【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，尤其涉及一种抗冠状病毒的中药组合物及其机制研究方法。
技术介绍
1、冠状病毒是一组单股正链rna病毒，具包膜。目前已知可以感染人类的有七种：人冠状病毒229e，人冠状病毒oc43，严重急性呼吸综合征冠状病毒(sars-cov)，人冠状病毒nl63，人冠状病毒hku1，中东呼吸综合征冠状病毒(middle east respiratory syndromecoronavirus，mars-cov)，严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratorysyndrome coronavirus 2，sars-cov-2)，主要引起呼吸系统感染。
2、感染sars-cov-2临床症状主要表现为发热、咳嗽、疼痛，导致呼吸衰竭、多器官衰竭，甚至死亡。疾病的严重程度一般与患者的免疫系统状况及有无心血管疾病、高血压、糖尿病等基础疾病有关，健康人群一般在接受治疗后2-4周可以康复。病毒的传播主要是通过与感染者体液接触、呼吸道飞沫和气溶胶等，可以沉积在物体表面，并在适宜的条件下可以存活数天，所以该病毒的传染性很强，目前未发现不易被感染的群体。再加上由于病毒的不断突变，感染或者接种疫苗的人群依然能够再次感染，甚至面临着突破感染，发展为严重疾病的风险。
3、目前，治疗和预防sars-cov-2的机制主要是：防止病毒进入宿主细胞，抑制病毒复制，免疫调节。新冠病毒表面的rbd区是与细胞膜上ace2受体结合感染细胞的关键，因此针对这一结合作用是研发病毒进入阻碍药物的重要方向。如，针对
4、中医药(traditional chinese medicine，tcm)治疗传染病已有两千多年的历史，积累了一万多种中草药、十万种配方。与其他抗冠状病毒药物相比，tcm具有多成分多靶点、副作用小的特点，在缩短治疗时间、缓解症状、减少病重方面发挥了独特的优势。并且，在sars疫情防控中中医药作出了突出贡献，也为sars-cov-2提供了参考价值。
5、因此，寻找既可以抗病毒感染又可以抗免疫的药物，尽早治疗，是预防sars-cov-2重症和并发症的重要手段。
技术实现思路
1、本专利技术提供一种抗冠状病毒的中药组合物及其机制研究方法，已解决现有冠状病毒治疗困难以及治疗机制尚不清楚的技术问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本申请提供的一种抗冠状病毒的中药组合物，由以下重量份的组分组成：荆芥10-20份、防风10-20份、紫苏叶10-20份、陈皮10-20份、炒白术10-20份、茯苓10-20份、枳壳10-20份、柴胡10-20份、前胡10-20份、炙甘草5-15份。
4、进一步的，由以下重量份的组分组成：荆芥15份、防风15份、紫苏叶15份、陈皮15份、炒白术15份、茯苓15份、枳壳15份、柴胡15份、前胡15份、炙甘草10份。
5、进一步的，所述中药组合物中抗病毒和抗免疫的化合物为：橙皮甙、β-谷甾醇、柚皮素以及木犀草素-7-o-葡萄糖苷。
6、进一步的，所述中药组合物通过抑制s蛋白与ace2的结合以及pi3k-akt信号通路发挥抗病毒作用。
7、本专利技术提供的一种抗冠状病毒的中药组合物的机制研究方法，具体包括下述步骤：
8、s1、假病毒的构建：利用hiv-1三质粒系统包装携带有绿色荧光蛋白gfp的原始株及其变异株假病毒，采用peg8000的方法浓缩，通过感染实验验证假病毒的感染能力和滴度测定；
9、s2、中药组合物抗假病毒感染效果的评价：通过cck8法检测复方中药的细胞毒性，确定安全作用时间和浓度；通过感染抑制实验，将两种假病毒和三种复方药物分别共培养，荧光显微镜观察绿色荧光细胞的数量确定复方中药对病毒感染活性的影响。
10、s3、中药组合物抗冠状病毒的潜在机制探究：通过网络药理学和分子对接技术来探索潜在的机制；
11、s4、利用实时荧光定量pcr技术检测药物对假病毒感染的抗炎作用：使用trizolrna提取法提取细胞总rna，逆转录后使用荧光定量pcr技术检测三种复方对il1b、il6、tnf表达的影响。
12、进一步的，所述步骤s1中，三质粒系统包括pcdh-gfp、pspax2以及spike蛋白的包膜质粒。
13、进一步的，所述步骤s1中，浓缩病毒滴度的计算方式为：
