【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体涉及一种耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47及其用途。
技术介绍
1、黄瓜（ cucumis sativusl.）是葫芦科黄瓜属一年生攀援草本植物，茎部细长和糙硬毛；叶片呈宽卵状心形或裂片三角形；花呈微柔毛黄白色；果实长圆形或圆柱形熟时黄绿色；种子呈狭卵形白色；花果期为夏季。黄瓜原产喜马拉雅山南麓的印度北部地区，现分布于全世界，喜温暖、不耐寒冷、喜潮湿、不耐旱、强光照，黄瓜要求土层深厚，土质肥沃，有机质丰富，通气性良好，微酸至中性土。受所述的喜温暖、不耐寒冷、喜潮湿、不耐旱、强光照，以及黄瓜要求土层深厚，土质肥沃，有机质丰富，通气性良好，微酸至中性土等条件的限制，使得黄瓜的种植条件要求高，只能在部分区域种植，不能对黄瓜进行广泛的种植，影响黄瓜的产量。
2、然而，目前还没有关于耐寒芽孢杆菌能够显著促进植物生长尤其是黄瓜产量增长的报道。
技术实现思路
1、因此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47及其用途，所述耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47具有促进植物生长、显著提高植物产量的优势，尤其是可以提高不耐低温和/或弱光的黄瓜的抗逆性，促进黄瓜在低温弱光条件下生长。
2、为此，本专利技术提供了如下的技术方案：
3、一种耐寒芽孢杆菌（ peribacillus frigoritolerans）ivf-wkb47，已经保藏在中国微生物
4、所述耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47分离自中国农业科学院南口中试实验基地大棚黄瓜根际土壤中；所述耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47在lb固体培养基上的菌落特征为：表面光滑，边缘整齐，不透明，湿粘。
5、一种微生物制剂，含有所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47、其培养物、其发酵物和/或其至少一种代谢物。
6、本专利技术披露的一种微生物制剂，该微生物制剂包括前述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌株、其至少一种代谢物、培养物、发酵液。本文中使用的“代谢物”、“培养物”、“发酵液”包含由本文所述耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌株产生的具有本专利技术披露中所述任何有益作用的任何组分、化合物、物质或副产物（包括但不限于小分子次生代谢物）。所述有益作用包括耐低温、耐弱光、促进植物生长等作用，所述促进植物生长包括但不限于提高亩产量、单果重、坐果数、植物的茎粗、植物的整株鲜重和植物的叶面积。
7、作为可实施的方式，所述微生物制剂中，所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47的活菌数为≥107cfu/ml，作为更优选的可实施的方式，为活菌数为≥108cfu/ml、≥109cfu/ml、活菌数为≥1010cfu/ml，甚至更高。
8、一种所述的微生物制剂的制备方法，包括：将所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47进行扩大培养。
9、作为可实施的方式，所述扩大培养步骤中，所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47接种量为占扩大培养基总体积的1v/v%~10v/v%，优选为1 v/v %、3 v/v %、5 v/v %、7 v/v %或8v/v %，更优选为1 v/v %。
10、作为可实施的方式，所述扩大培养步骤中，扩大培养的时间条件为耐寒芽孢杆菌的常规培养的时间，培养时间优选为6~8h，更优选为8h。
11、作为可实施的方式，所述扩大培养步骤中，所述扩大培养的转速的条件为耐寒芽孢杆菌的常规培养的转速，优选为200~220rpm，更优选为220rpm。
12、作为可实施的方式，所述扩大培养步骤中，所述扩大培养的温度条件为耐寒芽孢杆菌的常规培养温度，温度优选为28~37℃，更优选为37℃。
13、作为可实施的方式，所述扩大培养步骤中，所述扩大培养的培养基可以选择适用于耐寒芽孢杆菌的常规培养基，优选为tsb液体培养基，所述tsb液体培养基为常规的市售产品，在组分和用量上没有特殊的要求。经上述扩大培养后，所得到的菌液利用紫外分光光度计检测，在波长为600nm下测得od600值为0.5~1.5，更优选的为od600值为1。
14、作为可实施的方式，所述扩大培养后，还包括对获得的菌液进行离心的步骤，以获得耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47的菌体沉淀。作为优选的实施方式，选择对od600值为1的菌液进行二次离心，包括第一次离心和第二次离心。所述离心的速度和时间为本领域常规的技术，第一次离心和第二次离心的速度均可以为3000~6000g，优选为4000~5000g，更优选为5000g，离心的时间可以为5~15min，优选为8~13min，更优选为10min。在第一次离心后还包括采用无菌水进行冲洗第一次离心后获得菌体沉淀的步骤，无菌水的用量和冲洗的方式没有特殊的要求。经过上述的离心步骤得到含有菌株ivf-wkb47的沉淀。
15、作为可实施的方式，在所述的离心步骤后，还包括对离心步骤获得的菌株ivf-wkb47的沉淀采用无菌水进行重悬，获得的菌悬液利用紫外分光光度计检测，以在波长为600nm下得到od值为0.02的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47为准，以此能够制备得到有效活菌数≥107cfu/ml的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌液。
