System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种丹参转录因子SmMYB9a及应用制造技术_技高网

一种丹参转录因子SmMYB9a及应用制造技术

技术编号:44222699 阅读:6 留言:0更新日期:2025-02-11 13:29
本发明专利技术公开了一种丹参转录因子SmMYB9a,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。一种所述的丹参转录因子SmMYB9a编码的表达蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术的转录因子SmMYB9a可以响应低磷信号,参与丹参磷吸收,可正调控丹参酮的合成,促进丹参酮积累,为低磷信号与次生代谢信号之间的关联提供了依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体为一种丹参转录因子smmyb9a及应用。


技术介绍

1、丹参(salvia miltiorrhiza bge.),唇形科植物,其干燥的根和根茎为主要的药用部分,丹参在心血管疾病、肿瘤疾病、肝硬化及溃疡类疾病中均具有良好的应用。丹参中药效成分主要包括水溶性的丹酚酸类和脂溶性的丹参酮类。由于丹参具有很高的药用价值,因此对于丹参中丹参酮的代谢和积累等相关研究,具有十分重要的意义。

2、植物长期受到低磷胁迫,在分子层面形成了一套转录水平和翻译后水平相结合,局部信号和系统信号相结合的调控网络调节磷饥饿反应(psrs)。低磷响应早期因子spx会作用于一些转录因子,协同调控磷饥饿响应基因(psi)的表达,以最大效率利用磷素。转录因子为反式作用原件,是植物参与胁迫适应的重要调节蛋白。在细胞核中,能够与下游靶基因启动子区域的一段特异性的序列互作,来调节靶基因的表达。myb家族转录因子是植物中数量最多的转录因子家族之一。研究发现myb家族转录因子是植物响应低磷胁迫的最中心的调控因子,目前研究主要集中在myb-cc家族和r2r3-myb第20亚家族转录因子。

3、myb家族转录因子分为四个亚类,r1-myb、r2r3-myb、r3-myb、r4-myb。其中r2r3-myb家族转录因子为分布最广泛的一类myb转录因子,在植物各个阶段起到重要的作用。r2r3-myb转录因子广泛参与了植物对低磷的响应及植物次生代谢的调控,但对于丹参中响应磷饥饿信号且参与丹参酮合成的转录因子的研究还是空白。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种丹参转录因子smmyb9a及应用,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。

2、为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:

3、一种丹参转录因子smmyb9a,其核苷酸序列如seq id no.1所示。

4、一种所述的丹参转录因子smmyb9a编码的表达蛋白,其氨基酸序列如seq id no.2所示。

5、一种表达载体,含有所述的丹参转录因子smmyb9a。

6、一种宿主菌,含有所述的表达载体。

7、所述的宿主菌侵染丹参叶片的方法,所述宿主菌为农杆菌,具体步骤包括:

8、s1、丹参叶片预培养:

9、在超净台中,将生长30天左右的丹参无菌苗叶片和茎剪成小块,放置在1/2ms-n固体培养基上,25℃,暗培养2天;

10、s2、菌液前处理:

11、取成功转化的重组农杆菌10μl加入10ml含kana抗性的yeb培养基中,28℃,220rpm培养约12小时;取过夜培养的菌液2ml加入200ml含kana抗性的yeb液体培养基中,28℃、220rpm培养至od600=0.5;将菌液4000rpm离心10min,弃上清,然后加入200ml 1/2ms-n液体培养基,28℃、100rpm,培养30分钟;同时准备不含外源质粒的atcc15834菌液;

12、s3、菌液侵染叶片:

13、a.将预培养好的丹参叶片浸入菌液中,28℃、100rpm振荡,30min,使叶片被菌液充分侵染;取出叶片,将叶片置于1/2ms-n固体培养基上,25℃暗培养3-4天;

14、b.在超净台中,用无菌水冲洗a步骤中的叶片,去除叶片表面水分后,将叶片置于含500mg/l头孢噻肟钠的1/2ms-n除菌培养基上,每隔7天换一次培养基,直到除菌干净;

15、c.挑取彻底除菌的毛状根单克隆,转入1/2ms-n固体培养基进行独立培养,25℃暗培养;

16、d.将毛状根从固体接入6,7-v液体培养基中,25℃、180rpm,扩大培养。

17、所述的丹参转录因子smmyb9a在丹参中参与磷吸收、响应低磷信号的应用。

18、所述的丹参转录因子smmyb9a过表达转基因株系在正常磷水平下显著促进丹参中丹参酮含量积累的应用,正常磷水平中磷浓度范围为20~100mg·k g-1。

19、所述的丹参转录因子smmyb9a过表达转基因株系在正常磷水平下提高dxr、dxs2、aact、hmgr、ggpps、ksl、cps和cyp76ah1表达量中的应用,正常磷水平中磷浓度范围为20~100mg·kg-1。

20、与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:转录因子smmyb9a在丹参生长过程中可以参与影响丹参磷吸收,响应低磷信号,在正常磷水平下显著促进丹参酮的积累,在转录因子smmyb9a过表达丹参株系中,二氢丹参酮(dt)、隐丹参酮(ct)、丹参酮i(ti)及丹参酮iia(tiia)的含量分别为野生型丹参的35.24、33.92、8.59及8.28倍。

21、综上所述,本专利技术的转录因子smmyb9a可以响应低磷信号,参与丹参磷吸收,在正常磷水平下可正调控丹参酮的促进积累,为低磷信号与次生代谢信号之间的关联提供了依据。

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【技术保护点】

1.一种丹参转录因子SmMYB9a,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种权利要求1所述的丹参转录因子SmMYB9a编码的表达蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种表达载体,其特征在于,含有权利要求1所述的丹参转录因子SmMYB9a。

4.一种宿主菌,其特征在于,含有权利要求3所述的表达载体。

5.权利要求4所述的宿主菌侵染丹参叶片的方法,其特征在于,所述宿主菌为农杆菌,具体步骤包括:

6.权利要求1所述的丹参转录因子SmMYB9a在丹参中参与磷吸收、响应低磷信号的应用。

7.权利要求1所述的丹参转录因子SmMYB9a过表达转基因株系在正常磷水平下显著促进丹参中丹参酮含量积累的应用,正常磷水平中磷浓度范围为20~100mg·kg-1。

8.权利要求1所述的丹参转录因子SmMYB9a过表达转基因株系在正常磷水平下提高DXR、DXS2、AACT、HMGR、GGPPS、KSL、CPS和CYP76AH1表达量中的应用,正常磷水平中磷浓度范围为20~100mg·kg-1。

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【技术特征摘要】

1.一种丹参转录因子smmyb9a,其特征在于,其核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.一种权利要求1所述的丹参转录因子smmyb9a编码的表达蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.一种表达载体,其特征在于,含有权利要求1所述的丹参转录因子smmyb9a。

4.一种宿主菌,其特征在于,含有权利要求3所述的表达载体。

5.权利要求4所述的宿主菌侵染丹参叶片的方法,其特征在于,所述宿主菌为农杆菌,具体步骤包括:

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【专利技术属性】
技术研发人员:刘林张思学于海征樊洪泓
申请(专利权)人:安徽农业大学
类型:发明
国别省市:

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