【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫球蛋白领域，具体涉及抗瘟病毒广谱中和单克隆抗体及其应用。
技术介绍
1、瘟病毒是一类严重危害家畜及野生动物的病毒。该属成员病毒粒子呈球形，直径约为40-60 nm，有囊膜，基因组为单股正链rna，大小为11.3-13.0 kb。病毒基因组包含一个大的开放阅读框和基因组两端的非编码区，编码4种结构蛋白和8种非结构蛋白，其中结构蛋白erns（gp44/48）和e2（gp55）、非结构蛋白ns3可以刺激机体产生抗体，e2蛋白是瘟病毒的重要保护性抗原。猪瘟病毒（classical swine fever virus，csfv）e2蛋白的氨基端有4个独立的抗原结构域，依次为b、c、d、a结构域，其进一步可以分为b/c抗原区和d/a抗原区，大部分抗原表位位于这2个抗原区上。
2、根据国际病毒分类委员会（ictv）的最新报告，瘟病毒包含11个已知成员（ pestivirus a - pestivirus k），除此之外，一些与已知成员有较大遗传差异的病毒如batpestivirus、pangolin pestivirus、bamboo rat pestivirus、linda pestivirus、ovinepestivirus（ovpv）也被发现。部分成员分布广泛，严重威胁全球养殖业， pestivirus a（bvdv1）和 pestivirus b（bvdv2）可以感染牛、羊、猪等家畜以及鹿、和羚
3、鉴于此，深入研究和开发能够特异性结合更多瘟病毒、具有中和作用的广谱中和单克隆抗体对于瘟病毒感染相关疾病的治疗和诊断，以及瘟病毒的防控具有广泛的临床应用价值。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一是提供一种抗瘟病毒广谱中和单克隆抗体及其应用。所要解决的技术问题不限于所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。
2、为实现上述目的，本专利技术首先提供了抗瘟病毒单克隆抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是seq id no.1的第26-33位、seq id no.1的第51-58位和seq id no.1的第97-111位的三个互补决定区；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是seq id no.3的第27-32位、seqid no.3的第50-52位和seq id no.3的第89-97位的三个互补决定区。
3、其中所述抗原结合片段包括fab、fab′、f(ab′)2、抗体可变区（fv）、二硫键稳定的fv（dsfv）、单链抗体（scfv）、单域抗体（sdab，即纳米抗体）、微型抗体（minibody）和最小识别单位（mru）等但不限于此。
4、所述互补决定区（cdr）的序列可根据kabat编号系统定义。
5、所述重链可变区和轻链可变区均包含框架区（framework region，fr，在可变区中cdr以外的区域）。所述框架区可来源于人或非人哺乳动物（如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、羊、骆驼等）。
6、进一步地，所述重链可变区的氨基酸序列可如seq id no.1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列可如seq id no.3所示。
7、进一步地，所述单克隆抗体或其抗原结合片段还可包括重链恒定区（ch）和轻链恒定区（cl）。所述重链恒定区可选自igg、iga、igm、igd或ige的重链恒定区。所述重链恒定区还可选自ch1、fc和ch3结构域。所述轻链恒定区可选自kappa（κ）或lambda（λ）型轻链恒定区。所述重链恒定区和轻链恒定区可来源于人或非人哺乳动物（如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、羊、骆驼等）。进一步地，所述重链恒定区可选自人igg亚类如iggl、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2的重链恒定区。所述重链恒定区也可选自小鼠igg亚类如igg1、igg2a、igg2b、igg2c、igg3、igg4、igg5和igg6的重链恒定区。具体地，所述重链恒定区的核苷酸序列可为seq idno.5；所述重链恒定区的氨基酸序列可为seq id no.6；所述轻链恒定区的核苷酸序列可为seq id no.7；所述轻链恒定区的氨基酸序列可为seq id no.8。
8、本专利技术还提供了生物材料，所述生物材料可为下述任一种：
9、a1）编码所述单克隆抗体或其抗原结合片段中的重链可变区和轻链可变区的核酸分子；
10、a2）含有a1）所述核酸分子的表达盒；
11、a3）含有a1）所述核酸分子的重组载体；
12、a4）含有a1）所述核酸分子的重组微生物；
13、a5）含有a1）所述核酸分子的重组宿主细胞。
14、所述生物材料均可表达本文所述单克隆抗体或其抗原结合片段。
15、上述生物材料中，所述核酸分子可为下述任一种：
16、b1）编码序列是seq id no.2的dna分子；
17、b2）编码序列是seq id no.4的dna分子。
18、seq id no.2所示的dna分子编码氨基酸序列为seq id no.1的重链可变区。seqid no.4所示的dna分子编码氨基酸序列为seq id no.3的轻链可变区。
19、本文所述核酸分子还可包括在seq id no.2或seq id no.4所示核苷酸序列基础上经密码子偏好性改造得到的核酸分子。考虑到密码子的简并性以及不同物种密码本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.抗瘟病毒单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.1的第26-33位、SEQ ID No.1的第51-58位和SEQ ID No.1的第97-111位的三个互补决定区；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是SEQ ID No.3的第27-32位、SEQ ID No.3的第50-52位和SEQ ID No.3的第89-97位的三个互补决定区。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
3.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：
4.根据权利要求3所述的生物材料，其特征在于，所述核酸分子为下述任一种：
5.权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，或权利要求3或4所述的生物材料在下述任一项中的应用：
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述瘟病毒为牛病毒性腹泻病毒1型
7.抗体偶联物，包括抗体部分和偶联部分，其特征在于，所述抗体部分包含权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
8.试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
9.权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括在宿主细胞中表达权利要求1或2所述单克隆抗体或其抗原结合片段，并回收或分离所述单克隆抗体或其抗原结合片段。
10.检测瘟病毒或瘟病毒E2蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括使用权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段、权利要求7所述的抗体偶联物或权利要求8所述的试剂盒检测瘟病毒或瘟病毒E2蛋白。
...【技术特征摘要】
1.抗瘟病毒单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别是seq id no.1的第26-33位、seq id no.1的第51-58位和seq id no.1的第97-111位的三个互补决定区；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别是seq id no.3的第27-32位、seq id no.3的第50-52位和seq id no.3的第89-97位的三个互补决定区。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no.1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.3所示。
3.生物材料，其特征在于，所述生物材料为下述任一种：
4.根据权利要求3所述的生物材料，其特征在于，所述核酸分子为下述任一种：
5.权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，或权利要求3或4所述的生物材料在下述任一项中的应用：
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述瘟病毒为牛病毒性腹泻病毒1型（bovine viral diarrhea virus typ...
【专利技术属性】
技术研发人员：龚文杰，刘钟迪，贺笋，李俊辉，米士江，王遵宝，郭艺迪，徐龙飞，潘晓梅，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：
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