【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药指纹图谱，尤其是涉及一种中药组合物的检测方法及其应用。
技术介绍
1、清宣止咳颗粒是一种中成药，已由苏中药业上市生产销售多年，由桑叶、薄荷、苦杏仁(炒)、桔梗、白芍、枳壳、陈皮、紫菀、甘草等九味组成的复方制剂，主要的功效是疏风清热、宣肺止咳，一般用于小儿外感风热所致的咳嗽，主要症状有咳嗽、咳痰、发热或者鼻塞、流涕、微恶风寒、咽红或者咽痛，但主要功能主治是刚才讲的疏风清热、宣肺止咳。
2、中药指纹图谱是指某种中药材或其原料药、制剂中所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。在现阶段中药的有效成分绝大多数没有十分明确的情况下，指纹图谱的建立对于有效控制中药材及其原料药、制剂的质量具有重要的意义。
3、例如，文献“宣肺止咳合剂的高效液相指纹图谱”公开了利用高效液相色谱建立宣肺止咳合剂指纹图谱的方法，包括如下步骤：供试品溶液：精密量取宣肺止 咳合剂5ml，置25ml量瓶中，加50％甲醇适量，摇匀，超声30min，放凉，加50％甲醇至刻度，经0.45μm微孔滤膜过滤，即得。建立宣肺止咳合剂的高效液相指纹图谱，为宣肺止咳合剂的质量控制和评价提供依据。方法：采用agilent，zorbax sb-c18（4.6×250mm，5μm）色谱柱，在254nm检测波长下以乙腈-0.1％甲酸水为流动相梯度洗脱，流速：1.0ml/min。进样量：5μl；柱温：30℃。
4、在建立指纹图谱时，由于针对的药物不同，即具体的有效成分组成、含量均不同，因此，色谱条件、质谱条件等无法通用，且应用在
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的是提供一种中药组合物的检测方法及指纹图谱建立方法，完善该中药组合物的药品质量控制标准研究。
2、为实现上述专利技术目的，本专利技术技术方案如下：
3、一方面，本专利技术提供一种中药组合物的检测方法，其特征在于，使用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱的条件为：
4、色谱柱：反相硅胶键合相色谱柱，
5、流动相：a相，含酸水溶液；b相，有机溶剂；
6、所述中药组合物由中药材原料制备得到，所述中药材原料包括薄荷、枳壳、陈皮、白芍、桑叶、苦杏仁、桔梗、紫菀和甘草中的任意一种或多种混合物，优选地，所述中药材原料包括枳壳和白芍，更优选包括薄荷、枳壳、陈皮、白芍、桑叶、苦杏仁、桔梗、紫菀和甘草。
7、优选地，所述反相硅胶键合相色谱柱为c18或c8色谱柱，优选c18色谱柱，更优选为zorbax sb-c18色谱柱或wondasil c18色谱柱，进一步优选为agilent，zorbax sb-c18色谱柱或岛津wondasil c18色谱柱。
8、优选地，所述流动相中，酸为磷酸、盐酸、硫酸、柠檬酸中的至少一种，进一步优选为磷酸；有机溶剂为乙腈、乙醇、甲醇、丙醇、正丁醇、异丁醇、四氢呋喃、dmf中的至少一种，进一步优选为乙腈。
9、更进一步优选地，所述流动相为：a相，0.05-0.15%磷酸-水；b相，乙腈；进一步优选为：a相，0.08-0.12%磷酸-水；b相，乙腈；进一步优选为a相，0.1%磷酸-水；b相，乙腈。
10、优选地，所述高效液相色谱的流速为0.4-1.0ml/min，进一步优选地，所述流速为0.6-1.0ml/min，进一步优选为1.0ml/min。
11、优选地，所述高效液相色谱的进样量：10-20μl，进一步优选地，所述进样量为20μl。
12、优选地，所述高效液相色谱的柱温为25-40℃，进一步优选地，所述柱温为25-35℃，进一步优选为35℃。
13、优选地，所述高效液相色谱的检测波长：190-280nm，进一步优选地，所述检测波长为220nm。
14、优选地，所述高效液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱；进一步优选地，所述梯度洗脱条件为：
15、表1.
16、
17、更进一步优选为：
18、表2.
19、
20、 。
21、作为本专利技术的一个优选实施例，所述色谱条件如下：
22、色谱柱：agilent，zorbax sb-c18；
23、流动相：a相，0.1%磷酸-水；b相，乙腈；
24、流速：1.0ml/min，
25、进样量：20μl，
26、柱温：35℃，
27、检测波长：220nm，
28、梯度洗脱：
29、表3.
