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灰飞虱蜕皮基因LsMH及其在灰飞虱生物防治中的应用制造技术

技术编号:44231354 阅读:2 留言:0更新日期:2025-02-11 13:34
本申请提出一种灰飞虱蜕皮基因LsMH及其在灰飞虱生物防治中的应用,作为灰飞虱蜕皮的关键基因之一,通过对灰飞虱蜕皮基因LsMH进行靶向干扰,能够显著地抑制灰飞虱羽化成成虫,导致灰飞虱死亡,进而控制灰飞虱种群,减轻灰飞虱对粮食作物的危害。通过生物学手段进行灰飞虱防治,对环境生态和食品都安全无害,为灰飞虱绿色防控提供新策略。通过灰飞虱蜕皮基因LsMH转录制备得到dsRNA或干扰试剂,注射入灰飞虱后能够有效干扰LsMH基因,灰飞虱若虫在蜕皮过程中,出现翅膀弯曲或不完整,腹部干瘪,蜕皮不完全的现象,抑制了灰飞虱羽化成成虫,导致灰飞虱死亡,实现对灰飞虱的生物防治。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及农业科学,尤其涉及一种灰飞虱蜕皮基因lsmh及其在灰飞虱生物防治中的应用。


技术介绍

1、灰飞虱作为我国及亚洲其他农作物种植地区的主要害虫,除了以刺吸植物汁液、产卵等方式直接危害水稻、小麦、玉米等粮食作物,还传播多种作物病毒间接地危害作物,严重影响粮食的优质、稳产及高产。自上世纪60年代起,灰飞虱在我国多个地区频繁暴发,每年造成粮食作物减产30-35%,严重威胁我国粮食安全生产。当前我国主要依靠化学农药进行灰飞虱防控,然而大量不合理地使用化学杀虫剂,不仅造成灰飞虱抗药性快速产生且加重环境污染和生态系统破坏,严重阻碍了我国农业现代化发展进程,对粮食、生态以及经济安全构成严重威胁。

2、蜕皮激素是昆虫保幼激素最主要的代谢酶,由脂肪体细胞和上皮细胞合成,分布于昆虫血淋巴、中肠及脂肪体中。昆虫蜕皮激素具有高度识别并分解结合或游离的保幼激素、平衡昆虫体内保幼激素水平的功能,参与昆虫蜕皮、化蛹及生殖等生理生化行为。因此促进或抑制蜕皮激素的活性,能扰乱昆虫体内的保幼激素水平,使昆虫发育及生殖发生紊乱,达到防治害虫的目的。蜕皮激素在害虫的绿色防控中具有巨大潜力。


技术实现思路

1、本申请实施例提供一种灰飞虱蜕皮基因lsmh及其在灰飞虱生物防治中的应用,以解决相关技术存在的问题,技术方案如下:

2、第一方面,本申请实施例提供了一种灰飞虱蜕皮基因lsmh,所述灰飞虱蜕皮基因lsmh的核苷酸序列如seq id no.1所示。

3、在一种实施方式中,所述灰飞虱蜕皮基因lsmh编码的氨基酸序列如seq id no.2所示。

4、第二方面,本申请实施例提供了一种用于扩增上述飞虱蜕皮基因lsmh的引物组,包括上游引物seq id no.3和下游引物seq id no.4。

5、第三方面,本申请实施例提供了一种dsrna,所述dsrna靶向沉默灰飞虱蜕皮基因lsmh。

6、在一种实施方式中,所述dsrna的核苷酸序列如seq id no.5所示。

7、第四方面,本申请实施例提供了上述的dsrna的制备方法,以灰飞虱蜕皮基因lsmh的核苷酸序列seq id no.5为模板,运用t7 high yield rna转录试剂盒进行转录制备得到。

8、在一种实施方式中,反应体系为:10x reaction buffer 2μl,enzyme mix 2μl,atp solution 2μl,utp solution 2μl,ctp solution 2μl,gtp solution 2μl,1μg dna模板,加水至总体积20μl;配好混匀,37℃过夜,加入dnase混匀,然后在37℃处理15min,65℃处理5min,获得灰飞虱蜕皮基因lsmh的dsrna。