14、浓缩病毒的滴度＝视野内荧光细胞数量×稀释倍数×1000ml/加入的原始浓缩病毒体积。
15、进一步的，所述步骤s3具体包括下述子步骤：
16、s31、利用tcmsp确定复方作用靶点，genecards、ttd、omim数据库确定新型冠状病毒引起的肺炎相关靶点；
17、s32、使用cytoscape绘制“关键化合物-靶点网络图”，得到核心药物小分子化合物；
18、s33、使用ppi进行蛋白互作网络图，获得核心靶点；
19、s34、使用david数据库进行go和kegg富集分析；
20、s35、使用autodock对关键小分子化合物和筛选出的关键靶点进行分子对接。
21、本专利技术实现的有益效果：
22、本专利技术提供的抗冠状病毒的中药组合物及其机制研究方法，基于hiv-1三质粒系统的sars-cov-2(原始株和奥密克戎变异株)假病毒，并利用该假病毒系统评价了sczyy1和2的抗病毒效果。深入研究发现，中药组合物可以通过干扰ace2和rbd的结合，以及靶向akt1靶点进而调控pi3k-akt信号通路，从而抑制了sars-cov-2感染宿主细胞及细胞因子il1b、tnf、il6的表达，减轻了炎症反应。此外，我们还获得了抗病毒和抗免疫的关键化合物。这些发现为中医药抗sars-cov-2感染研究提供了线索和依据，并进一步的药物开发和临床治疗奠定了科学基础。
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1.一种抗冠状病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的组分组成：荆芥10-20份、防风10-20份、紫苏叶10-20份、陈皮10-20份、炒白术10-20份、茯苓10-20份、枳壳10-20份、柴胡10-20份、前胡10-20份、炙甘草5-15份。
2.根据权利要求1所述的一种抗冠状病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的组分组成：荆芥15份、防风15份、紫苏叶15份、陈皮15份、炒白术15份、茯苓15份、枳壳15份、柴胡15份、前胡15份、炙甘草10份。
3.根据权利要求1所述的一种抗冠状病毒的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中抗病毒和抗免疫的化合物为：橙皮甙、β-谷甾醇、柚皮素以及木犀草素-7-O-葡萄糖苷。
4.根据权利要求1所述的一种抗冠状病毒的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物通过抑制S蛋白与ACE2的结合以及PI3K-AKT信号通路发挥抗病毒作用。
5.一种抗冠状病毒的中药组合物的机制研究方法，其特征在于，应用于检测权利要求1-4任意一项所述的抗冠状病毒的中药组合物，具体包括下述步骤：
6.
7.根据权利要求5所述的一种中药抗冠状病毒的机制研究方法，其特征在于，所述步骤S1中，浓缩病毒滴度的计算方式为：
8.根据权利要求5所述的一种中药抗冠状病毒的机制研究方法，其特征在于，所述步骤S3具体包括下述子步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种抗冠状病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的组分组成：荆芥10-20份、防风10-20份、紫苏叶10-20份、陈皮10-20份、炒白术10-20份、茯苓10-20份、枳壳10-20份、柴胡10-20份、前胡10-20份、炙甘草5-15份。
2.根据权利要求1所述的一种抗冠状病毒的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的组分组成：荆芥15份、防风15份、紫苏叶15份、陈皮15份、炒白术15份、茯苓15份、枳壳15份、柴胡15份、前胡15份、炙甘草10份。
3.根据权利要求1所述的一种抗冠状病毒的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中抗病毒和抗免疫的化合物为：橙皮甙、β-谷甾醇、柚皮素以及木犀草素-7-o-葡萄糖苷。
4.根据权利要求1所述的...
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