【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药质量分析检测，尤其涉及一种两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法及应用。
技术介绍
1、两头尖为毛茛科植物多被银莲花anemone raddeana regel的干燥根茎。夏季采挖，除去须根，洗净，干燥。两头尖，又名复活节花、风花、银莲花和竹节香附，其性辛，热；有毒，归脾经，取其根茎入药，具有祛风湿，消痈肿的功效。用于治疗风寒湿痹，四肢拘挛，骨节疼痛，痈肿溃烂等症。两头尖作为中药，始载于明代刘文泰所著的《本草品汇精要》，据记载：“两头尖，乃附子之类，苗叶亦相似，其根似草乌，皮黑肉白，细而两端皆锐，故以名”。两头尖多野生于海拔800m左右的山地林中或草地阴处，主要分布于东北三省，此外山东、河北等地区也有分布。目前已有的两头尖指纹/特征图谱研究，色谱峰整体分离效果较差，峰信息较少，不能全面反映两头尖的内在质量，如张彦飞等采用hplc法，建立两头尖药材hplc指纹图谱，该指纹图谱共标识出11个共有峰，均未进行明确指认，且各特征峰的分离效果较差。闫攀凤等采用hplc测定两头尖单糖的图谱，该图谱共有7个共有峰，但该指纹图谱整体分离效果欠佳，且不具有专属性。
2、另外，关于两头尖质量标准的研究并不多，2020年版《中国药典》两头尖药材和饮片的质量标准项下仅有性状、显微鉴别、薄层鉴别和含量测定指标，缺乏专属性特征图谱，质量标准仍不完善。而且，两头尖标准汤剂是由两头尖饮片经水提取、浓缩、干燥等工序而成，与药材饮片相比，失去了固有的形态，在质量标准上缺少性状、鉴别等重要指标，而目前没有建立有效的两头尖标准汤剂质量标准，无
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，该方法重现性良好，准确可靠，可为两头尖标准汤剂大生产质量控制提供数据基础，保证两头尖标准汤剂产品质量的稳定性和可控性。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，包括以下步骤：制备参照物溶液，所述参照物溶液包括对照药材参照物溶液和对照品参照物溶液，所述对照品参照物溶液中包括菊苣酸对照品、竹节香附素a对照品和咖啡酸对照品；
3、取两头尖标准汤剂制得供试品溶液；
4、取预设量的参照物溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，以磷酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，建立特征图谱。
5、在一种实施方式中，所述梯度洗脱按下述程序进行：
6、0～10min，流动相a从5％→17％，流动相b从95％→83％；
7、10min～23min，流动相a从17％→29％，流动相b从83％→71％；
8、23min～28min，流动相a保持为29％，流动相b保持为71％；
9、28min～33min，流动相a从29％→45％，流动相b从71％→55％；
10、33min～45min，流动相a从45％→80％，流动相b从55％→20％。
11、在一种实施方式中，所述磷酸溶液的体积浓度为0.15％～0.25％。
12、在一种实施方式中，所述参照物溶液和供试品溶液的预设量为0.5μl～1.5μl；
13、所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为100mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm，柱温为38℃～42℃；
14、所述进行梯度洗脱时，流动相的流速为0.28～0.32ml/min；
15、所述液相色谱仪的紫外检测波长为200nm～210nm。
16、在一种实施方式中，所述供试品溶液采用下述方法制得：
17、取两头尖标准汤剂，研细，称取0.49g～0.51g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入65％～75％甲醇20ml～30ml，加热回流15min～45min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml～21ml溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次～5次，每次25ml～26ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
18、在一种实施方式中，所述对照品参照物溶液按照下述方法制得：
19、取菊苣酸对照品、竹节香附素a对照品、咖啡酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含菊苣酸41.4238μg、竹节香附素a17.4902μg、咖啡酸15.0148μg的的混合溶液，作为所述对照品参照物溶液。
20、在一种实施方式中，所述对照药材参照物溶液采用下述方法制得：
