【技术实现步骤摘要】
本申请涉及一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂制备方法及应用，属于微生物杀菌剂。
技术介绍
1、茶树，其叶片经常受到各种病害的侵袭，最常见的包括茶炭疽病、茶白星病、茶圆赤星病和茶轮斑病等，这些病害不仅导致茶叶产量减少超过10％至50％，同时也影响茶叶品质。化学农药是茶园病害的主要防治手段。
2、近年来，化学农药因农药残留、抗药性增强、环境污染等问题被禁用或限制使用，而微生物农药以其高效性、广泛适用性、对人体的低毒性以及良好的环境兼容性等优势成为生物农药中应用最广泛的一类。伴随着生物农药发展迅速，化学农药使用的逐渐减少，人们对绿色无害农产品需求开始逐渐增多，为生物农药行业的进一步发展带来了重要的机遇。根据《农药登记资料要求》规定，微生物农药的有效成分主要是天然的或经过基因改造的细菌、真菌和病毒等活性微生物，它对病原菌作用原理主要是抑制菌丝生长、干扰病原体信号。然而，在研究方法和提高技术效益上，仍有改进的空间。例如，当前微生物农药的剂型和菌种多样性还不够充分，且长期应用单一农药可能导致病原菌对药物产生抗性。
3、在病害管理中，过度使用化学农药限制了茶园中有益微生物的发展，从而加速了病原菌的生长和繁殖，使得原本次要的病害升级为主要问题，并且多重感染的情况愈发常见。生物防治(即生防)作为控制茶树病害的关键途径，其发展前景广阔，但目前在茶树的生物防治研究方面仍显不足。因此，开发既与作物相容、适应性强又能良好抵御逆境的生物防治菌剂显得尤为关键。
技术实现思路
1、有鉴于此，本
2、具体地，本申请是通过以下方案实现的：
3、一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，包括短短芽孢杆菌hncs-1发酵液、载体、助剂和保护剂，其中：
4、所述短短芽孢杆菌hncs-1发酵液的芽孢率90％以上，发酵液的质量百分含量为50～87.5％，
5、所述助剂选自分散剂、润湿剂中的至少一种，助剂质量百分含量为4～16％，
6、所述保护剂质量百分含量为1～10％，
7、所述载体质量百分含量为4～25％。
8、申请人在前期的研究过程中，从茶园土壤中分离得到短短芽孢杆菌hncs-1(cn116376780a，保藏编号为cctccno:m2022713)，该菌是一种革兰氏阳性细菌，该菌具有很强的抑菌活性，具有广谱拮抗活性，该菌能够抑制茶白星病、茶圆赤星病、茶炭疽病等病原菌菌丝生长，对环境安全无害，是一种具有生物技术应用潜力的有益生防菌，但目前尚未有短短芽孢杆菌登记为农药产品。可湿性粉剂具有使用方便、分散性好、稳定性强、适应性广、对环境友好等优点。基于上述原理，本案选择以可湿性粉剂的形式来制备微生物农药，并在众多生物防治方法中，以芽孢杆菌hncs-1为核心活性组分，充分发挥其环境适应性强、耐逆性能优越以及具有明显的抗菌和促进植物生长的特性，实现同时防御茶白星病、茶炭疽病、茶圆赤星病等多种茶树的病害，达到茶树常见易发病的有效生防。
9、进一步的，作为优选：
10、所述载体为高岭土、硅藻土、轻质碳酸钙、膨润土、白炭黑中的任一种。
11、所述保护剂为糊精、抗坏血酸、羧甲基纤维素钠、可溶性淀粉中的任一种。
12、所述助剂可以采用三种形式：
13、方式一，仅包含分散剂，分散剂为木质素磺酸钠、羟丙基纤维素、木质素磺酸钙、分散剂nno、阿拉伯树胶、聚乙二醇中的任一种。
14、方式二，仅包含润湿剂，润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、拉开粉、氯化钙、渗透剂t、silok、sicare中的任一种。
15、方式三，同时包含有润湿剂与分散剂的复配助剂。此时，所述分散剂与润湿剂的质量比为1～9:9～1。更优选的，所述润湿剂为氯化钙或sicare，分散剂为羟丙基纤维素、木质素磺酸钙、阿拉伯树胶、聚乙二醇中的任一种。
16、上述配方中，
17、短短芽孢杆菌hncs-1发酵液质量百分含量为70～83.2％，载体质量百分含量为10～25％。
18、助剂百分含量为4～5％。
19、上述方案中，申请人对文献报道的短短芽孢杆菌可湿性粉剂所采用的载体、分散剂、润湿剂、紫外保护剂与短短芽孢杆菌hncs-1的生物相容性进行测定，从中选取适宜的可湿性粉剂配方试剂。并上述配比的可湿性粉剂的悬浮率、润湿性和菌含量的评估，得出可湿性粉剂的优选构成：所述载体为白炭黑，保护剂为羧甲基纤维素钠，助剂为氯化钙、阿拉伯树胶的复配物，氯化钙、阿拉伯树胶的质量比为4:6时，各组分与菌株短短芽孢杆菌hncs-1的相容性良好，润湿时间短，悬浮率高，含孢量高且稳定，具有很好的药性。
20、上述茶树病害生防菌的可湿性粉剂可采用下述步骤进行制备：
21、步骤一，短短芽孢杆菌hncs-1培养得到发酵液，
22、优选的发酵液具体制备过程为：将-80℃保存的hncs-1菌种转接到lb固体培养基上，37℃下培养后，挑选单菌落接种到lb液体培养基，37℃下振荡培养得到种子液，将所得种子液接种到nb液体培养基中，26℃下振荡培养得到发酵液。
23、步骤二，将培养液与载体按比例混合，60℃喷雾干燥得到母粉。
24、步骤三，将助剂和保护剂分别添加到母粉中，混合均匀，得到可湿性粉剂。
