【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别是涉及一种帕金森病的诊断标志物及其应用和杂聚体检测方法。
技术介绍
1、许多神经退行性疾病都有一类病理特征，即脑组织出现一些特定蛋白的聚集物，这些特定蛋白常被归纳为amyloidogenic protein，即一类易聚集的蛋白。一般认为每一种疾病各自有一种易聚集蛋白参与，但近来人们注意到不同的易聚集蛋白之间可能会相互聚集来共同形成聚集体。这种杂合的聚集现象被认为有着此前未曾注意到的病理作用，而对蛋白杂合聚集体(co-aggregate，以下简称杂聚体)进行检测也具有重要的诊断意义。
2、长期以来，α-突触核蛋白(α-synuclein，α-syn，as)的蛋白聚集体被视为是帕金森病的重要生物标志物，但目前其诊断价值有限，亟需开发新的生物标志物，以提升对帕金森病的诊断准确率。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种帕金森病的诊断标志物及其应用和杂聚体检测方法，以解决上述现有技术存在的问题。本专利技术提供的诊断标志物可以有效提高对帕金森病的诊断效能。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术提供一种帕金森病的诊断标志物，所述诊断标志物为脑源外泌体中的蛋白杂合聚集体，所述蛋白杂合聚集体包括α-突触核蛋白和胰淀素。
4、本专利技术还提供检测上述的诊断标志物的试剂在制备帕金森病的诊断产品中的应用。
5、进一步地，所述诊断产品为试剂盒。
6、本专利技术还提供一种帕金森病的
7、进一步地，所述诊断产品为试剂盒。
8、进一步地，包括α-突触核蛋白抗体和胰淀素抗体。
9、进一步地，所述α-突触核蛋白抗体为sc-12767抗体；所述胰淀素抗体为sc-377530抗体。
10、进一步地，所述sc-12767抗体使用藻红蛋白标记；所述sc-377530抗体使用藻蓝蛋白标记。
11、本专利技术还提供一种蛋白杂合聚集体的检测方法，所述蛋白杂合聚集体包括第一蛋白和第二蛋白；
12、所述检测方法包括以下步骤：
13、将第二抗体加入待检测生物样本中，进行第一次孵育，再加入第一抗体，进行第二次孵育，之后进行显微成像，通过图像识别系统读出在两个荧光通道上相互重叠的荧光光斑的数量，将所述荧光光斑的数量分别代入所述第一蛋白和所述第二蛋白的标准曲线，计算得出所述第一蛋白和所述第二蛋白在所述检测生物样本中的含量；
14、所述第一蛋白的标准曲线是采用不同浓度的所述第一蛋白构建得到；
15、所述第二蛋白的标准曲线是采用不同浓度的所述第二蛋白构建得到；
16、所述第一抗体是特异性识别所述第一蛋白的抗体；
17、所述第二抗体是特异性识别所述第二蛋白的抗体；
18、所述第一抗体和所述第二抗体标记不同的荧光标记。
19、进一步地，所述第一抗体和所述第二抗体分别标记藻红蛋白和藻蓝蛋白。
20、本专利技术公开了以下技术效果：
21、本专利技术研究发现帕金森病诊断中重要的生物标志物蛋白聚集体，并非是一种单纯由α-synuclein(as)蛋白聚合而成的聚集体，而是掺杂有另一种易聚集蛋白——胰淀素(amylin)。采用as和amylin构成的杂聚体作为生物标志物，可以有效提高对帕金森病的诊断效能。
22、本专利技术开发了一种蛋白杂聚体的检测方法，可以保证高灵敏度和高特异性地检测杂合蛋白聚集体，同时，又兼有成本合理和快速检测的优势。本专利技术采用两种可靠的抗体进行识别，利用免疫夹心的原理加强选择性，利用两种抗体上分别标记的不同荧光团各自产生荧光点信号，再通过图像识别算法读出并计算其中共定位(重叠)的位点，来确认这一分子确为杂聚体。本专利技术通过使用最强的荧光蛋白实现信号放大，引入更灵敏的荧光显微镜，能有更微量的检测限。本专利技术通过一次检测，同时可以获知其中两种组分各自的量，由此获知杂聚体的杂合情况，而不是仅能检查其中一种组分。本专利技术的检测方法采用简单可靠的操作条件，本质上它属于夹心的荧光免疫沉淀方法，与常见的elisa方法操作上几乎没有区别，只是需要荧光显微镜代替酶标仪来读出。
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1.一种帕金森病的诊断标志物，其特征在于，所述诊断标志物为脑源外泌体中的蛋白杂合聚集体，所述蛋白杂合聚集体包括α-突触核蛋白和胰淀素。
2.检测权利要求1所述的诊断标志物的试剂在制备帕金森病的诊断产品中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述诊断产品为试剂盒。
4.一种帕金森病的诊断产品，其特征在于，包括检测权利要求1所述的诊断标志物的试剂。
5.根据权利要求4所述的诊断产品，其特征在于，所述诊断产品为试剂盒。
6.根据权利要求4所述的诊断产品，其特征在于，包括α-突触核蛋白抗体和胰淀素抗体。
7.根据权利要求6所述的诊断产品，其特征在于，所述α-突触核蛋白抗体为sc-12767抗体；所述胰淀素抗体为sc-377530抗体。
8.根据权利要求7所述的诊断产品，其特征在于，所述sc-12767抗体使用藻红蛋白标记；所述sc-377530抗体使用藻蓝蛋白标记。
9.一种蛋白杂合聚集体的检测方法，其特征在于，所述蛋白杂合聚集体包括第一蛋白和第二蛋白；
10.根据权
...【技术特征摘要】
1.一种帕金森病的诊断标志物，其特征在于，所述诊断标志物为脑源外泌体中的蛋白杂合聚集体，所述蛋白杂合聚集体包括α-突触核蛋白和胰淀素。
2.检测权利要求1所述的诊断标志物的试剂在制备帕金森病的诊断产品中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述诊断产品为试剂盒。
4.一种帕金森病的诊断产品，其特征在于，包括检测权利要求1所述的诊断标志物的试剂。
5.根据权利要求4所述的诊断产品，其特征在于，所述诊断产品为试剂盒。
6.根据权利要求4所述的诊断产品，其特征在于，包括...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋成，周余航，杜洋，李晨钟，杨一杰，
申请(专利权)人：香港中文大学深圳，
类型：发明
国别省市：
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