【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药，具体为一种玉簪花中性杂多糖、提取方法及其应用。
技术介绍
1、急性咽炎是咽黏膜、黏膜下组织及其淋巴组织的急性炎症。其症状为咽部干燥、灼热、粗糙、疼痛、吞咽加痛，咽痛可以放射至两侧耳部及颈部。若炎症累及喉部，可以出现咳嗽、声音嘶哑等症状。常为上呼吸道感染的一部分，可以单独发生，也可继发于急性鼻炎。急性咽炎的发病原因有病毒(如流感病毒、腺病毒等)、细菌感染(如链球菌、葡萄球菌等)，以及物理化学因素，如高温、粉尘、烟雾、刺激性气体以及烟酒、辛辣食品等。急性咽炎是一种常见病。由细菌导致的急性咽炎，可使用抗生素(如：阿莫西林)杀灭细菌间接缓解炎症状态。值得注意的是，虽然由病毒和物理化学因素导致的急性咽炎是自限性的，但是发作期仍会给病人带来很大的痛苦。目前仍缺乏治疗或缓解急性咽炎的特效药。更重要的是，急性炎症反复发作可转化成慢性炎症进而可使鼻咽部黏膜发生癌变。因此，开发出治疗急性咽炎的药物具有重大价值。
2、玉簪是天门冬科玉簪属的多年生宿根植物。原产于中国及日本，美国等国，欧洲地区也多有栽培。作为中国传统医学常用药物，玉簪花被用于治疗咽喉肿痛、喑哑、缓解咳嗽。玉簪花成分有多糖、黄酮类、甾体、单萜皂苷和苯丙素等。现代药理学研究表明玉簪花花提取物具有抗炎镇痛、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、抗慢性前列腺炎等作用。玉簪花提取物通过抑制大鼠血清中肿瘤坏死因子α(tnf-α)、白细胞介素1β(il-1β)、il-6等炎性细胞因子水平而具有抗ap作用。玉簪花提取物可通过抑制nf-κb、mapks、jak-stat和pi3k-akt
3、目前关于玉簪花多糖的研究还很少，为了阐明玉簪花多糖的结构及活性，本专利技术提出一种玉簪花中性杂多糖、提取方法及其应用。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
2、一方面，本申请实施例提供了一种玉簪花中性杂多糖，所述玉簪花中性杂多糖为hpfp-1，所述hpfp-1的单糖由葡萄糖和果糖组成，单糖摩尔比为：17.08:82.92；
3、所述hpfp-1主要由结构为：→1)-β-d-fruf-(2→和少量→1,6)-β-d-fruf-(2→，→6)-α-d-glcp相互连接形成主链，支链主由β-d-fruf-(2→连接在糖残基→1,6)-β-d-fruf-(2→的o-6位作为侧链。
4、另一方面，本申请实施例提供了一种玉簪花中性杂多糖，所述玉簪花中性杂多糖为hpfp-2，所述hpfp-2的单糖由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成，单糖摩尔比为24.90：6.87：59.56：3.03：2.29：1.38:1.95；
5、所述hpfp-2主要由结构为→3,6)-β-d-galp-(1→，→5)-α-l-araf-(1→，→3)-β-d-galp-6-ome(1→，→6)-β-d-galp-(1→，→4)-α-d-galp-(1→相互连接形成主链，支链主由α-l-araf-(1→连接在糖残基→3,6)-β-d-galp-(1→的o-3位置，β-d-galp-(1→连接在糖残基→3,6)-β-d-galp-(1→的o-3位置。
6、一种玉簪花中性杂多糖的方法，所述提取方法包括以下步骤：
7、s1、将烘干后玉簪花干品粉碎过筛，加入无水乙醇，搅拌萃取脂溶性成分，离心得到沉淀物；
8、s2、向沉淀物中加入纯水，水浴提取、离心后收集上清液，沉淀提取两次，合并两次上清液得到提取液；
9、s3、将提取液真空旋蒸浓缩，加入无水乙醇过夜醇沉，离心收集沉淀固体得到粗多糖；
10、s4、向s3得到的粗多糖中加入纯水，使粗多糖充分溶解，加入木瓜蛋白酶，过夜酶解，向水相中加入1/4体积三氯甲烷和正丁醇，充分混匀，收集上层水相；向液体中加入石油醚，充分混匀，收集下层水相，向水相中加入大孔树脂ab-8，充分混匀，过夜吸附，收集液体，3000da透析袋透析24h，以除去小分子成分，多糖溶液冷冻干燥得到粗多糖；
11、s5、将s4得到的粗多糖溶于纯水，离心取上清液过离子交换柱纯化，流速4ml/min；依次采用纯水、0.1mol/l、0.2mol/l和0.3mol/l nacl溶液等梯度洗脱，每15ml收集一管，采用硫酸-苯酚法监测，并绘制离子纯化洗脱曲线；合并同一个洗脱峰对应的各收集管洗脱液，浓缩；3000da透析袋透析48h除盐，得到离子纯化后的多糖；
