【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多肽固相合成，具体而言，涉及一种多肽固相合成在线监测方法及其在线监测系统。
技术介绍
1、多肽是由多个氨基酸通过肽键连接而形成的一类化合物。随着与多肽固相合成相关的技术（如固相多肽固相合成技术的产生）、设备和工艺等方面的迅速发展，使得多肽药物研发成本和生产成本的大幅度下降，多肽药物的开发持续升温。在多肽固相合成的过程中，为了达到只在目标位置反应，通常会对不参与反应的基团进行保护，反应结束后再进行脱除。多肽固相合成基于其合成过程，常见的是对氨基的保护，fmoc保护基是氨基酸氨基常用的保护基，多肽固相合成中，带有fmoc保护基的氨基酸作为合成的反应物。整个合成过程涉及两个过程，即氨基酸脱保护和偶联，氨基酸脱保护即是氨基酸脱去fmoc基团，偶联是前一个氨基酸的羧基与刚脱除保护基团的氨基脱水缩合形成肽键，两个步骤结束后都需要进行清洗，洗掉残留试剂。
2、现有技术中，多肽固相合成仪器合成虽然能够大大节省人力，但是，多肽固相合成每合成一个氨基酸需要经过脱保护和偶联两个步骤，在手动人工合成时，两个步骤结束后会取样进行kaiser检测，判断反应是否完全，而对于市售的多肽固相合成仪器，难以实现树脂的取样检测，难以判断合成的进行程度，即难以判断偶联阶段是否完成；即使能够取样，判断偶联阶段是否完成，也会费时费力，且会影响测试判断结果的准确性。
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的在于提供一种多肽固相合成在线监测方法及其在线监测系统，以解决现有技术中的多肽固相合成仪器难以判断偶
2、为了实现上述目的，本专利技术提供了一种多肽固相合成在线监测方法，包括：在合成反应柱内进行多肽固相合成反应，多肽固相合成反应具有脱保护阶段和偶联阶段；利用电导率检测器实时监测合成反应柱排出的液体的电导率；判断电导率在预设时间段内的电导率变化是否小于预设值的偶联判断步骤；如果是，则判定多肽固相合成反应的偶联阶段已完成，如果否，则继续进行多肽固相合成反应。
3、进一步地，在偶联判断步骤之前，多肽固相合成在线监测方法还包括：在第一时间获取合成反应柱排出的液体的电导率；在第二时间获取合成反应柱排出的液体的电导率，其中，第二时间-第一时间=预设时间段；计算第二时间的电导率与第一时间的电导率之间的比值，以输出在预设时间段内的电导率变化。
4、进一步地，预设值为1%，且预设时间段为5min。
5、进一步地，多肽固相合成在线监测方法还包括：利用紫外监测器判断合成反应柱排出的液体内是否存在fmoc基团的脱保护判断步骤；如果是，则判定脱保护阶段正在进行，并执行清洗脱保护步骤，再执行脱保护判断步骤，如果否，则判定脱保护阶段已完成。
6、进一步地，清洗脱保护步骤包括：向合成反应柱内输入清洗试剂，以对合成反应柱内部进行冲洗；向合成反应柱内输入脱保护试剂。
7、进一步地，脱保护判断步骤包括：将紫外监测器的波长设定为预设波长值；利用紫外监测器监测合成反应柱排出的液体在预设波长值下是否有紫外吸收峰，若有，则存在fmoc基团，若无，则不存在fmoc基团。
8、进一步地，紫外监测器为双波长检测器。
9、进一步地，预设波长值为289nm和301nm。
10、进一步地，多肽固相合成在线监测方法还包括：利用温度检测器实时合成反应柱排出的液体的温度的检测步骤； 实时判断温度检测器获得的温度是否处于预设范围内，如果是，则保持当前反应温度；如果否，则控制换热设备对合成反应柱进行加热或降温。
11、进一步地，合成反应柱排出的液体包括氨基酸、活化剂、dic和溶剂dmf，氨基酸、活化剂和dic溶解在溶剂dmf中。
12、根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了一种多肽固相合成在线监测系统，采用上述的多肽固相合成在线监测方法对多肽固相合成反应进行监测。
13、应用本专利技术的技术方案，通过实时监测电导率，可以准确捕捉到偶联阶段中反应物（主要是氨基酸和活化剂）的消耗情况，由于电导率的变化直接反映了溶液中离子浓度的改变，当电导率在预设时间段内的变化小于预设值时，这表明反应物已经消耗至动态平衡，继而可以判断偶联阶段已完成，这样，相对于传统的人工取样分析，不仅能够准确判断偶联阶段的完成，还可以减轻操作人员的劳动强度，还减少了不必要的等待时间，加快了多肽固相合成的流程，显著提高了生产效率。
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1.一种多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，在所述偶联判断步骤之前，所述多肽固相合成在线监测方法还包括：
3.根据权利要求1所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述预设值为1%，且所述预设时间段为5min。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述多肽固相合成在线监测方法还包括：
5.根据权利要求4所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述清洗脱保护步骤包括：
6.根据权利要求4所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述脱保护判断步骤包括：
7.根据权利要求6所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述紫外监测器为双波长检测器。
8.根据权利要求7所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述预设波长值为289nm和301nm。
9.根据权利要求1至3中任一项所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述多肽固相合成在线监测方法还包括：
11.一种多肽固相合成在线监测系统，其特征在于，采用权利要求1至10中任一项所述的多肽固相合成在线监测方法对所述多肽固相合成反应进行监测。
...【技术特征摘要】
1.一种多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，在所述偶联判断步骤之前，所述多肽固相合成在线监测方法还包括：
3.根据权利要求1所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述预设值为1%，且所述预设时间段为5min。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述多肽固相合成在线监测方法还包括：
5.根据权利要求4所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述清洗脱保护步骤包括：
6.根据权利要求4所述的多肽固相合成在线监测方法，其特征在于，所述脱保护判断步骤包括：
7.根据权利要求6所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：洪亮，陶建，周洪如，王波辉，王俊强，冯妙，胡瑞卿，
申请(专利权)人：天津凯莱英医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
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