【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体领域；更具体而言，本专利技术涉及一种pb转座酶单克隆抗体及其检测试剂盒。
技术介绍
1、pb转座酶来源于piggybac dna转座子基因，最初发现于粉纹夜蛾（trichoplusiani）基因组中。piggybac转座子是一种"切割-粘贴"型dna转座子，他能够通过一种"无痕转座"的方式切割dna并将其插入到基因组新的位点。
2、pb转座酶是实现这种移动过程的关键酶。它识别piggybac转座子的末端重复序列（terminal repeat element, tre），并催化转座子dna的剪切和整合过程。pb转座酶具有携带较大的dna转基因片段移动且不留下转座印迹的特征，是一种在细胞和基因治疗中被广泛应用的转基因工具。
3、在细胞和基因治疗过程中，研究者通常会将pb转座子和pb转座酶分开导入细胞，通过转座酶的活性在基因组中引入或移除特定的基因片段。其中pb转座酶通常由dna质粒形式或mrna形式的核酸表达。细胞治疗和基因治疗一般要求这些转座酶在行驶其转基因功能后能够尽快和/或完全的降解，从而最大限度的提高基因疗法的安全性。鉴于上述原因，监控治疗周期内这些转座酶蛋白的表达和残留是一项重要的分析指标。
4、已知转座酶蛋白是一种富含正电荷氨基酸的蛋白，表达具有功能性的天然全长蛋白在业内是一个重要的挑战，这导致基于天然结构pb蛋白的单克隆抗体也难以得到。对具有生物酶活性的天然结构pb蛋白具有高特异性的抗体，是实现细胞内或体内转座酶极低限度残留检测的前体条件，本专利技术在一系列鼠单克
技术实现思路
1、基于上述现有技术中存在的问题，本申请提供了pb转座酶的单克隆抗体，包含该抗体的一种基于elisa方法研制的检测试剂盒，并利用该试剂盒成功完成了pb转座酶的定量检测。
2、本专利技术第一方面提供一种pb转座酶结合分子，其为靶向pb转座酶的抗体或其抗原结合片段，或与所述抗体或其抗原结合片段具有至少85%序列相同性并保留其pb转座酶结合活性的变体。
3、在一些实施方案中，所述抗体含有选自以下的任一组cdr：
4、（a1）seq id no:1所示的hcdr1、seq id no:2所示的hcdr2、seq id no:3所示的hcdr3和seq id no:5所示的lcdr1、seq id no:6所示的lcdr2、seq id no:7所示的lcdr3；
5、（a2）seq id no:9所示的hcdr1、seq id no:10所示的hcdr2、seq id no:11所示的hcdr3和seq id no:13所示的lcdr1、seq id no:14所示的lcdr2、seq id no:15所示的lcdr3。
6、在一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区包含鼠源或人源轻链fr区。在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区包含鼠源或人源重链fr区。
7、在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的fr1、fr2、fr3和fr4各自分别独立选自seq id no:4或12所示的重链可变区的fr1、fr2、fr3和fr4，和/或，所述抗体的轻链可变区的fr1、fr2、fr3和fr4各自分别独立选自seq id no: 8或16所示的轻链可变区的fr1、fr2、fr3和fr4。
8、在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区具有seq id no:4所示的序列或与其具有至少85%序列相同性的序列，和/或，所述抗体的轻链可变区具有seq id no:8所示的序列或与其具有至少85%序列相同性的序列。
9、在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区具有seq id no:12所示的序列或与其具有至少85%序列相同性的序列，和/或，所述抗体的轻链可变区具有seq id no:16所示的序列或与其具有至少85%序列相同性的序列。
10、在一些实施方案中，所述抗体还包含重链恒定区和/或轻链恒定区。
11、在一些实施方案中，所述抗体还包括鼠igg fc段、兔igg fc段或人igg fc段。
12、在一些实施方案中，所述抗体的重链包含人源igg1、igg2、igg3或igg4的重链恒定区或与其具有至少85%序列相同性的序列。或者或此外，所述抗体的轻链包含人源κ链、λ链的轻链恒定区或与其具有至少85%序列相同性的序列。
13、在一些实施方案中，所述抗体的重链包含人源igg1的重链恒定区或与其具有至少85%序列相同性的序列，轻链包含人源κ链的轻链恒定区或与其具有至少85%序列相同性的序列。
14、在一些实施方案中，所述抗体是单克隆抗体。
15、在一些实施方案中，所述抗体是嵌合抗体或鼠源抗体。
16、本专利技术还提供多核苷酸，选自：
17、（1）本文任一实施方案所述pb转座酶结合分子的编码序列；
18、（2）（1）的互补序列。
19、本专利技术还提供一种核酸构建物，其包含本文任一实施方案所述的多核苷酸。
20、在一些实施方案中，所述核酸构建物是载体，例如整合载体、克隆载体或表达载体。
21、本专利技术还提供一种宿主细胞，其：
