【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，尤其是涉及埃博拉病毒结合蛋白及其应用、埃博拉病毒检测试剂盒。
技术介绍
1、传染病早期的正确诊断是及时隔离和采取有效治疗的基础，可以有效防止其扩散。传染病的检查包括病源微生物的分离培养、病源微生物抗原的检查、病源微生物的核酸检查。其中病源微生物、病毒的分离培养是传染病的重要检测方法，分离培养的得到传染病的致病菌或者病毒的变异情况及传染病趋势的预测意义重大；分子生物学技术的发展使得核酸检测得到普及，主要是依据每一个生物都有特定的核酸序列以及dna序列的特点，只要检测出人体内有特定病毒或者病原微生物的基因序列，证明被病原微生物或者病毒感染，根据检测到信号的强弱确定被感染的程度，具有灵敏度高、特异性好得优点，但需要专业的操作人员进行。病原微生物抗原检查是重要检测手段，对实验室无特殊要求，具有早筛查、早诊断的优势，适合基层社区大规模筛查。
2、埃博拉病毒（ebov）属丝状病毒科，长度为 970 纳米，呈长丝状体，单股负链rna病毒，有 18959 个碱基，分子量为4.17×106。外有包膜，病毒颗粒直径大约 80 纳米，大小100 纳米×（300～1500）纳米，感染能力较强的病毒一般长 665～805 纳米左右，有分支形、u形、6形或环形，分支形较常见。有囊膜，表面有 8～10 纳米长的纤突，纯病毒粒子由一个螺旋形核糖核壳复合体构成，含负链线性 rna 分子和 4 个毒粒结构蛋白。较长的奇形怪状的病毒粒子相关结构可呈分枝状或盘绕状，长达 10 微米，埃博拉病毒主要是通过病人的血液、唾液、汗水和分泌物等途
3、已确定埃博拉病毒分 5 个亚型，即埃博拉—扎伊尔型（ebo-zaire）、埃博拉—苏丹型（ebo-sudan）、埃博拉—莱斯顿型（ebo-r）、埃博拉—科特迪瓦型（ebo-ci）和塔伊夫森林病毒（tai forest virus ）。不同亚型具有不同的特性，ebo-z 和 ebo-s 对人类和非人类灵长类动物的致病性和致死率很高；ebo-r 对人类不致病，对非人类灵长类动物具有致死性作用；ebo-ci 对人类有明显的致病性，但一般不致死，对黑猩猩的致死率很高。
4、目前，埃博拉病毒的检测方法主要包括电镜法、分子生物学检测方法、免疫法等。
5、上述方法存在检测步骤繁琐、检测周期长的问题，不利于病毒大流行时进行快速筛选，不能快速、精准、安全的对大量的包括疑似病例、处于潜伏期无症状感染病例以及风险更高的无症状病毒携带者人群进行及时检测。解决这一问题，对间接拟解决核酸检测能力不足、减少潜在传染风险、防止疫情蔓延意义重大。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供埃博拉病毒结合蛋白，所述埃博拉病毒结合蛋白能够特异性识别埃博拉病毒；提供所述埃博拉病毒结合蛋白在制备埃博拉病毒检测产品中的应用；提供埃博拉病毒检测产品，以解决现有技术中的问题。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供了一种埃博拉病毒结合蛋白，包括蛋白a和/或蛋白b，
3、所述蛋白a包括氨基酸序列依次如下所述的重链互补决定区：氨基酸序列如seqid no.1所示的cdr1-vh，氨基酸序列如seq id no.2所示的cdr2-vh 、氨基酸序列如seq idno.3所示的cdr3-vh；
4、所述蛋白a包括氨基酸序列依次如下所述的轻链互补决定区：氨基酸序列如seqid no.4所示的cdr1-vl、氨基酸序列如seq id no.5所示的cdr2-vl、氨基酸序列如seq idno.5所示的cdr3-vl；
5、所述蛋白b包括氨基酸序列依次如下所述的重链互补决定区：氨基酸序列如seqid no.7所示的cdr1-vh、氨基酸序列如seq id no.8所示的cdr2-vh、氨基酸序列如seq idno.9所示的cdr3-vh；
6、所述蛋白b包括氨基酸序列依次如下所述的轻链互补决定区：氨基酸序列如seqid no.10所示cdr1-vl、氨基酸序列如seq id no.11所示cdr2-vl、氨基酸序列如seq idno.12所示cdr3-vl。
7、优选的是，所述蛋白a包括氨基酸序列依次如seq id no.13所示的重链可变区和seq id no.14所示的轻链可变区。
8、上述任一项优选的是，所述蛋白b包括氨基酸序列依次如seq id no.15所示的重链可变区和seq id no.16所示的轻链可变区。
9、上述任一项优选的是，所述蛋白a轻链的氨基酸序列如seq no id.17所示。
10、上述任一项优选的是，所述蛋白a重链的氨基酸序列如seq no id.18所示。
11、上述任一项优选的是，所述蛋白b轻链的氨基酸序列如seq no id.19所示。
12、上述任一项优选的是，所述蛋白b重链的氨基酸序列如seq no id.20所示。
13、上述任一项优选的是，所述蛋白a或蛋白b的轻链恒定区的氨基酸序列如seq noid.21所示。