9、第五方面,本申请实施例提供了上述的灰飞虱蜕皮基因lsmh或上述的dsrna在灰飞虱防治中的应用。

10、第六方面,本申请实施例提供了一种灰飞虱蜕皮基因lsmh干扰试剂,所述干扰试剂包括上述的dsrna;或包括上述的灰飞虱蜕皮基因lsmh转录得到的基因片段。

11、在一种实施方式中,所述灰飞虱蜕皮基因lsmh干扰试剂通过注射的方式作用于灰飞虱。

12、上述技术方案中的优点或有益效果至少包括:

13、本申请公开了一种新的灰飞虱蜕皮基因lsmh,作为灰飞虱蜕皮的关键基因之一,通过对灰飞虱蜕皮基因lsmh进行靶向干扰,能够显著地抑制灰飞虱羽化成成虫,导致灰飞虱死亡,进而控制灰飞虱种群,减轻灰飞虱对粮食作物的危害。通过生物学手段进行灰飞虱防治,对环境生态和食品都安全无害,为灰飞虱绿色防控提供新策略。

14、本申请的一种dsrna或干扰试剂,通过灰飞虱蜕皮基因lsmh转录制备得到,注射入灰飞虱后能够有效干扰lsmh基因,灰飞虱若虫在蜕皮过程中,出现翅膀弯曲或不完整,腹部干瘪,蜕皮不完全的现象,能够显著地抑制灰飞虱羽化成成虫,导致灰飞虱死亡,实现对灰飞虱的生物防治。

15、上述概述仅仅是为了说明书的目的,并不意图以任何方式进行限制。除上述描述的示意性的方面、实施方式和特征之外,通过参考附图和以下的详细描述,本申请进一步的方面、实施方式和特征将会是容易明白的。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种灰飞虱蜕皮基因LsMH,其特征在于,所述灰飞虱蜕皮基因LsMH的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述灰飞虱蜕皮基因LsMH,其特征在于:所述灰飞虱蜕皮基因LsMH编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种用于扩增权利要求1所述的灰飞虱蜕皮基因LsMH的引物组,其特征在于:包括上游引物SEQ ID NO.3和下游引物SEQ ID NO.4。

4.一种dsRNA,其特征在于,所述dsRNA靶向沉默灰飞虱蜕皮基因LsMH。

5.根据权利要求4所述的一种dsRNA,其特征在于,所述dsRNA的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示。

6.权利要求4或5所述的dsRNA的制备方法,其特征在于,以灰飞虱蜕皮基因LsMH的核苷酸序列SEQ ID NO.5为模板,运用T7 High Yield RNA转录试剂盒进行转录制备得到。

7.根据权利要求6所述的dsRNA的制备方法,其特征在于,

8.权利要求1-3任一项所述的灰飞虱蜕皮基因LsMH或权利要求4-7任一项所述的dsRNA在灰飞虱防治中的应用。

9.一种灰飞虱蜕皮基因LsMH干扰试剂,其特征在于,所述干扰试剂包括权利要求4-7任一项所述的dsRNA;或包括由权利要求1-3任一项所述的灰飞虱蜕皮基因LsMH转录得到的基因片段。

10.权利要求9所述的灰飞虱蜕皮基因LsMH干扰试剂,其特征在于,所述灰飞虱蜕皮基因LsMH干扰试剂通过注射的方式作用于灰飞虱。

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【技术特征摘要】

1.一种灰飞虱蜕皮基因lsmh,其特征在于,所述灰飞虱蜕皮基因lsmh的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述灰飞虱蜕皮基因lsmh,其特征在于:所述灰飞虱蜕皮基因lsmh编码的氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.一种用于扩增权利要求1所述的灰飞虱蜕皮基因lsmh的引物组,其特征在于:包括上游引物seq id no.3和下游引物seq id no.4。

4.一种dsrna,其特征在于,所述dsrna靶向沉默灰飞虱蜕皮基因lsmh。

5.根据权利要求4所述的一种dsrna,其特征在于,所述dsrna的核苷酸序列如seq idno.5所示。

6.权利要求4或5所述的dsrna的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员:郭燕李怡峰张学琦师冰冰
申请(专利权)人:广东省农业科学院植物保护研究所
类型:发明
国别省市:

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