30、
31、 。
32、优选地，包括将所述中药组合物制成供试品溶液进行检测；优选地，所述供试品溶液的制备方法包括：取所述药品的供试品，加溶剂提取，固液分离，所得液体即为供试品溶液；进一步优选地，所述供试品溶液的制备方法还满足如下条件中的任意一项或多项：
33、a.溶剂为醇类水溶液或醇类溶剂；优选地，所述醇类为c1~c6醇，优选为甲醇、乙醇、丙醇和丁醇中的任意一种或几种组合，进一步优选为甲醇；优选地，所述醇类水溶液中醇类溶剂的体积比例为1%~90%，优选为2%~60%，进一步优选为5%~40%；
34、b.以g/ml计，供试品与溶剂的比例为1:30~100，优选为1:40~80，进一步优选为50~80；
35、c.提取方法包括超声提取或加热回流提取；优选地，在采用超声提取的时候，所述提取的温度为15~40℃；
36、d.提取时间为15min以上，优选为15min~2h，进一步优选为30~60min；
37、e.所述固液分离的方式为离心和/或过滤；优选地，所述离心的条件为：10000-15000r/min在15-25°c下离心5-30min；进一步优选地，所述过滤为过0.4-0.5μm滤膜。
38、所述中药组合物为薄荷提取物、枳壳提取物、陈皮提取物、白芍提取物、桑叶提取物、苦杏仁提取物、桔梗提取物、紫菀提取物和甘草提取物的混合物；进一步地，所述中药组合物由包含如下重量份的中药材原料制备得到：包括薄荷60-120份、枳壳60-120份、陈皮100-150份、白芍100-150份、桑叶150-220份、苦杏仁50-150份、桔梗80-160份、紫菀80-160份和甘草60-120份；最优选地，所述中药组合物的原料按照重量份，包括薄荷90份、枳壳90份、陈皮120份、白芍120份、桑叶180份、苦杏仁90份、桔梗120份、紫菀120份和甘草90份；进一步地，所述中药本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种中药组合物的检测方法，其特征在于，使用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱的条件为：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反相硅胶键合相色谱柱为C18或C8色谱柱，优选C18色谱柱，更优选为ZORBAX SB-C18色谱柱或WondaSil C18色谱柱，进一步优选为Agilent，ZORBAX SB-C18色谱柱或岛津WondaSil C18色谱柱。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相中，酸为磷酸、盐酸、硫酸、柠檬酸中的至少一种，进一步优选为磷酸；有机溶剂为乙腈、乙醇、甲醇、丙醇、正丁醇、异丁醇、四氢呋喃、DMF中的至少一种，进一步优选为乙腈；更进一步优选地，所述流动相为：A相，0.05-0.15%磷酸-水；B相，乙腈；进一步优选为：A相，0.08-0.12%磷酸-水；B相，乙腈；进一步优选为A相，0.1%磷酸-水；B相，乙腈；
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱；优选地，所述梯度洗脱条件为：
5.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括将所述中药组合物制成供试品溶液进行检测；优选地，所述供试品溶液的制备方法包括：取所述药品的供试品，加溶剂提取，固液分离，所得液体即为供试品溶液；进一步优选地，所述供试品溶液的制备方法还满足如下条件中的任意一项或多项：
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述中药组合物为薄荷提取物、枳壳提取物、陈皮提取物、白芍提取物、桑叶提取物、苦杏仁提取物、桔梗提取物、紫菀提取物和甘草提取物的混合物；进一步地，所述中药组合物由包含如下重量份的中药材原料制备得到：包括薄荷60-120份、枳壳60-120份、陈皮100-150份、白芍100-150份、桑叶150-220份、苦杏仁50-150份、桔梗80-160份、紫菀80-160份和甘草60-120份；最优选地，所述中药组合物的原料按照重量份，包括薄荷90份、枳壳90份、陈皮120份、白芍120份、桑叶180份、苦杏仁90份、桔梗120份、紫菀120份和甘草90份；进一步地，所述中药组合物含有药学上可接受的辅料；更进一步地，所述中药组合物为清宣止咳颗粒或其中间产品；进一步地，所述检测方法为用于所述中药组合物中的没食子酸、芍药苷、柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的检测。
8.一种中药组合物的特征图谱的建立方法，其特征在于，包括权利要求1-7任一项所述检测方法的步骤。
9.根据权利要求8所述的建立方法，其特征在于，特征图谱包括6个共有峰，分别为：2-没食子酸；14-芍药苷；18-柚皮芸香苷；19-柚皮苷；20-橙皮苷；21-新橙皮苷；进一步地，以没食子酸对应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应该在规定值的±5％之内，相对保留时间的规定值为：1.00（S）、4.38、5.93、6.25、6.51、6.83；进一步地，包括23个特征峰。
10.权利要求1-7任一项所述检测方法，或者权利要求8或9所述建立方法在清宣止咳颗粒及其中间产品的质量控制中的应用；
...【技术特征摘要】
1.一种中药组合物的检测方法，其特征在于，使用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱的条件为：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反相硅胶键合相色谱柱为c18或c8色谱柱，优选c18色谱柱，更优选为zorbax sb-c18色谱柱或wondasil c18色谱柱，进一步优选为agilent，zorbax sb-c18色谱柱或岛津wondasil c18色谱柱。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相中，酸为磷酸、盐酸、硫酸、柠檬酸中的至少一种，进一步优选为磷酸；有机溶剂为乙腈、乙醇、甲醇、丙醇、正丁醇、异丁醇、四氢呋喃、dmf中的至少一种，进一步优选为乙腈；更进一步优选地，所述流动相为：a相，0.05-0.15%磷酸-水；b相，乙腈；进一步优选为：a相，0.08-0.12%磷酸-水；b相，乙腈；进一步优选为a相，0.1%磷酸-水；b相，乙腈；
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱；优选地，所述梯度洗脱条件为：
5.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征在于，所述色谱条件如下：
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括将所述中药组合物制成供试品溶液进行检测；优选地，所述供试品溶液的制备方法包括：取所述药品的供试品，加溶剂提取，固液分离，所得液体即为供试品溶液；进一步优选地，所述供试品溶液的制备方法还满足如下条件中的任意一项或多项：
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述中药组合物为薄荷提取物、...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐海涛，汪斌，陈贵州，邹佳，陈佳敏，王殿广，孙健，
申请(专利权)人：苏中药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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