一种槐米特征图谱的构建方法、槐米及其伪品的区分方法技术

技术编号：44209485 阅读：5 留言：0更新日期：2025-02-06 18:42

本发明专利技术公开了一种槐米特征图谱的构建方法、槐米及其伪品的区分方法，所述槐米特征图谱的构建方法为将供试品溶液和对照品参照物溶液分别在特定的色谱条件下进行高效液相色谱检测，即可获取特征图谱。该方法建立了槐花(槐米)皂苷类成分特征图谱，用于区分槐米与伪品山槐米和刺槐米，采用高效液相色谱法，对槐花(槐米)及伪品标准汤剂进行对比研究，对槐花(槐米)标准汤剂内在品质进行把控，能够比较全面反映槐花(槐米)标准汤剂的特征，可以为槐花(槐米)标准汤剂和配方颗粒的质量控制提供新的分析手段，并达到鉴别槐花(槐米)及其伪品标准汤剂和配方颗粒的目的。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种槐米特征图谱的构建方法、槐米及其伪品的区分方法，属于中药鉴别。

技术介绍

1、槐花为豆科植物槐sophora japonica l.的干燥花及花蕾。夏季花开放或花蕾形成时采收，及时干燥，除去枝、梗及杂质。前者习称“槐花”，后者习称“槐米”。其性微寒，味苦；归肝、大肠经；具凉血止血，清肝泻火之功效；用于便血，痨血，血痢，崩漏，吐血，衄血，肝热目赤，头痛眩晕。

2、现代研究表明，槐米具多类药效活性成分，其中以黄酮类、三萜皂苷类、脂肪酸类、多糖类、挥发性成分研究最多。其中主要药效成分为黄酮类、三萜皂苷类成分。槐米具有止血、降血糖、抗氧化、保护肠胃、抗菌、增强免疫力、抗病毒、降血压、抗肿瘤等药理活性。

3、文献报道研究表明槐花皂苷iii具有抗衰老、降血糖、降血脂等功效；大豆皂苷bb具有抑制肾上腺素血管扩张，降低血压、抗炎、保护神经和再生的功效；槐花皂苷i具有抗凝血作用。皂苷类成分是槐米药理活性重要的组成之一，并且槐花皂苷i、槐花皂苷ⅱ、槐花皂苷ⅲ为槐花专属性成分。

4、中药主要来源于自然界的动植物，其中一些具有多种基原，这些中药往往存在基原混乱、真伪难辨等现象，由此导致质量很不稳定，极大的限制了其临床的应用效果。市场中常见混伪品主要有豆科植物刺槐robinia pseudoacacia l.的花及花蕾，俗称洋槐花，另一常见混淆品为豆科植物山槐albizia kalkora(roxb.)prain的干燥花蕾，俗称山槐米。

5、目前对于槐米及其伪品对比研究的方法较多，针对混淆

技术实现思路

1、专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种槐米特征图谱的构建方法、槐米及其伪品的区分方法。

2、技术方案：为解决上述技术问题，本专利技术提供一种槐米特征图谱的构建方法，包括以下步骤：

3、(1)供试品溶液的制备：取槐米标准汤剂，加提取溶剂进行提取，放冷，再称定重量，用相应试剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，蒸干，残渣用水复溶，用水饱和正丁醇振摇萃取，合并正丁醇液，加氨试液洗涤，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

