【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及一种a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽或其编码核酸，与a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位特异性结合的单克隆抗体，分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其在制备预防和/或治疗a型塞内卡病毒感染的药物、或者检测和/或诊断a型塞内卡病毒感染的试剂中的应用。
技术介绍
1、a型塞内卡病毒(senecavirus a，sva)是一种无囊膜单链rna病毒，属于小核糖核酸病毒科，塞内卡病毒属的唯一成员。该病毒的主要易感动物是猪。sva感染引发的临床症状与口蹄疫(fmd)、猪水疱病(svd)、水疱性口炎(vs)等猪传染性水疱病极其相似。感染猪只多呈现厌食、嗜睡、跛行，口鼻部以及蹄冠部出现水泡等临床症状。同时sva具有溶瘤特性，可以选择性地感染具有神经内分泌性的肿瘤细胞，在早期临床试验中显示了癌症治疗的前景。由于sva的广泛流行，以及特有的天然溶瘤作用，被人逐渐熟知。
2、sva病毒粒子为二十面体结构，呈球状，直径为17-25nm。sva基因组全长约7300nt，由一个6543nt的开放阅读框、668nt的5'端非编码区和68nt的3'端非编码区以poly(a)尾组成。sva的开放阅读框大约可编码2180个氨基酸，具有其他小核糖核酸病毒的典型l-4-3-4基因组布局，即先导蛋白l、中间体蛋白p1(裂解成vp1、vp2、vp3和vp4四种结构蛋白)、p2(裂解成2a、2b和2c三种非结构蛋白)、p3(裂解成3a、3b、3c和3d四种非结构蛋白)。通过预测发现，3a蛋白是一个跨膜蛋白，是由胞外结构域、跨膜结构域和胞内结
3、3a作为sva非结构蛋白之一，目前对3a蛋白的相关研究极少。但是研究发现同为小核糖核酸病毒科的其他病毒的3a蛋白都扮演着重要的角色。如在口蹄疫的3a蛋白中，其胞内结构域序列的差异性，可能与跨物种传播机制有关。甲肝病毒3a蛋白的膜锚定区，可以与线粒体外膜上的转导蛋白mavs结合，从而导致mavs被3c蛋白降解，抑制宿主的天然免疫反应。71型肠道病毒的3a蛋白可以通过阻止内质网运输囊泡的形成，抑制宿主抗病毒应答相关蛋白的表达，同时3a蛋白可以结合并保护长链ds rna免受dicer的切割，能够有效抑制rnai通路，从而促进了病毒的复制。然而sva 3a蛋在逃避宿主细胞抗病毒天然免疫反应等方面仍未有报道，因此针对3a单克隆抗体的筛选有助于3a蛋白的生物学功能的研究。
4、同时，有研究在对攻毒后试验猪体内抗体动力学分析时发现，针对非结构蛋白3ab所产生的抗体水平明显高于其他非结构蛋白以及结构蛋白vp1。而3a蛋白不仅以成熟的形式存在，并且也可以作为前体蛋白3ab的组成部分，同时在病毒感染早期及晚期均有表达，具有较好的免疫原性。因此，基于3a蛋白所建立的sva抗体检测方法灵敏度可能更高，有作为诊断靶标的潜力。
技术实现思路
1、本专利技术主要解决的技术问题是提供一种a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽，用于刺激、诱导机体产生效应分子(抗体)和效应细胞，发挥免疫效应从而杀灭a型塞内卡病毒。
2、其次，本专利技术提供一种a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽或其编码核酸的应用。
3、再次，本专利技术提供一种与a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位特异性结合的单克隆抗体，以及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
4、又次，本专利技术提供一种抗a型塞内卡病毒3a蛋白单克隆抗体或杂交瘤细胞株的应用。
5、最后，本专利技术提供一种预防和/或治疗a型塞内卡病毒感染的药物，或者检测和/或诊断a型塞内卡病毒感染的试剂。
6、为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
7、一种a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽，所述抗原表位肽包含如seq id no：1所示的氨基酸序列。
8、本专利技术提供的抗原表位位于a型塞内卡病毒3a蛋白(genbank：qoj79820.1，第1397-1486位氨基酸序列区域，90aa，如seq id no：2所示)胞外结构域第5-36位氨基酸。
9、一种a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽的编码核酸。
10、具体的，所述抗原表位肽的编码核酸为dna或rna。在不改变编码的氨基酸序列的前提下，可以根据密码子偏好性进行序列优化。
11、一种包含a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽或其编码核酸的生物材料。
12、具体的，所述生物材料包括但不限于重组表达载体(如质粒载体、病毒载体)、基因表达盒、重组菌、宿主细胞(如原核细胞、真核细胞)等。
13、一种a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽或其编码核酸、生物材料的应用。
14、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述应用包括以下任意一种或多种：
15、(1)在制备预防和/或治疗a型塞内卡病毒感染的药物中的应用；
16、(2)在制备检测和/或诊断a型塞内卡病毒感染的试剂中的应用。
17、一种预防和/或治疗a型塞内卡病毒感染的药物，所述药物包含以下一种或多种药效成分：
18、(1)a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽；
