【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，特别是涉及一株裂解大肠杆菌高危克隆株且靶向多种血清型的噬菌体及应用。
技术介绍
1、细细菌耐药性已经成为21世纪主要的公共卫生威胁之一。根据英国《抗微生物药物耐药性评估》预测，到2050年，全球每年因耐药菌感染而死亡的人数将达1000万（o'neill, 2016）。其中，革兰阴性菌的耐药问题尤为突出，有时甚至到了无药可用境地。2017年，世界卫生组织（world health organization，who）列出的全球耐药性优先级清单将碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌、碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌、碳青霉烯耐药、产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌列为最高优先级，均属于革兰阴性菌（tacconelli et al., 2018）。最高优先级别耐药菌常通过克隆株进行垂直传播，其中有些高耐药、高毒力菌株成为高风险克隆株在全球生态位广泛扩散，给临床抗感染治疗带来严峻挑战（nicolas-chanoine et al., 2014；mathers et al., 2015；mendes et al., 2023）。
2、在肠杆菌科细菌中，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、沙门菌等菌种的高风险克隆株已经引起了研究人员的重视，它们常常是尿路感染、血流感染、肺炎、胃肠炎等疾病的重要原因（paterson, 2006）。大肠杆菌st410是一种与多重耐药相关的肠外致病性大肠杆菌，已被公认为新的高风险克隆株（roer et al., 2018）。在全球多项碳青霉烯耐药、产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌（(carbapenem-resistant
3、噬菌体未来无药可用的危机引起了广泛的担忧，亟需寻找抗生素替代疗法。噬菌体（bacteriophage，phage）是一类寄生在细菌、古菌等原核微生物体内的病毒，被形象地称为“细菌病毒”或者“细菌捕食者”，是地球上最丰富多样的生物实体。据估计，地球上噬菌体的数量为1031个，在某些生态系统中，噬菌体的数量甚至比细菌多出10倍，其存在对于维持地球生物圈及生态系统平衡有着非常重要的作用。噬菌体作为细菌的病毒可被用来治疗细菌感染，尤其多重耐药菌的感染。然而，噬菌体治疗也存在局限性，如噬菌体高度的宿主特异性，导致噬菌体的治疗范围有限，长久以来噬菌体没有得到广泛应用。但与其他治疗方式相比，噬菌体疗法具有特异性强、不破坏菌群结构、能在细菌裂解过程中不断自我复制扩增等特点，成为目前抗生素替代疗法的热点之一。因此，可针对高风险克隆株挖掘特异性噬菌体，建立可用于临床治疗的噬菌体库。
技术实现思路
1、为克服现有技术的不足，针对多重耐药克隆株感染的治疗难题及噬菌体裂解范围窄的局限，本申请提供一株裂解大肠杆菌高危克隆株且靶向多种血清型的噬菌体及应用，所述的噬菌体，moi低，稳定性好，具有良好的裂解活性，基因组序列中无耐药和毒力基因，具有较好的临床应用价值。
2、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：
3、一株裂解大肠杆菌高危克隆株且靶向多种血清型的噬菌体，所述噬菌体命名为escherichia phage vb_ecom_32m3y，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.45969。
4、优选的，所述噬菌体的来源为养殖场污水。
5、优选的，所述噬菌体属于ackermannviridae病毒科，aglimvirinae亚科，agtrevirus属。
6、优选的，所述噬菌体的基因组为线性双链dna，大小为152,897 bp，g+c含量为49%，所述噬菌体的基因组中不含毒力因子和耐药基因。
7、优选的，所述噬菌体对大肠杆菌的最佳感染复数为0.00001:1，潜伏期为40 min，爆发期70 min，爆发量为108±10 pfu/cell。
8、优选的，所述噬菌体含有4个不同的尾突蛋白，能裂解4种血清型的大肠杆菌。
9、优选的，所述噬菌体在4～50℃保持良好活性和/或在ph为3～12的环境下保持良好活性。
10、本专利技术还提供了一种杀菌组合物，包括上述的噬菌体。
11、本专利技术还提供了噬菌体在制备用于治疗或预防由大肠杆菌引起的小鼠细菌感染的药物或制剂中的用途。
12、优选的，所述噬菌体靶向高危克隆株st410型大肠杆菌的b5/h24rxc亚型和/或靶向特定血清型的大肠杆菌和/或靶向o抗原。
13、本专利技术的有益效果是：
14、1.本申请提供的噬菌体 escherichiaphage vb_ecom_32m3y，能够裂解st410型大肠杆菌高危克隆株的b5/h24rxc亚型，该亚型具有碳青霉烯耐药和高毒力的特点，在人医临床和动物养殖领域广泛流行和传播。
15、2.本申请提供的噬菌体，moi低，稳定性好，具有良好的裂解活性，基因组序列中无耐药和毒力基因，具有较好的临床应用价值。
16、3.本申请提供的噬菌体有4个尾突蛋白，受体为o抗原，能裂解4种血清型的大肠杆菌，包括携带onovel1的st410型大肠杆菌、携带另一种未分型o抗原的st9388型大肠杆菌，比起单一尾突蛋白的噬菌体拥有更广的噬菌谱。
17、保藏信息说明：
18、一株裂解大肠杆菌高危克隆株且靶向多种血清型的噬菌体，该噬菌体的命名为 escherichiaphage vb_ecom_32m3y，于2024年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.45969。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株裂解大肠杆菌高危克隆株且靶向多种血清型的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体命名为Escherichia phage vB_EcoM_32M3Y，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45969。
2.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体的来源为养殖场污水。
3.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体属于Ackermannviridae病毒科，Aglimvirinae亚科，Agtrevirus属。
4.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体的基因组为线性双链DNA，大小为152,897 bp，G+C含量为49%，所述噬菌体的基因组中不含毒力因子和耐药基因。
5.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体对大肠杆菌的最佳感染复数为0.00001:1，潜伏期为40 min，爆发期70 min，爆发量为108±10 PFU/cell。
6.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体含有4个不同的尾突蛋白，能裂解4种血清型的大肠杆菌。
7.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体在4～50℃保持良好活性和/或在pH为3～12的环境下保持良好活性。
8.一种杀菌组合物，其特征在于，包括权利要求1-7任一项所述的噬菌体。
9.权利要求1-7任一项所述噬菌体在制备用于治疗或预防由大肠杆菌引起的小鼠细菌感染的药物或制剂中的用途。
10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述噬菌体靶向高危克隆株ST410型大肠杆菌的B5/H24RxC亚型和/或靶向特定血清型的大肠杆菌和/或靶向O抗原。
...【技术特征摘要】
1.一株裂解大肠杆菌高危克隆株且靶向多种血清型的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体命名为escherichia phage vb_ecom_32m3y，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.45969。
2.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体的来源为养殖场污水。
3.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体属于ackermannviridae病毒科，aglimvirinae亚科，agtrevirus属。
4.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体的基因组为线性双链dna，大小为152,897 bp，g+c含量为49%，所述噬菌体的基因组中不含毒力因子和耐药基因。
5.根据权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，所述噬菌体对大肠杆...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘健华，涂婕莹，宋可为，王靖涵，刘景豪，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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