【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及外诊断试剂化学发光，尤其涉及一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法。
技术介绍
1、据调查数据显示，心肌梗死等疾病的发病率急剧上升，已成为全球非传染性疾病死亡的首要原因。心肌梗死作为临床常见的心血管疾病，是慢性心力衰竭的主要诱因之一，而心脏微血管损伤是导致心肌梗死发生和发展的关键因素。研究表明，心脏微血管损伤会导致心肌细胞供血不足，进而引发局部急性血栓形成，从而引起心肌梗死。因此，预防和治疗心肌梗死对于提高患者的生活质量和生存率具有极其重要的意义。
2、肌钙蛋白是一组与横纹肌细胞相关的结构蛋白质，由肌钙蛋白c、肌钙蛋白t和肌钙蛋白i三种特异性亚单位构成。研究发现，ctni是目前已知对心肌损伤诊断具有最高特异性和敏感性的标志物之一。与ck、ck-mb、ctnt等常用指标相比，ctni不易受到骨骼肌损伤的干扰，与骨骼肌tni及其他心肌蛋白无交叉反应。心肌受损后，血清中的ctni浓度显著升高，持续时间长，易于检测。其特异性可达99％，敏感性超过96％。
3、ctni在联合检测方面也展现出诸多优势。高稳等人的研究显示，ctni与dd及其比值在急性心肌梗死与主动脉夹层的鉴别诊断中具有较高的敏感度和特异度，而ctni与dd的比值及二者联合检测在鉴别诊断方面的价值更高。兰慧秦探讨了n端b型钠尿肽前体(nt-probnp)与ctni联合检测对心肌梗死患者心力衰竭诊断及心功能分级的预测作用，结果表明这种联合检测具有重要的临床意义，且差异具有统计学意义。因此，ctni在心肌梗死等疾病的检测方面具有深远的意义，如
4、目前，虽然ctni抗体的标记方法众多，但能有效且高效进行标记，且各项指标表现优异的方法并不多。例如，专利cn107918022a使用tcep链接抗体，sulfo-smcc链接碱性磷酸酶，但反应时间过长，不利于生产。专利cn114994304b则侧重于磁微粒的生产与包被，对发光物的描述较少。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，旨在解决现有的碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法效价低、信噪差且不稳定的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，包括以下步骤：
3、用异端交联剂与ctni抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第一反应物；
4、将碱性磷酸酶与2-it试剂进行反应0.5-4h后使用所述反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第二反应物；
5、按预设比例对所述第一反应物和所述第二反应物进行混合，得到混合物；
6、用10mm pbs稀释还原后的bsa至5-10mg/ml，制备标记封闭剂；
7、按预设比例将所述标记封闭剂和所述混合物混合反应5min-20min。
8、其中，在“用异端交联剂与ctni抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第一反应物”中，所述异端交联剂为smcc或spdp氨基-巯基偶联试剂。
9、其中，在“用异端交联剂与ctni抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第一反应物”中，所述反应剂为含氨溶液，如赖氨酸、甘氨酸或tris。
10、其中，如权利要求3所述的一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，其特征在于，在“按预设比例对所述第一反应物和所述第二反应物进行混合，得到混合物”中，所述预设比例为1：0.1-1：0.8。
11、其中，如权利要求4所述的一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，其特征在于，在“按预设比例将所述标记封闭剂和所述混合物混合反应5min-20min”中，所述预设比例为1：0.5-1：1。
12、本专利技术的一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，包括以下步骤：用异端交联剂与ctni抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第一反应物；将碱性磷酸酶与2-it试剂进行反应0.5-4h后使用所述反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第二反应物；按预设比例对所述第一反应物和所述第二反应物进行混合，得到混合物；用10mm pbs稀释还原后的bsa至5-10mg/ml，制备标记封闭剂；按预设比例将所述标记封闭剂和所述混合物混合反应5min-20min。本专利技术降低本底、优化其信噪，改善假阳率，且提高该标记方法所标记的碱性磷酸酶标记ctni抗体稳定性，解决了现有的碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法效价低、信噪差且不稳定的问题。
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1.一种碱性磷酸酶标记CTNI抗体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的一种碱性磷酸酶标记CTNI抗体制备方法，其特征在于，在“用异端交联剂与CTNI抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第一反应物”中，所述异端交联剂为SMCC或SPDP氨基-巯基偶联试剂。
3.如权利要求1所述的一种碱性磷酸酶标记CTNI抗体制备方法，其特征在于，在“用异端交联剂与CTNI抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第一反应物”中，所述反应剂为含氨溶液，如赖氨酸、甘氨酸或TRIS。
4.如权利要求1所述的一种碱性磷酸酶标记CTNI抗体制备方法，其特征在于，在“按预设比例对所述第一反应物和所述第二反应物进行混合，得到混合物”中，所述预设比例为1：0.1-1：0.8。
5.如权利要求1所述的一种碱性磷酸酶标记CTNI抗体制备方法，其特征在于，在“按预设比例将所述标记封闭剂和所述混合物混合反应5min-20min”中，所述预设比例为1：0.5-1：1。
【技术特征摘要】
1.一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，其特征在于，在“用异端交联剂与ctni抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并脱去游离试剂，得到第一反应物”中，所述异端交联剂为smcc或spdp氨基-巯基偶联试剂。
3.如权利要求1所述的一种碱性磷酸酶标记ctni抗体制备方法，其特征在于，在“用异端交联剂与ctni抗体反应0.5-4h后使用反应终止剂终止反应，并...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘红平，陈婷，石小琪，
申请(专利权)人：桂林优利特医疗电子有限公司，
类型：发明
国别省市：
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