22、（1）表达和/或分泌本文任一实施方案所述pb转座酶结合分子；
23、（2）包含本文所述的多核苷酸；和/或
24、（3）包含本文所述的核酸构建物。
25、在一些实施方案中，所述宿主细胞选自原核细胞或真核细胞。
26、在一些实施方案中，所述宿主细胞是哺乳动物细胞。
27、本专利技术还提供一种产生pb转座酶结合分子的方法，包括：在适合产生pb转座酶结合分子的条件下培养本文所述的宿主细胞，和任选的从培养物中纯化所述pb转座酶结合分子。
28、本专利技术第二方面提供一种pb转座酶结合分子对，其中，第一pb转座酶结合分子包含如下cdr：seq id no:1所示的hcdr1、seq id no:2所示的hcdr2、seq id no:3所示的hcdr3和seq id no:5所示的lcdr1、seq id no:6所示的lcdr2、seq id no:7所示的lcdr3；
29、第二pb转座酶结合分子包含如下cdr：seq id no:9所示的hcdr1、seq id no:10所示的hcdr2、seq id no:11所示的hcdr3和seq id no:13所示的lcdr1、seq id no:14所示的lcdr2、seq id no:15所示的lcdr3。
30、在一些实施方案中，第一pb转座酶结合分子包含：seq id no:4所示的重链可变区和seq id no:8所示的轻链可变区；第二pb转座酶结合分子包含：seq id no:12所示的重链可变区和seq id no:16所示的轻链本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种PB转座酶结合分子，包含靶向PB转座酶的抗体或其抗原结合片段，所述抗体含有选自以下的任一组CDR：
2.如权利要求1所述的PB转座酶结合分子，其特征在于，
3.如权利要求1所述的PB转座酶结合分子，其特征在于，所述PB转座酶结合分子还包括鼠IgG Fc段、兔IgG Fc段或人IgG Fc段。
4. 一种PB转座酶结合分子对，其特征在于，第一PB转座酶结合分子包含如下CDR：SEQID NO:1所示的HCDR1、SEQ ID NO:2所示的HCDR2、SEQ ID NO:3所示的HCDR3和SEQ ID NO:5所示的LCDR1、SEQ ID NO:6所示的LCDR2、SEQ ID NO:7所示的LCDR3；
5.如权利要求4所述的PB转座酶结合分子对，其特征在于，第一PB转座酶结合分子包含：SEQ ID NO:4所示的重链可变区和SEQ ID NO:8所示的轻链可变区；第二PB转座酶结合分子包含：SEQ ID NO:12所示的重链可变区和SEQ ID NO:16所示的轻链可变区。
6.如权利要求4所述的PB转座酶
7.一种检测PB转座酶的试剂盒，包含权利要求1-3任一项所述的PB转座酶结合分子或权利要求4-6中任一项所述的PB转座酶结合分子对，
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述PB转座酶结合分子用于夹心法检测，所述试剂盒包含所述PB转座酶结合分子对，所述第一PB转座酶结合分子与支持物偶联，所述第二PB转座酶结合分子包含标记物。
9.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括包被有第一PB转座酶结合分子的反应板、生物素标记的第二PB转座酶结合分子、亲和素标记的催化酶以及底物。
10.一种检测样品中PB转座酶存在情况的非诊断性方法，所述方法包括：以权利要求1-3中任一项所述PB转座酶结合分子或权利要求4-6中任一项所述PB转座酶结合分子对与样品孵育，和检测PB转座酶与PB转座酶结合分子或PB转座酶结合分子对的结合，从而确定样品中PB转座酶存在情况。
...【技术特征摘要】
1.一种pb转座酶结合分子，包含靶向pb转座酶的抗体或其抗原结合片段，所述抗体含有选自以下的任一组cdr：
2.如权利要求1所述的pb转座酶结合分子，其特征在于，
3.如权利要求1所述的pb转座酶结合分子，其特征在于，所述pb转座酶结合分子还包括鼠igg fc段、兔igg fc段或人igg fc段。
4. 一种pb转座酶结合分子对，其特征在于，第一pb转座酶结合分子包含如下cdr：seqid no:1所示的hcdr1、seq id no:2所示的hcdr2、seq id no:3所示的hcdr3和seq id no:5所示的lcdr1、seq id no:6所示的lcdr2、seq id no:7所示的lcdr3；
5.如权利要求4所述的pb转座酶结合分子对，其特征在于，第一pb转座酶结合分子包含：seq id no:4所示的重链可变区和seq id no:8所示的轻链可变区；第二pb转座酶结合分子包含：seq id no:12所示的重链可变区和seq id no:16所示的轻链可变区。
6.如权利要求4所述的pb转座酶结合分子对，其特征在于，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：张平静，张玲玲，彭祥然，高海霞，刘韬，孙艳，钱其军，
申请(专利权)人：北京细胞治疗集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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