【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药和疫苗，具体涉及一种用于单克隆抗体或多克隆抗体快速制备的复合水溶性佐剂及其制备方法。
技术介绍
1、在单克隆抗体或多克隆抗体的制备过程中，免疫佐剂的选择至关重要，因为它直接影响到抗体的产生效率和质量。传统的抗体制备技术中，弗氏佐剂(包括完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂)是常用的免疫佐剂，它们能够增强抗原的免疫原性，但存在一些局限性，如：
2、(1)弗氏完全佐剂含有卡介苗，这是一种强免疫原，可能导致动物产生针对卡介苗的抗体，从而影响对目标抗原的免疫应答。
3、(2)弗氏佐剂为油性佐剂，与水溶性抗原混合时需要繁琐的乳化过程，可能会破坏抗原的构象。
4、(3)传统的免疫周期较长，需要多次免疫，对动物的伤害较大，且不符合动物福利。
技术实现思路
1、本专利技术针对现有技术的不足，如传统佐剂可能引起的特异性抗体，以及抗原与佐剂混合过程中的复杂性和对抗原构象的破坏问题，提出了一种全新的解决方案，提供一种复合水溶性免疫佐剂及其制备方法，本专利技术佐剂在相同条件下能更快地激发免疫反应，在提高抗体滴度方面表现更为突出，该佐剂用于快速制备单克隆抗体或多克隆抗体具有高效、安全、简便的特点。
2、为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：
3、一种复合水溶性免疫佐剂，按重量份计，由以下组分制成：磷酸缓冲盐溶液干粉18-22份、抗坏血酸钠1-3份、β-葡聚糖8-12份、黄原胶和卡拉胶混合物4-8份、植物提取物8-14份、植物多糖2
4、优选地，上述复合水溶性免疫佐剂，按重量份计，由以下组分制成：磷酸缓冲盐溶液干粉18-22份、抗坏血酸钠1-2份、β-葡聚糖10-12份、黄原胶和卡拉胶混合物4-5份、植物提取物10-12份、植物多糖4-5份、超纯水1930-1960份。
5、最优选，上述复合水溶性免疫佐剂，按重量份计，由以下组分制成：磷酸缓冲盐溶液干粉18-22份、抗坏血酸钠1-2份、β-葡聚糖10份、黄原胶和卡拉胶混合物5份、植物提取物12份、植物多糖4份、超纯水1930-1960份。
6、优选地，所述植物提取物为松树皮提取物、苜蓿提取物和杜仲叶提取物的一种。最优选，所述植物提取物为松树皮提取物。
7、优选地，所述植物多糖为灵芝多糖、黄芪多糖和板蓝根多糖中的一种，优选为灵芝多糖。
8、所述磷酸缓冲盐溶液干粉，按重量份计，包括以下组分：氯化钠15-18份、氯化钾0.3-0.5份、磷酸氢二钠2.4-3份、磷酸二氢钾0.3-0.5份。
9、优选地，所述黄原胶和卡拉胶混合物的重量比为1：0.5-2，优选重量比为1：0.5-1，最优选重量比例为1:1。
10、上述复合水溶性免疫佐剂的制备方法，包括以下步骤：
11、将磷酸缓冲盐溶液干粉制成ph 7.2-7.4的磷酸缓冲盐溶液，向磷酸缓冲盐溶液中依次加入抗坏血酸钠、β-葡聚糖、黄原胶和卡拉胶混合物、植物提取物和植物多糖，搅拌直至所有添加成分完全溶解，过滤除菌。所获得的无菌复合溶液保存在2至8℃的环境中，以备后续使用。
12、所述的磷酸缓冲盐溶液具体是通过以下方法制备得到的：按照比例将氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾依次加入到超纯水中；随后，利用磁力搅拌器对混合溶液进行搅拌，直至各成分完全溶解，使用盐酸和氢氧化钠对磷酸缓冲盐溶液调节ph 7.2-7.4。
13、本专利技术的复合水溶性免疫佐剂在制备过程中，通过精确控制各组分的配比和搅拌条件，确保了佐剂的均一性和稳定性，提高了免疫效果的可重复性。