14、上述任一项优选的是，所述蛋白a或蛋白b的重链恒定区的氨基酸序列如seq noid.22所示。
15、本专利技术还提供了上述任一项所述的埃博拉病毒结合蛋白在制备埃博拉病毒检测产品中的应用。
16、本专利技术还提供了一种埃博拉病毒检测试纸条，所述检测试纸条包括底板和依次叠压设置于底板上的上样垫、标记垫、检测垫和吸样垫；所述标记垫含有上述任一项所述的埃博拉病毒结合蛋白，埃博拉病毒结合蛋白标记有标记物。
17、上述任一项优选的是，所述标记物包括胶体金、彩色微球、时间分辨荧光微球或者量子点微球中的至少一种。
18、上述任一项优选的是，胶体金的颗粒大小为40~100nm；进一步优选为40、50、60、80、100nm及其间范围。
19、上述任一项优选的是，彩色微球的颗粒大小为100~300nm；进一步优选的为，100、200、300nm及其间范围。
20、上述任一项优选的是，时间分辨荧光微球的颗粒大小为100~300nm；进一步优选的为，100、200、300nm及其间范围。
21、上述任一项优选的是，量子点微球的颗粒大小为100~300nm；进一步优选的为，100、200、300nm及其间范围。
22、上述任一项优选的是，埃博拉病毒结合蛋与胶体金的质量比为：（0.04~0.32）：1；进一步优选为，0.04：1、0.10：1、0.15：1、0.20：1、0.25：1、0.30：1、0.32：1及其间范围。
23、上述任一项优选的是，埃博拉病毒结合蛋与彩色微球的质量比为：（0.1~0.4）：1；进一步优选为0.1：1、0.2：1、0.3：1、0.4：1及其间范围。
24、上述任一项优选的是，埃博拉病毒结合蛋与时间分辨荧光微球的质量比为：（0.1~0.4）：1；进一步优选为0.1：1、0.2：1、0.3本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种埃博拉病毒结合蛋白，包括蛋白A和/或蛋白B，其特征在于，
2.根据权利要求1所述的埃博拉病毒结合蛋白，其特征在于，
3.权利要求1或2所述的埃博拉病毒结合蛋白在制备埃博拉病毒检测产品中的应用。
4.一种埃博拉病毒检测试纸条，其特征在于，所述检测试纸条包括底板和依次叠压设置于底板上的上样垫、标记垫、检测垫和吸样垫；
5.根据权利要求4所述的埃博拉病毒检测试纸条，其特征在于，所述标记物包括胶体金、彩色微球、时间分辨荧光微球或者量子点微球中的至少一种。
6.根据权利要求4所述的埃博拉病毒检测试纸条，其特征在于，所述检测垫上设置有检测线和质控线；检测线包被有1~2mg/mL的权利要求1或2所述的埃博拉病毒结合蛋白；质控线包被有1~2mg/mL的羊抗鼠IgG多克隆抗体；埃博拉病毒结合蛋白和羊抗鼠IgG多克隆抗体的稀释液为包含海藻糖的15~25mM的PB缓冲液，每100mL的稀释液包含0.1~0.9g的海藻糖。
7.根据权利要求6所述的埃博拉病毒检测试纸条，其特征在于，所述标记垫上的埃博拉病毒结合蛋白与检测垫上的
8.一种埃博拉病毒检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求4~7任一项所述的埃博拉病毒检测试纸条和壳体，所述埃博拉病毒检测试纸条设置于壳体内部。
9.根据权利要求8所述的埃博拉病毒检测试剂盒，其特征在于，所述壳体包括可拆卸连接的上盖和下盖；所述上盖设置有观察窗和加样孔。
10.根据权利要求8所述的埃博拉病毒检测试剂盒，其特征在于，所述埃博拉病毒检测试剂盒检测血样；所述埃博拉病毒检测试剂盒还包括样品稀释液；所述样品稀释液为90~110 mM的Tris缓冲液，且每100mL 90~110 mM的Tris缓冲液包含有0.9 g NaCl、0.4 g~0.6g Tritonx-100、0.4 g~0.6 g Tween 20，pH为8.5。
...【技术特征摘要】
1.一种埃博拉病毒结合蛋白，包括蛋白a和/或蛋白b，其特征在于，
2.根据权利要求1所述的埃博拉病毒结合蛋白，其特征在于，
3.权利要求1或2所述的埃博拉病毒结合蛋白在制备埃博拉病毒检测产品中的应用。
4.一种埃博拉病毒检测试纸条，其特征在于，所述检测试纸条包括底板和依次叠压设置于底板上的上样垫、标记垫、检测垫和吸样垫；
5.根据权利要求4所述的埃博拉病毒检测试纸条，其特征在于，所述标记物包括胶体金、彩色微球、时间分辨荧光微球或者量子点微球中的至少一种。
6.根据权利要求4所述的埃博拉病毒检测试纸条，其特征在于，所述检测垫上设置有检测线和质控线；检测线包被有1~2mg/ml的权利要求1或2所述的埃博拉病毒结合蛋白；质控线包被有1~2mg/ml的羊抗鼠igg多克隆抗体；埃博拉病毒结合蛋白和羊抗鼠igg多克隆抗体的稀释液为包含海藻糖的15~25mm的pb缓冲液，每100ml的稀释液...
【专利技术属性】
技术研发人员：张舟，何其，谢宇文，刘春龙，
申请(专利权)人：天津龙晟生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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