19、(2)a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽的编码核酸；
20、(3)包含a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽或其编码核酸的生物材料。
21、具体的，所述药物为预防和/或治疗性疫苗。所述疫苗可以为核酸疫苗，其中包含a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽的编码核酸，如dna疫苗、rna疫苗。所述疫苗也可以为多肽疫苗、重组蛋白疫苗或合成长肽疫苗，其中包含a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽。
22、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述疫苗还包含免疫调节剂或佐剂，选自聚-iclc(poly-iclc)、1018iss、amplivax、mf59、as03、as04、as15、bcg、cp-870、cp-893、cpg7909、cyaa、环二核苷酸(如sting)、dslim、gm-csf、il-2、ic30、ic31、montanide isatm(如montanide isa51)等中的一种或多种。
23、一种检测和/或诊断a型塞内卡病毒感染的试剂，所述试剂包含以下一种或多种组分：
24、(1)a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽；
25、(2)检测a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽的编码核酸的引物和/或探针。
26、具体的，所述试剂为免疫检测和/或诊断试剂，试剂中包含a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽，可用于检测猪体液中是否存在a型塞内卡病毒感染后产生的抗体。
27、具体的，所述试剂为分子检测和/或诊断试剂，试剂中包含检测a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽的编码核酸的引物、探针等，可用于检测猪体液中是否存在a型塞内卡病毒(即a型塞内卡病毒3a蛋白)。...
【技术保护点】
1.一种A型塞内卡病毒3A蛋白抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽包含如SEQ IDNO：1所示的氨基酸序列。
2.一种如权利要求1所述的A型塞内卡病毒3A蛋白抗原表位肽的编码核酸。
3.一种包含如权利要求1所述的A型塞内卡病毒3A蛋白抗原表位肽、或其如权利要求2所述的编码核酸的生物材料。
4.一种如权利要求1所述的A型塞内卡病毒3A蛋白抗原表位肽、或其如权利要求2所述的编码核酸、或者如权利要求3所述的生物材料的应用，其特征在于：所述应用包括以下任意一种或多种：
5.一种预防和/或治疗A型塞内卡病毒感染的药物、或者检测和/或诊断A型塞内卡病毒感染的试剂，其特征在于：所述药物或试剂包含以下一种或多种组分：
6.一种抗A型塞内卡病毒3A蛋白单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体由保藏在中国典型培养物保藏中心、保藏编号为CCTCC NO：C202466的杂交瘤细胞株SVA-3A-5A7(Hybridoma cell line SVA-3A-5A7)分泌产生，所述单克隆抗体特异性识别并结合如权利要求1所述的A型塞内卡病毒3A蛋
7.一种用于制备如权利要求6所述的抗A型塞内卡病毒3A蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于：所述杂交瘤细胞株的保藏编号为CCTCC NO：C202466，保藏在中国典型培养物保藏中心。
8.一种如权利要求6所述的抗A型塞内卡病毒3A蛋白单克隆抗体、或者如权利要求7所述的杂交瘤细胞株的应用，其特征在于：所述应用包括以下任意一种或多种：
9.一种预防和/或治疗A型塞内卡病毒感染的药物，其特征在于：所述药物包含以下一种或多种药效成分：
10.一种检测和/或诊断A型塞内卡病毒感染的试剂，其特征在于：所述试剂包含以下一种或多种组分：
...【技术特征摘要】
1.一种a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽包含如seq idno：1所示的氨基酸序列。
2.一种如权利要求1所述的a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽的编码核酸。
3.一种包含如权利要求1所述的a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽、或其如权利要求2所述的编码核酸的生物材料。
4.一种如权利要求1所述的a型塞内卡病毒3a蛋白抗原表位肽、或其如权利要求2所述的编码核酸、或者如权利要求3所述的生物材料的应用，其特征在于：所述应用包括以下任意一种或多种：
5.一种预防和/或治疗a型塞内卡病毒感染的药物、或者检测和/或诊断a型塞内卡病毒感染的试剂，其特征在于：所述药物或试剂包含以下一种或多种组分：
6.一种抗a型塞内卡病毒3a蛋白单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体由保藏在中国典型培养物保藏中心、保藏编号为cctcc...
【专利技术属性】
技术研发人员：万博，张雨杭，凌向辉，张改平，韩世充，何文瑞，胡曼，任豪杰，张彪，柳顺达，郭科威，骆梦茹，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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