14、本专利技术复合水溶性免疫佐剂，其核心成分包括植物提取物和植物多糖。植物提取物包括松树皮、苜蓿和杜仲叶提取物中的一种；而植物多糖则包括灵芝、黄芪和板蓝根多糖中的一种。其中，松树皮提取物活性物质主要包括挥发油类(如α-蒎烯)、多酚类(如没食子酸)和黄酮类(如槲皮素)等化学活性物质，这些成分赋予了其抗氧化、抗菌、抗炎等多种生物活性。苜蓿提取物的化学成分则主要包括三萜皂苷类(如苜蓿酸型三萜皂苷)、黄酮类(如芹菜素)、香豆素(如简单香豆素)和生物碱等，具有抗氧化和免疫调节作用。杜仲叶提取物主要含有绿原酸、黄酮类化合物、酚(酸)类和萜类化合物等，具有抗菌、消炎、抗氧化、提高动物免疫力等药学功效。而选用的灵芝多糖、黄芪多糖和板蓝根多糖，因其免疫调节、生物相容性、可生物降解性、低毒性和安全性的特点。
15、本专利技术佐剂中将上述提取物和多糖结合使用，不仅能增强疫苗的免疫原性，提高体液和细胞免疫反应，还能提供持久的免疫力。
16、本专利技术的复合水溶性佐剂能够克服传统弗氏佐剂的局限性，具有以下特点：
17、(1)安全性：本专利技术的复合水溶性免疫佐剂不含有毒成分，如灭活的结核分枝杆菌，从而避免了传统佐剂可能引起的副作用和特异性抗体的问题。
18、(2)高效性：与传统弗氏佐剂相比，本专利技术的佐剂在相同时间内能诱导小鼠产生更高滴度的免疫血清抗体，显示出更强的免疫原性。
19、(3)简便性：该佐剂与水溶性抗原混合简便，无需复杂的乳化步骤，通过简单吹打即可实现均匀混合，保留了抗原的天然构象，有利于产生高质量的抗体。
20、(4)经济性：使用本专利技术的佐剂能减少抗原的使用量，缩短免疫周期，降低成本，同时快速激发高效的免疫应答。
21、与现有技术比较本专利技术的有益效果：本专利技术复合水溶性免疫佐剂在单克隆抗体或多克隆抗体制备领域具有显著的竞争优势，其成分无毒且不包含灭活的结核分枝杆菌，有效避免了对佐剂产生特异性抗体的问题。该佐剂与水溶性抗原的混合过程简易，仅需通过5至10次的简单吹打即可实现均匀混合，无需复杂的乳化步骤。这种方法保留了抗原的天然构象，从而有利于产生针对构象依赖性表位的抗体。与传统的弗氏佐剂及其不完全弗氏佐剂相比，本专利技术的复合水溶性免疫佐剂使用更少的抗原量，缩短了免疫周期，并能迅速激发高效的免疫应答和抗体产生，有望成为科研和工业生产中不可或缺的工具，对于加速抗体的研发和生产具有重要意义，具有广泛的应用前景和商业价值。
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1.一种复合水溶性免疫佐剂，其特征在于由以下重量份的组分制成：磷酸缓冲盐溶液干粉18-22份、抗坏血酸钠1-3份、β-葡聚糖8-12份、黄原胶和卡拉胶混合物4-8份、植物提取物8-14份、植物多糖2-5份、超纯水1930-1960份。
2.根据权利要求1所述的复合水溶性免疫佐剂，其特征在于由以下重量份的组分制成：磷酸缓冲盐溶液干粉18-22份、抗坏血酸钠1-2份、β-葡聚糖10-12份、黄原胶和卡拉胶混合物4-5份、植物提取物10-12份、植物多糖4-5份、超纯水1930-1960份。
3.根据权利要求1或2所述的复合水溶性免疫佐剂，其特征在于，所述磷酸缓冲盐溶液干粉，按重量份计，包括以下组分：氯化钠15-18份、氯化钾0.3-0.5份、磷酸氢二钠2.4-3份、磷酸二氢钾0.3-0.5份。
4.根据权利要求1或2所述的复合水溶性免疫佐剂，其特征在于，所述黄原胶和卡拉胶混合物的重量比为1：0.5-2。
5.根据权利要求1或2所述的复合水溶性免疫佐剂，其特征在于，所述植物提取物为松树皮提取物、苜蓿提取物和杜仲叶提取物的一种。
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