【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物制药，具体涉及一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、放射治疗(rt)是癌症治疗的主要手段之一，显著提升了乳腺癌、肠癌及食管癌等多种恶性肿瘤的治疗效果，延长了患者的生存期。放射治疗主要通过电离辐射损伤肿瘤细胞的dna，从而抑制肿瘤细胞的生长。同时，放射治疗能够激活机体的抗肿瘤免疫应答，进一步杀伤肿瘤细胞。然而，放射治疗会增加肿瘤微环境中肿瘤干细胞(cscs)的比例。研究表明，cscs具有增强的dna损伤修复、活性氧(ros)清除及凋亡抵抗等能力，能够躲避放射治疗带来的直接伤害，同时通过下调主要组织相容性复合体(mhc)i类分子及上调程序性死亡配体1(pd-l1)实现免疫逃逸，从而导致多种恶性肿瘤的耐药、复发及转移。因此，增强放射治疗及免疫系统对cscs的有效杀伤对于提升恶性肿瘤的治疗效果至关重要。
2、为实现药物在高表达mmp2肿瘤部位的精准释放，中国专利cn116063389b(广州医科大学)公开了一种递送核酸药物的多肽载体，在mmp2酶可切割肽plglag的两端合成6个精氨酸残基，得到阳离子肽：6r-plglag-6r，该阳离子肽可控地负载mirna(如mir-126-3pmimics)，并在环境响应的条件下释放mirna，达到控释的目的，有效诱导癌细胞凋亡。该专利使用mmp2酶响应肽通过静电吸附结合mirnamimics，并用rbcm(红细胞膜)包裹纳米颗粒进行修饰，赋予其隐身功能，由此制备得到的remain具有最小的粒径和最大的转染效率，有利于纳米颗粒向肿瘤组织蓄
技术实现思路
1、本专利技术主要解决的技术问题是提供一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，集放疗增敏、上调mhc i、靶向pd-1/pd-l1免疫检查点功能于一体，能有效清除放疗后肿瘤组织中残余的cscs，为抑制术后肿瘤的复发及转移提供一种新的治疗策略。
2、其次，本专利技术提供一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体的制备方法。
3、再次，本专利技术提供一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体在制备抗肿瘤药物中的应用。
4、最后，本专利技术提供一种抗肿瘤药物。
5、为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：
6、一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，所述纳米载体以双功能肽、上调mhc i分子表达的疏水药物为原料经自组装得到；
7、所述双功能肽以放疗增敏肽作为疏水端、抗酶解pd-1/pd-l1阻断肽作为亲水端经可切割基团连接得到。
8、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述纳米载体的尺寸为50-300nm。
9、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述上调mhc i分子表达的疏水药物包括但不限于他泽司他、多西他赛、地西他滨等中的一种或多种。
10、具体的，他泽司他英文名为tazemetostat(简称为taz疏水药物)，分子式：c34h44n4o4，分子量：572.74，生产商：medchemexpress(mce)，产地：美国。
11、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述自组装通过疏水相互作用进行。其中，上调mhc i分子表达的疏水药物所具有的疏水特性使其被包封在纳米载体的疏水核心中。
12、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述放疗增敏肽包括但不限于smac多肽。
13、具体的，所述smac多肽的氨基酸序列为：avpiaqk(seq id no：2)。
14、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述抗酶解pd-1/pd-l1阻断肽为d构型氨基酸组成的多肽，具有极佳的抗蛋白酶活性，包括但不限于dppa-1多肽(即d1肽)、pep-39多肽(针对的靶点为pd-l1，能够阻断pd-1/pd-l1之间的相互作用)等中的一种或多种。
15、具体的，所述dppa-1多肽的氨基酸序列为：nyskptdrqyhf(seq id no：3)，以上氨基酸均为d构型。
16、具体的，所述pep-39多肽的氨基酸序列为：amsdhhwtqrdk(seq id no：4)。
17、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述可切割基团为肿瘤部位高表达的物质可作用切割的基团，包括但不限于mmp2响应的可切割基团(即能够被肿瘤组织中高表达的mmp2酶识别并切割的基团)、ph响应的可切割基团(即能够响应于肿瘤酸性微环境以实现切割的基团)、gsh响应的可切割基团(即能够与肿瘤细胞中过量的谷胱甘肽(gsh)反应以实现切割的基团)、ros响应的可切割基团(如酮缩硫醇(tk)是ros响应基团，在高水平的ros环境中酮缩硫醇的化学键发生断裂，实现药物释放)。
18、具体的，所述mmp2响应的可切割基团为mmp2酶可切割肽(也称为mmp2酶切片段)，其氨基酸序列为：plglag。