16、作为可实施的方式，上述扩大培养获得的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌液，优选的选择od600值为0.02的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌液，可以直接施用植物，施用方式包括但不限于灌根、包衣、浸种、堆肥、大田漫灌、滴灌植物或植物器官等。
17、作为可实施的方式，上述扩大培养获得的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌液用于制备耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47发酵液，作为更优选的实施方式，以od600值为0.02的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌液为种子液，接种至发酵培养基中，进行有氧发酵，得到耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47的发酵液。
18、作为可实施的方式，所述有氧发酵的发酵培养基可以为本领域常规的适用于耐寒芽孢杆菌的发酵培养基，作为优选的实施方式，所述有氧培养的发酵培养基可以包括以下组分(重量百分比)：玉米粉0.5～2.0％，葡萄糖0.1％～1.0％，豆饼粉0.5％～3％，鱼粉0.1％～1.5％，碳酸钙0.31％～1.69％，硫酸铵0.05％～0.15％，磷酸氢二钾0.01％～0.06％，硫酸镁0.01％～0.06％和硫酸锰0.01％～0.06％，余量为水。
19、作为可实施的方式，所述有氧发酵时，耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47菌液的接种量为1v/v%~20v/v%，优选的为3 v/v%、6 v/v%、10 v/v%或20 v/v%，更优选为10 v/v%。
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【技术保护点】
1.一种耐寒芽孢杆菌（Peribacillus frigoritolerans）IVF-WKB47，保藏编号为CGMCCNo.28315。
2.一种微生物制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的耐寒芽孢杆菌IVF-WKB47、其培养物、其发酵物和/或其至少一种代谢物。
3.根据权利要求2所述的微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂中，所述的耐寒芽孢杆菌IVF-WKB47的活菌数为≥107cfu/mL。
4.一种如权利要求2或3所述的微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括：将所述的耐寒芽孢杆菌IVF-WKB47进行扩大培养。
5.权利要求1所述的耐寒芽孢杆菌IVF-WKB47、权利要求2或3所述的微生物制剂或权利要求4所述的制备方法制备得到的微生物制剂在促进植物生长中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述促进植物生长包括提高植物果实亩产量、单果重、坐果数、植物的茎粗、植物的整株鲜重和植物的叶面积中的至少一种；
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，
8.一种植物生长调节剂、种子包
9.一种促进植物生长的方法，其特征在于，包括施用权利要求1所述的耐寒芽孢杆菌IVF-WKB47、权利要求2或3所述的微生物制剂、权利要求4所述的制备方法制备得到的微生物制剂或权利要求8所述的植物生长调节剂、种子包衣剂、灌根剂、浸种剂、微生物农药或微生物肥料；施用方式包括灌根；
10.根据权利要求9所述的促进植物生长的方法，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.一种耐寒芽孢杆菌（peribacillus frigoritolerans）ivf-wkb47，保藏编号为cgmccno.28315。
2.一种微生物制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47、其培养物、其发酵物和/或其至少一种代谢物。
3.根据权利要求2所述的微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂中，所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47的活菌数为≥107cfu/ml。
4.一种如权利要求2或3所述的微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括：将所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47进行扩大培养。
5.权利要求1所述的耐寒芽孢杆菌ivf-wkb47、权利要求2或3所述的微生物制剂或权利要求4所述的制备方法制备得到的微生物制剂在促进植物生长中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途，...
【专利技术属性】
技术研发人员：秦宇轩，杨学勇，叶晓龙，包翔宇，王昆，张菡，朱雪莹，郑盈盈，万丽，
申请(专利权)人：中国农业科学院蔬菜花卉研究所，
类型：发明
国别省市：
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