【技术实现步骤摘要】
：本专利技术涉及分子诊断，具体涉及一种作为诊断主动脉瓣钙化标志物的血浆外泌体circrna的组合。
技术介绍
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技术介绍
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1、钙化主动脉瓣疾病(calcific aortic valve disease，cavd)是一种高发病率和高死亡率的老年性进行性疾病，主要病理生理改变为主动脉瓣瓣叶纤维增生钙化从而导致瓣膜变硬并引起血流动力学改变，从而影响心脏功能。以往观点均认为cavd是一种与年龄相关的退行性病变，是随着年龄增长，瓣膜组织的退化硬化过程。目前，cavd缺乏有效的临床可用药物治疗方案，其主要治疗手段为主动脉瓣置换手术。然而，接受外科手术的患者必然会承担较高的医疗手术风险及经济负担。因此，了解cavd的分子机制并寻找新的分子生物标记对于改善该病的诊断，实现疾病早期预防早期干预至关重要。
2、外泌体是直径为40-100nm的纳米级双层膜囊泡，广泛分布于血液，唾液，尿液和其他体液中。外泌体可以携蛋白质，脂质体，非编码rna及mrna等到达靶组织，通过参与细胞间交互，调控肿瘤，免疫及心血管疾病。
3、环状rna(circrna)是一类通过反向剪接前体rna(pre-mrna)形成共价闭合结构的非编码rna。研究发现，外泌体中富含稳定circrna。circrna因具有保守性，通用性，稳定性和组织或发育阶段特异性等重要特性。已有大量的研究表明环状rna在动脉粥样硬化、心肌梗死、心力衰竭等心血管疾病中扮演重要角色，其上述特点使得circrna在作为临床疾病理想诊断标记物的开发应用上具有了非常广阔的
4、与血液中游离rna相比，外泌体衍生的rna作为生物标记具有多项优势。一方面，外泌体膜有效保护内含物免受rnase降解，从而保持其完整性和功能性。另一方面，circrna稳定且在血液、唾液及外泌体中稳定丰富表达，是主动脉瓣钙化早期诊断、预防和早期干预的可靠指标。人血清外泌体富含完整且稳定的circrna，其作为主动脉瓣钙化早期诊断的生物标志物潜力巨大。现有技术中公布号为cn113667733a的专利技术专利申请公开了一种circrna在主动脉瓣钙化的诊断试剂盒及治疗药物开发中的应用，在该专利技术中，与正常主动脉瓣组织相比，钙化主动脉瓣组织中的circrnaprdm5显著上调，也可作为制备治疗主动脉瓣钙化药物的靶基因。虽然该专利公开的技术方案能够用于药物开发和诊断，但并未明确其作为主动脉瓣钙化的分子标志物的诊断价值，且其circrna来源于瓣膜组织而非血浆外泌体，不适用于主动脉瓣钙化的临床早期诊断。因此，提出一种外泌体circrna作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物及其应用来解决上述问题很有必要。
技术实现思路
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技术实现思路
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1、(一)解决的技术问题
2、针对上述背景，本专利技术提出外泌体circrna作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物，可以应用于主动脉瓣钙化的临床早期诊断，已解决现有技术缺乏有效的主动脉瓣钙化早期诊断手段的问题。
3、(二)技术方案
4、为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
5、外泌体circrna作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物的应用，所述外泌体circrna为外泌体hsa_circ_0087765，hsa_circ_0062397，hsa_circ_0000098，hsa_circ_0074944，hsa_circ_0009155，hsa_circ_0131642中任一种，所述分子标志物为外泌体hsa_circ_0087765，hsa_circ_0062397，hsa_circ_0000098，hsa_circ_0074944，hsa_circ_0009155，hsa_circ_0131642中任一种或两种以上的分子标志物组合，所述外泌体为血浆外泌体，所述外泌体的核苷酸序列如seq id no:1-6所示，具体如下，
6、所述外泌体hsa_circ_0087765在基因组上的定位为
7、chr9:100308499-100310379，环化序列长度为263个碱基，其核苷酸序列如seq idno:1所示，具体为：
8、gcagtttttcacagtttattggttattcctgcccgaagtcagaactttgacatcttgcaaagtgccat
9、cagtaagcatttggttgggttgactgtaattcctgacagcacggctggctgtgtttttggtgttatct