19、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述双功能肽以smac多肽作为疏水端、dppa-1多肽作为亲水端，通过mmp2酶可切割肽连接得到。
20、具体的，所述双功能肽的氨基酸序列为：avpiaqk-ll-plglag-nyskptdrqyhf(seqid no：1)，简称为smac-d1多肽。
21、一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体的制备方法，包括以下步骤：
22、将所述双功能肽、上调mhc i分子表达的疏水药物通过疏水相互作用进行自组装，得到靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体。
23、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述双功能肽、上调mhc i分子表达的疏水药物的质量比为1-5：1。
24、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述制备方法包括以下步骤：将所述双功能肽、上调mhc i分子表达的疏水药物与dmso混合均匀，之后滴加到水中进行超声处理，超声处理过程中上调mhc i分子表达的疏水药物自身所具有的疏水特性使其被包封在纳米载体的疏水核心中，静置，即得。
25、具体的，所述超声处理的条件为：温度20-30℃，超声功率450-500w，频率30-50khz，时间10-30min。
26、一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体在制备抗肿瘤药物中的应用。
27、一种抗肿瘤药物，所述抗肿瘤药物的药效成分包含靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体。
28、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述药物的药效成分还包含其他辅助抗肿瘤成分，包括但不限于rt放射治疗，放疗剂量为8-12gy。
29、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述药物本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述纳米载体以双功能肽、上调MHC I分子表达的疏水药物为原料经自组装得到；
2.根据权利要求1所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述纳米载体的尺寸为50-300nm。
3.根据权利要求1所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述上调MHCI分子表达的疏水药物包括但不限于他泽司他、多西他赛、地西他滨中的一种或多种；
4.根据权利要求1所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述双功能肽的氨基酸序列为：AVPIAQK-LL-PLGLAG-NYSKPTDRQYHF。
5.一种如权利要求1-4中任一项所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述双功能肽、上调MHC I分子表达的疏水药物的质量比为1-5：1。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将所述双功能肽、上调MHC I分子表达的疏水药物与DMSO混合均匀，之后滴加到水中进行超声
8.一种如权利要求1-4中任一项所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体在制备抗肿瘤药物中的应用。
9.一种抗肿瘤药物，其特征在于：所述抗肿瘤药物的药效成分包含如权利要求1-4中任一项所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体。
10.根据权利要求9所述的抗肿瘤药物，其特征在于：所述药物的药效成分还包含其他辅助抗肿瘤成分，包括但不限于RT放射治疗，放疗剂量为8-12Gy。
...【技术特征摘要】
1.一种靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述纳米载体以双功能肽、上调mhc i分子表达的疏水药物为原料经自组装得到；
2.根据权利要求1所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述纳米载体的尺寸为50-300nm。
3.根据权利要求1所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述上调mhci分子表达的疏水药物包括但不限于他泽司他、多西他赛、地西他滨中的一种或多种；
4.根据权利要求1所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体，其特征在于：所述双功能肽的氨基酸序列为：avpiaqk-ll-plglag-nyskptdrqyhf。
5.一种如权利要求1-4中任一项所述的靶向肿瘤干细胞多功能纳米载体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
【专利技术属性】
技术研发人员：陈真真，刘子迈，王小惜，张甜甜，吴姿贤，何宗鸿，刘美逸，李凯，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：
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