12、s6、取离子纯化后的多糖加入纯水，溶解；离心取上清液过凝胶层析柱分离纯化，流速1ml/min；采用纯水洗脱，每12ml收集一管，收集所有洗脱液；采用硫酸-苯酚法监测，并绘制凝胶纯化洗脱曲线；合并同一个洗脱峰对应的各收集管洗脱液，浓缩，冷冻干燥；采用硫酸-苯酚法检测凝胶纯化后多糖纯度，得到玉簪花中性杂多糖hpfp-1和hpfp-2。
13、进一步地，所述s2中，60℃水浴提取4h，6000g离心10min。
14、进一步地，所述s3中，真空旋蒸浓缩至原体积的1/10，加入四倍体积无水乙醇过夜醇沉，8000g离心10min收集沉淀固体，采用硫酸-苯酚法测定粗多糖提取物的可溶性总糖含量及纯度，具体操作为：准确称取少量多糖冻干粉，加水溶解后，加入硫酸-苯酚试剂，避光反应10min，在490nm处测定吸光值。
15、进一步地，所述s4中，得到的粗多糖采用硫酸-苯酚法测定可溶性总糖含量及纯度。
16、进一步地，所述s5中，采用硫酸-苯酚法检测离子纯化后多糖含量和纯度。
17、再一方面，本申请实施例提供了上述所述的玉簪花中性杂多糖在制备改善炎症损伤的抗炎药物中的应用。
18、与现有技术相比，本申请技术方案的有益效果如下：
19、本专利技术在lps诱导的raw264.7细胞炎症模型上，hpfp-1，hpfp-2可能通过抑制nf-κb信号通路(p-65,p65,p-iκb,p-iκb)降低no、tnf-α，il-6水平，因此，玉簪花多糖是玉簪花发挥抗炎作用的成分之一，且hpfp可以作为一种膳食补充剂或潜在治疗炎症损伤的抗炎药物。
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1.一种玉簪花中性杂多糖，其特征在于，所述玉簪花中性杂多糖为HPFP-1，所述HPFP-1的单糖由葡萄糖和果糖组成，单糖摩尔比为：17.08:82.92；
2.一种玉簪花中性杂多糖，其特征在于，所述玉簪花中性杂多糖为HPFP-2，所述HPFP-2的单糖由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成，单糖摩尔比为24.90：6.87：59.56：3.03：2.29：1.38:1.95；
3.一种权利要求1或2所述的玉簪花中性杂多糖的方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的玉簪花中性杂多糖的方法，其特征在于，所述S2中，60℃水浴提取4h，6000g离心10min。
5.根据权利要求3所述的玉簪花中性杂多糖的方法，其特征在于，所述S3中，真空旋蒸浓缩至原体积的1/10，加入四倍体积无水乙醇过夜醇沉，8000g离心10min收集沉淀固体，采用硫酸-苯酚法测定粗多糖提取物的可溶性总糖含量及纯度，具体操作为：准确称取少量多糖冻干粉，加水溶解后，加入硫酸-苯酚试剂，避光反应10min，在490nm
6.根据权利要求3所述的玉簪花中性杂多糖的方法，其特征在于，所述S4中，得到的粗多糖采用硫酸-苯酚法测定可溶性总糖含量及纯度。
7.根据权利要求3所述的玉簪花中性杂多糖的方法，其特征在于，所述S5中，采用硫酸-苯酚法检测离子纯化后多糖含量和纯度。
8.如权利要求1-2任一所述的玉簪花中性杂多糖在制备改善炎症损伤的抗炎药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种玉簪花中性杂多糖，其特征在于，所述玉簪花中性杂多糖为hpfp-1，所述hpfp-1的单糖由葡萄糖和果糖组成，单糖摩尔比为：17.08:82.92；
2.一种玉簪花中性杂多糖，其特征在于，所述玉簪花中性杂多糖为hpfp-2，所述hpfp-2的单糖由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成，单糖摩尔比为24.90：6.87：59.56：3.03：2.29：1.38:1.95；
3.一种权利要求1或2所述的玉簪花中性杂多糖的方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的玉簪花中性杂多糖的方法，其特征在于，所述s2中，60℃水浴提取4h，6000g离心10min。
5.根据权利要求3所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：李慧芳，白天凯，拉喜那木吉拉，
申请(专利权)人：内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：
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