4、(2)对照品参照物溶液的制备：取大豆皂苷bb对照品，加溶剂溶解，即得；

5、(3)超高效液相色谱检测：取供试品溶液和对照品参照物溶液分别注入超高效液相色谱中，用电雾式检测器检测，获取特征图谱；所述特征图谱具有共有峰10个，与大豆皂苷bb参照物相应的峰为s峰，计算其余各特征峰与s峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±10％范围以内，峰1、峰2、峰3、峰4、峰6、峰7、峰8、峰9、峰10规定值分别为：0.47、0.57、0.84、0.97、1.05、1.15、1.21、1.22、1.28；所述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱为hph-c18、ec-c18或sb-c18；以乙腈为流动相a，以0.01mol/l甲酸铵水溶液为流动相b；流速为0.28～0.32ml/min；柱温为38～42℃；洗脱梯度为0～1min，流动相a的体积分数为21→27％，流动相b的体积分数为79→73％；1～8min，流动相a的体积分数变化为27→29％，流动相b的体积分数变化为73→71％；8～11min，流动相a的体积分数变化为29→31％，流动相b的体积分数变化为71→69％；11～14min，流动相a的体积分数为31→34％，流动相b的体积分数为69→66％；14～16min，流动相a的体积分数变化为34→36％，流动相b的体积分数变化为66→64％；16～22min，流动相a的体积分数为36％，流动相b的体积分数为64％；22～25min，流动相a的体积分数为36→45％，流动相b的体积分数为64→55％；25～28min，流动相a的体积分数为45％，流动相b的体积分数为55％。

6、其中，步骤(1)中所述提取溶剂包括水或30％～100％甲醇。

7、其中，步骤(1)中所述提取的方式包括超声处理、加热回流或振摇提取。

8、其中，步骤(1)中所述提取的时间为15～60分钟。

9、其中，步骤(1)中所述萃取的次数为1～3次。

10、其中，标准汤剂的制备：取槐花(槐米)饮片，称定，加入水浸泡，煎煮，趁热过滤，滤液减压浓缩，并冷冻干燥，即得槐花(槐米)标准汤剂。

11、本专利技术还提供一种建立槐米对照图谱的方法，包括以下步骤：

12、(1)分别制备多批次槐米标准汤剂供试品溶液；

13、(2)根据所述的槐米特征图谱的构建方法对所述供试品溶液分别进行检测，得到槐米标准汤剂的特征图谱；

14、(3)将得到的特征图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统建立槐米标准汤剂的对照图谱。

15、本专利技术还提供一种区分槐米及其伪品的方法，包括以下步骤：

16、(1)供试品溶液的制备：取供试品，加水或30％～100％甲醇进行提取15～60分钟，放冷，再称定重量，用相应试剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，蒸干，残渣用水复溶，用水饱和正丁醇振摇萃取1～3次，合并正丁醇液，加氨试液洗涤，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

17、(2)参照物溶液的制备：取槐米对照药材，加水煎煮，取上清液，用水饱和正丁醇振摇提取，取正丁醇层，用氨试液洗涤，挥去溶剂，定容，摇匀、滤过，取续滤液，即得对照药材参照物溶液；取大豆皂苷bb对照品，加溶剂溶解，即得对照品参照物溶液；

18、(3)超高效液相色谱检测：取供试品溶液和对照品参照物溶液分别注入超高效液相色谱中，用电雾式检测器检测，获取特征图谱；

19、(4)区分：当供试品溶液与对照药材参照物色谱中的10个特征峰的保留时间相对应，并且与大豆皂苷bb参照物相应的峰为s峰，分别计算峰1～峰10与s峰的相对保留时间，其相对保留时间在规定值的±10％范围之内，且峰7的相对峰面积大于1.5，则被检测样品为槐米；否则供试品为伪品。

20、其中，步骤(1)中所述提取的方式包括超声处理、加热回流或振摇提取。

21、其中，步骤(3)中所述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱为hph-c18、ec-c18或sb-c18；以乙腈为流动相a，以0.01mol/l甲酸铵水溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种槐米特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)中所述提取溶剂包括水或30％～100％甲醇。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)中所述提取的方式包括超声处理、加热回流或振摇提取。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)中所述提取的时间为15～60分钟。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)中所述萃取的次数为1～3次。

6.一种区分槐米及其伪品的方法，其特征在于，包括以下步骤：

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，步骤(1)中所述提取的方式包括超声处理、加热回流或振摇提取。

8.根据权利要求6所述方法，其特征在于，步骤(3)中所述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱为HPH-C18、EC-C18或SB-C18；以乙腈为流动相A，以0.01mol/L甲酸铵水溶液为流动相B；流速为0.28～0.32ml/min；柱温为38～42℃；洗脱梯度为0～1min，流动相A的体积分数为21→27％，流动相B的

9.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述伪品包括刺槐米或山槐米。

10.权利要求6～9任一项所述方法在槐米标准汤剂和配方颗粒质量检测中的应用。

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【技术特征摘要】