、其三，本专利技术提供了一种用于表达多硒代半胱氨酸硒蛋白w的基因，所述基因的dna序列为seq id no.2。
14、其四，本专利技术提供了一种用于表达硒蛋白w的基因，所述基因的dna序列为seq idno.3。
15、本专利技术的有益效果在于，在硒蛋白w的氨基酸序列中额外引入两个硒代半胱氨酸u，并利用硒蛋白p基因调控序列，即硒代半胱氨酸uga翻译调控区序列，调控蛋白质翻译过程中将mrna上的uga翻译成硒代半胱氨酸。构建表达多硒代半胱氨酸硒蛋白w的重组毕赤酵母，发酵培养表达多硒代半胱氨酸硒蛋白w，发酵菌液喷雾干燥制备多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂。表达多硒代半胱氨酸硒蛋白w的酵母菌株富硒量是表达天然硒蛋白w的酵母菌富硒量的2.98倍，是野生毕赤酵母的3.89倍。酵母菌株x33-selenoprotein wplus用发酵罐发酵培养，酵母菌液裂解上清液中硒含量为95.27mg/l，硒转化率为95.27％。通过重组毕赤酵母发酵制备的多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂有机硒含量高，解决了传统方法制备有机硒硒转化效率低的问题。本专利技术方法制备多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂硒转化率高，能高效将无机硒转化为安全、生物利用度高的有机硒，并且易于规模化生产，有效解决食品、饲料等行业对有机硒的需求。
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1.一种多硒代半胱氨酸硒蛋白W有机硒制剂，其特征在于，所述有机硒制剂为重组毕赤酵母表达多硒代半胱氨酸硒蛋白W制成的有机硒制剂，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白W的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。
2.根据权利要求1所述的有机硒制剂，其特征在于，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白W的表达基因的DNA序列为SEQ ID NO.2。
3.根据权利要求1所述的有机硒制剂，其特征在于，所述有机硒制剂的制备方法如下：
4.一种多硒代半胱氨酸硒蛋白W，其特征在于，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白W的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。
5.一种用于表达多硒代半胱氨酸硒蛋白W的基因，其特征在于，所述基因的DNA序列为SEQ ID NO.2。
6.一种用于表达硒蛋白W的基因，其特征在于，所述基因的DNA序列为SEQ ID NO.3。
【技术特征摘要】
1.一种多硒代半胱氨酸硒蛋白w有机硒制剂，其特征在于，所述有机硒制剂为重组毕赤酵母表达多硒代半胱氨酸硒蛋白w制成的有机硒制剂，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白w的氨基酸序列为seq id no.1。
2.根据权利要求1所述的有机硒制剂，其特征在于，所述多硒代半胱氨酸硒蛋白w的表达基因的dna序列为seq id no.2。
3.根据权利要求1所述的有机硒制剂，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：李鑫，孙作为，刘向伟，刘绍聪，
申请(专利权)人：山东玖瑞农业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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