【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种将外源物质从真核细胞的外部导入（转送）到该细胞内部的方法，以及该方法所使用的载体肽片段。需要说明的是，本申请主张基于2022年6月22日提交的日本专利申请第2022-100033号的优先权，该申请的全部内容作为本说明书中的参照导入。
技术介绍
1、一直以来，通过向人类和其它哺乳动物等的细胞（真核细胞）内导入多肽等外源物质，特别是生理活性物质，使该细胞（以及由该细胞组成的组织和器官等）发生生物转化或改善和提高该细胞的功能。
2、例如，专利文献1就揭示了一种具有被称为核仁定位信号（nucleolarlocalization signal：以下简称为“nols”）的氨基酸序列组成的载体肽片段和外源物质的外源物质导入用构建体。由于这类构建体具有细胞膜渗透性，因此能够将该外源物质有效导入目标细胞。
3、现有技术文献
4、专利文献
5、专利文献1：国际公开第2011/013699号公报
技术实现思路
1、另外，近年来，从医疗等角度，需要开发一种能够将目标外源物质导入至细胞质内的新型载体肽片段。载体肽片段的细胞膜渗透性会随着要导入该载体肽片段的细胞类型而在效率上发生波动。因此，利用新型载体肽片段的开发，将能够扩大医疗的范围。
2、因此，本专利技术是响应该需求而创造出的专利技术，其目的在于提供一种用于将目标外源物质从真核细胞外部至少导入至该细胞的细胞质内的具有细胞膜渗透性的载体肽片段。此外，本专利技术的另一目的在于提供一
3、本专利技术人深入研究后，结果发现了一种表现出细胞膜渗透性的具有13个氨基酸残基的新型氨基酸序列。即，根据本专利技术，提供一种由氨基酸序列rkkrnskrltrkk构成的载体肽片段。本专利技术所述的载体肽片段可以用于将目标外源物质从真核细胞外部至少导入至该细胞的细胞质内。
4、其中，“外源物质”是指包含能够直接或者通过适当的连接子间接与上述载体肽片段的n端侧或c端侧结合的无机化合物和有机化合物，并具有能够导入真核细胞内的分子大小和化学性质的物质。
5、此外，在本专利技术所述的载体肽片段的一个实施方式中，含有d-精氨酸残基作为上述氨基酸序列的精氨酸残基。根据本专利技术人的研究，该组成的载体肽片段具有更优的细胞膜渗透性。
6、此外，在本专利技术所述的载体肽片段的一个实施方式中，含有d-赖氨酸残基作为上述氨基酸序列的赖氨酸残基。根据本专利技术人的研究，该组成的载体肽片段具有更优的细胞膜渗透性。
7、此外，根据本专利技术，还提供了一种能够实现上述目的，能够将目标外源物质从真核细胞（特别是没有细胞壁的人或人以外哺乳动物为代表的各种动物细胞）的外部（即细胞膜的外侧）至少导入至该细胞的细胞质内（优选为细胞核内更深处）而人工制造的外源物质导入用构建体。即，本专利技术所述的构建体具有本专利技术所述的载体肽片段和与该载体肽片段的n端侧和/或c端侧结合的上述目标外源物质。由于该构建体具有细胞膜渗透性，因此能够将目标外源物质高效导入目标真核细胞。
8、在本专利技术所述构建体的一个实施方式中，上述外源物质可以是选自多肽、核酸、色素和药物中的至少一种有机化合物。
9、其中，“多肽”是指具有多个氨基酸通过肽键结合的结构的聚合物。多肽不由肽键数量（即氨基酸残基数量）限定。即，多肽包括氨基酸残基数10以上、少于300的程度的通常被称为肽的化合物，以及通常被称为蛋白质（通常由300个以上的氨基酸残基组成的高分子化合物）的化合物。在该
中，并不严格区分多肽和蛋白质。在本说明书中，多个氨基酸残基形成的聚合物（包括低聚物）统称为多肽。
10、另外，“核酸”是指核苷酸的聚合物，包括dna和rna。“核酸”并不受限于碱基数量。
11、此外，在本专利技术所述构建体的一个实施方式中，上述外源物质可以配置在上述载体肽片段的c端侧。
12、此外，根据本专利技术，提供了一种能够实现上述目的，将目标外源物质从真核细胞外部至少导入至该细胞的细胞质内的方法。本专利技术所述的方法包括（1）准备外源物质导入用构建体的工序，该构建体具有本专利技术所述载体肽片段和与上述载体肽片段的n端侧和/或c端侧结合的上述目标外源物质；和（2）将上述构建体供给到含有目标真核细胞的样品中的工序。
13、此外，在本专利技术所述方法的一个实施方式中，上述外源物质可以是选自多肽、核酸、色素和药物中的至少一种有机化合物。
14、此外，在本专利技术所述方法的一个实施方式中，上述外源物质可以配置在上述载体肽片段的c端侧。
15、另外，在本专利技术所述方法的一个实施方式中，作为上述外源物质导入用构建体的导入对象的真核细胞可以是人或人以外哺乳动物的细胞。
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1.一种载体肽片段，其特征在于，
2.如权利要求1所述的载体肽片段，其特征在于，
3.如权利要求1所述的载体肽片段，其特征在于，
4.一种构建体，其特征在于，
5.如权利要求4所述的构建体，其特征在于，
6.如权利要求4所述的构建体，其特征在于，
7. 一种在体外环境下将目标外源物质从真核细胞外部至少导入至所述真核细胞的细胞质内的方法，其特征在于包含：
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，
10.如权利要求7所述的方法，其特征在于，
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种载体肽片段，其特征在于，
2.如权利要求1所述的载体肽片段，其特征在于，
3.如权利要求1所述的载体肽片段，其特征在于，
4.一种构建体，其特征在于，
5.如权利要求4所述的构建体，其特征在于，
6.如权利要求4所述的构建体，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：贝利小林菜穗子，吉田彻彦，
申请(专利权)人：东亚合成株式会社，
类型：发明
国别省市：
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