25、上述制备方法先以短短芽孢杆菌hncs-1形成发酵液，再以该发酵液与载体按比例混合形成母粉，而后加入助剂和保护剂，完成可湿性粉剂的制备，操作简单，所得产品符合国家标准。
26、上述短短芽孢杆菌hncs-1可湿性粉剂在进行应用时，针对茶树茶炭疽病、茶根腐病、茶白星病、茶轮斑病以及茶圆赤星病的中至少两种的多病害状况实现同时防治，可将可湿性粉剂加水稀释后，喷洒到茶蓬面上，每亩用水量45l。稀释倍数适宜控制在600倍以下，并以400倍以下为佳，尤以200～300倍为最佳。
27、本申请所提供的可湿性粉剂进行生防效果验证，该可湿性粉剂对茶炭疽病病原菌抑菌作用较佳，茶树茶炭疽病发病率及病情指数显著降低，对茶炭疽病和茶白星病的田间防效分别为56.52％、33.85％，与化学药剂防效相近，在茶树茶炭疽病防治领域具有很好的普适性。
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1.一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：包括短短芽孢杆菌HNCS-1发酵液、载体、助剂和保护剂，其中，
2.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：所述载体为高岭土、硅藻土、轻质碳酸钙、膨润土、白炭黑中的任一种。
3.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：所述保护剂为糊精、抗坏血酸、羧甲基纤维素钠、可溶性淀粉中的任一种。
4.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于，所述助剂为分散剂或润湿剂，所述分散剂为木质素磺酸钠、羟丙基纤维素、木质素磺酸钙、分散剂NNO、阿拉伯树胶、聚乙二醇中的任一种；所述润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、拉开粉、氯化钙、渗透剂T、Silok、Sicare中的任一种。
5.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：所述助剂同时包含有润湿剂与分散剂，分散剂与润湿剂的质量比为1~9:9~1，润湿剂为氯化钙或Sicare，分散剂为羟丙基纤维素、木质素磺酸钙、阿拉伯树胶、聚乙二醇中的任一种。
6.根
7.一种权利要求1所述茶树病害生防菌的可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：
8.根据权利要求7所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于，步骤一中，发酵液具体制备过程为：将-80℃保存的HNCS-1菌种转接到LB固体培养基上，37℃下培养后，挑选单菌落接种到LB液体培养基，37℃下振荡培养得到种子液，再将种子液接种到NB液体培养基中，26℃下振荡培养得到发酵液。
9.一种权利要求1所述茶树病害生防菌的可湿性粉剂的应用，其特征在于：将可湿性粉剂加水稀释后，喷洒到茶蓬面上，用于茶树茶炭疽病、茶根腐病、茶白星病、茶轮斑病以及茶圆赤星病中至少两种茶树病害的防治。
10.根据权利要求9所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂的应用，其特征在于：稀释倍数不超过600倍。
...【技术特征摘要】
1.一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：包括短短芽孢杆菌hncs-1发酵液、载体、助剂和保护剂，其中，
2.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：所述载体为高岭土、硅藻土、轻质碳酸钙、膨润土、白炭黑中的任一种。
3.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：所述保护剂为糊精、抗坏血酸、羧甲基纤维素钠、可溶性淀粉中的任一种。
4.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于，所述助剂为分散剂或润湿剂，所述分散剂为木质素磺酸钠、羟丙基纤维素、木质素磺酸钙、分散剂nno、阿拉伯树胶、聚乙二醇中的任一种；所述润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、拉开粉、氯化钙、渗透剂t、silok、sicare中的任一种。
5.根据权利要求1所述的一种茶树病害生防菌的可湿性粉剂，其特征在于：所述助剂同时包含有润湿剂与分散剂，分散剂与润湿剂的质量比为1~9:9~1，润湿剂为氯化钙或sicare，分散剂为羟丙基纤维素、木质素磺酸钙、阿拉伯树胶、...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨文波，杨辉，周凌云，林子超，曾泽萱，
申请(专利权)人：湖南省茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：
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