21、取两头尖药材0.8g～1.2g，加水20ml～30ml，加热回流15min～45min，离心，取上清液，蒸干，残渣加65％～75％甲醇20ml～30ml，加热回流15min～45min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml～21ml溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次～5次，每次25ml～26ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得对照药材参照物溶液。
22、在一种实施方式中，所述特征图谱包括9个共有峰，其中，与咖啡酸对应的为1号峰，与菊苣酸对应的为2号峰，与竹节香附素a对应的为9号峰。
23、在一种实施方式中，所述两头尖标准汤剂的特征图谱中，以菊苣酸色谱峰为参照峰s1，3号峰、4号峰与参照峰s1的相对保留时间符合：3号峰1.24、4号峰1.59，各特征峰相对保留时间的rsd值＜3％；
24、以竹节香附素a色谱峰为参照峰s2，5号峰、6号峰、7号峰、8号峰与参照峰s2的相对保留时间符合：5号峰0.72、6号峰0.75、7号峰0.85、8号峰0.91，各特征峰相对保留时间的rsd值＜3％。
25、相应地，本专利技术还提供了一种两头尖标准汤剂的特征图谱，所述两头尖标准汤剂的特征图谱采用上述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法获得。
26、以及，所述两头尖标准汤剂的特征图谱在(1)～(5)任一项中的应用：
27、(1)两头尖标准汤剂的真伪鉴别和成分检测；
28、(2)两头尖药材的真伪鉴别和成分检测；
29、(3)两头尖标准汤剂和东北九节菖蒲标准汤剂的区分；
30、(4)两头尖标准汤剂和九节菖蒲标准汤剂的区分；
31、(5)两头尖标准汤剂和香附标准汤剂的区分。
32、实施本专利技术，具有如下有益效果：
33、本专利技术通过所述特征图谱的构建方法，首次建立了两头尖标准汤剂的特征图谱，该特征图谱可充分展示两头尖标准汤剂的化学成分特征，特征峰信息量丰富，可全面地反映两头尖标准汤剂的质量信息，从而能够达到全面、有效地控制两头尖标准汤剂质量的目的。并且能够实现对两头尖药材的真伪鉴别和成分检测，以及两头尖标准汤剂和东北九节菖蒲标准汤剂、九节菖蒲标准汤剂或香附标准汤剂的鉴别区分，为两头尖药材本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱按下述程序进行：
3.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述磷酸溶液的体积浓度为0.15％～0.25％。
4.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述参照物溶液和供试品溶液的预设量为0.5μL～1.5μL；
5.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液采用下述方法制得：
6.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述对照品参照物溶液按照下述方法制得：
7.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述对照药材参照物溶液采用下述方法制得：
8.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述特征图谱包括9个共有峰，其中，与咖啡酸对应的为1号峰，与菊苣酸对应的为2号峰，与竹节香
9.如权利要求8所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述两头尖标准汤剂的特征图谱中，以菊苣酸色谱峰为参照峰S1，3号峰、4号峰与参照峰S1的相对保留时间符合：3号峰1.24、4号峰1.59，各特征峰相对保留时间的RSD值＜3％；
10.如权利要求1～9任一项所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法得到的两头尖标准汤剂的特征图谱在(1)～(5)任一项中的应用：
...【技术特征摘要】
1.一种两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱按下述程序进行：
3.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述磷酸溶液的体积浓度为0.15％～0.25％。
4.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述参照物溶液和供试品溶液的预设量为0.5μl～1.5μl；
5.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液采用下述方法制得：
6.如权利要求1所述的两头尖标准汤剂的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述对照品参照物溶液按照下述方法制得：
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【专利技术属性】
技术研发人员：冯涌微，刘晓霞，李振雨，位翠杰，张芳平，段志文，谢文凯，何民友，卢晓莹，杨小龙，陈向东，孙冬梅，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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