10、gtaagctcctggatcatacttgtgtagttagtgagactctactgccatttctggcttcttgttgctacagtcttctttattttctgctcactatagagaaaggggaagcagaacatctaagaaagag；
11、所述外泌体hsa_circ_0062397在基因组上的定位为
12、chr22:20824325-20838731，环化序列长度为300个碱基，其核苷酸序列如seq idno:2所示，具体为：
13、gtccaaaagcttctttgcatgtgtccagtggatttccatgggatcttccagttagatgaaagacggag
14、agatgcagtgattgcattgggcatttttctgattgaatctgatcttcagcacaaagattgtgtggttc
15、cttaccttcttcgacttctcaaaggtcttccaaaagtgtattgggtagaagaaagcacagctcggaaa
16、ggcagaggtgccctcccggttgcagagagcttcagcttctgcttggtaactctgctgtctgatgtggcctatagggatccttcacttagggatgag；
17、所述外泌体hsa_circ_0000098在基因组上的定位为
18、chr1:100906851-100921841，环化序列长度为660个碱基，其核苷酸序列如seq idno:3所示，具体为：
19、cttaggcttgatttccgactcttttcacatgtttttcgatagcactgccattttggctggactggcagcttctgttatttcaaaatggagagataatgatgctttctcctatgggtatgttagagcggaagttctggctggctttgtcaatggcctatttttgatcttcactgctttttttattttctcagaaggagttgagagagcattagcccctccagatgtccaccatgagagactgcttcttgtttccattcttgggtttgtggtaaacctaataggaatatttgttttcaaacatggaggtcatggacattctcatggctctggccacggac本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.外泌体circRNA作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物的应用，其特征在于：所述外泌体circRNA为外泌体hsa_circ_0087765，hsa_circ_0062397，hsa_circ_0000098，hsa_circ_0074944，hsa_circ_0009155，hsa_circ_0131642中任一种，所述分子标志物为外泌体hsa_circ_0087765，hsa_circ_0062397，hsa_circ_0000098，hsa_circ_0074944，hsa_circ_0009155，hsa_circ_0131642中任一种或两种以上的分子标志物组合，所述外泌体为血浆外泌体，所述外泌体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1-6所示，具体如下，
2.根据权利要求1所述的外泌体circRNA作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物的应用，其特征在于：所述外泌体circRNA用于制备诊断主动脉瓣钙化的试剂盒、微阵列或生物芯片的标志物。
3.根据权利要求2所述的外泌体circRNA作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物，其特征在于：所述外泌体circRNA表
4.根据权利要求3所述的外泌体circRNA作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物，其特征在于：所述引物为采用荧光定量检测所述外泌体circRNA表达量的引物组合。
5.一种用于诊断主动脉瓣钙化的试剂盒，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.外泌体circrna作为诊断主动脉瓣钙化的分子标志物的应用，其特征在于：所述外泌体circrna为外泌体hsa_circ_0087765，hsa_circ_0062397，hsa_circ_0000098，hsa_circ_0074944，hsa_circ_0009155，hsa_circ_0131642中任一种，所述分子标志物为外泌体hsa_circ_0087765，hsa_circ_0062397，hsa_circ_0000098，hsa_circ_0074944，hsa_circ_0009155，hsa_circ_0131642中任一种或两种以上的分子标志物组合，所述外泌体为血浆外泌体，所述外泌体的核苷酸序列如...
【专利技术属性】
技术研发人员：周廷文，董念国，刘隽炜，金鑫，陈诗琪，徐剑军，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：
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