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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及骨膜,具体是一种口腔用抗菌骨膜的制备方法。
技术介绍
1、口腔用骨膜在口腔种植领域的优势在于可以将骨膜置于口腔软组织与骨缺损之间,从而建立生物屏障,帮助保持骨粉的位置和形态防止其流失,并且阻止软组织生长进植骨区域同时促进骨粉与周围骨组织的结合,提高种植体的稳定性。因此,在牙槽骨量不足或形态异常的情况下,植入骨膜是必要的步骤,能确保种植牙的长期稳定和功能恢复。
2、然而,在手术中或是术后恢复中不可避免的会出现细菌感染,每年约有上百万人出现医疗器械感染的情况,极大增加了病人痛苦和治疗成本。羧甲基壳聚糖是一种水溶性壳聚糖衍生物,有许多医学功效,如促进创面愈合、镇痛和抗菌作用,同时羧甲基壳聚糖具备良好的生物相容性和生物降解性,其水溶液具有高粘度,能有效粘附在骨膜表面,因此,羧甲基壳聚糖可以作为抗菌骨膜的有效涂料。
3、综上,为解决上述问题,制备了一种口腔用抗菌骨膜,使骨膜在使用过程中具有良好的抗细菌感染和生物相容性能,在临床应用中具有重要价值。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
2、为了解决上述技术问题,本专利技术提供如下技术方案:一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:
3、步骤1:原料准备;
4、步骤2:猪腹膜前处理:将猪腹膜去除大面积脂肪,修剪杂边,纯水清洗至无明显附着物,得到猪腹膜a;
5、步骤3:脱脂处理:将猪腹膜a置于氢
6、步骤4:脱细胞处理:将猪腹膜b置于氯化钠溶液中进行脱细胞清洗,再使用纯水清洗,得到猪腹膜c;
7、步骤5:清洗:将猪腹膜c进一步使用纯水清洗、再进行超声清洗,得到猪腹膜d;
8、步骤6:将猪腹膜d平铺在冻干盘上,冻干,得到基础骨膜;
9、步骤7:(1)将羧甲基壳聚糖加入至纯水中搅拌均匀,得到浓度为1~5wt%的羧甲基壳聚糖溶液;(2)将羧甲基壳聚糖溶液均匀涂覆在基础骨膜表面,平铺在冻干盘上,冻干,得到抗菌骨膜。
10、较为优化地,步骤3中,所述脱脂清洗过程中,温度为28~32℃,摇床速度为130~140rpm,时间为3~5小时,脱脂清洗次数为2~3次;
11、所述纯水清洗的过程中,温度为28~32℃,摇床速度为130~140rpm,时间为15~25分钟,纯水清洗的次数为4~6次;
12、所述异丙醇清洗的过程中,温度为38~42℃,摇床速度为130~140rpm,时间为7~9小时,异丙醇清洗的次数为2~3次。
13、较为优化地,步骤4中,所述脱细胞清洗的过程中,温度为室温,摇床速度为130~140rpm,时间为1~1.5小时;所述纯水清洗的过程中,温度为室温,摇床速度为130~140rpm,时间为0.5~0.6小时;
14、步骤5中,所述纯水清洗的过程中,温度为室温,摇床速度为130~140rpm,时间为0.5~0.6小时,纯水清洗的次数为3~5次;所述超声清洗的过程中,温度为室温,时间为15~20分钟,超声清洗次数为2~3次。
15、较为优化地,步骤3中,所述氢氧化钠溶液的浓度为0.01m~0.1m。
16、较为优化地,步骤4中,所述氯化钠溶液的浓度为0.5m~4m。
17、较为优化地,步骤7中,羧甲基壳聚糖溶液的涂覆量为0.05~0.5g/cm2。
18、进一步方案中,步骤7中的步骤为:(1)将1.5~2.5wt%的羧甲基壳聚糖加入至1~2v/v%的醋酸溶液中搅拌均匀,得到溶液a;将0.2~0.4wt%的醛基化透明质酸、0.6~0.8wt%的季铵化透明质酸加入至纯水中搅拌均匀,得到溶液b;将溶液a和溶液b等体积混合均匀,得到涂覆溶液;
19、(2)将0.05~0.1wt%的过氧化氢、0.002~0.004wt%漆酶加入至纯水中,得到界面层溶液;
20、(3)将界面层溶液预先喷涂在基础骨膜表面,喷涂量为0.02~0.03g/cm2;然后将涂覆溶液均匀涂覆在其表面,涂覆量为0.25~0.35g/cm2;平铺在冻干盘上,室温静置1~2小时;然后于-20℃~-25℃预冻4~6小时,于-50℃~-60℃下冷冻干燥24~48小时,得到抗菌骨膜;
21、较为优化地,所述醛基化透明质酸的制备方法为:将低分子透明质酸加入至纯水中搅拌均匀,滴加高碘酸钠溶液,避光搅拌4~6小时,加入乙二醇进行中和,透析、干燥,得到改性透明质酸;氮气氛围下,将其进一步加入至纯水中搅拌均匀,加入edc、nhs中搅拌均匀,加入多巴胺,室温搅拌3~4小时,透析、干燥,得到醛基化透明质酸;
22、所述季铵化透明质酸的制备方法为:将中分子透明质酸加入至50~60wt%的甲酰胺水溶液中搅拌均匀,升温至60~65℃,加入氢氧化钠溶液、2,3-环氧丙基三甲基氯化铵,搅拌反应3~4小时,纯化、干燥,得到季铵化透明质酸;
23、较为优化地,所述透明质酸的平均分子量为8~10kda;所述中分子透明质酸的平均分子量为100~150kda。
24、与现有技术相比,本专利技术所达到的有益效果是:
25、(1)本专利技术提供一种便捷、低成本制备抗菌骨膜的方法,有效解决植入过程中细菌感染的难题;且制备的抗菌骨膜具有良好生物相容性和生物降解性的骨膜。
26、(2)本申请中使用;单独的羧甲基壳聚糖作为表面多孔涂层制备的抗菌骨膜,具有以下优点:其一,羧甲基壳聚糖独特的生物性能赋予骨膜在具有优异的杀菌性能的同时兼具良好的生物相容性;其二,羧甲基壳聚糖涂层浸润后具有较强的粘性,可以紧密贴合种植区域;其三,羧甲基壳聚糖涂层的制备简单方便,可以有效降低生产成本。
27、(3)本申请中的进一步方案中制备得到抗菌骨膜,通过在涂层中引入两种不同分子量和不同改性的透明质酸,有效提高表面层力学性能和生物相容性。
28、其中,单一的羧甲基壳聚糖形成的表面层存在脆性,故而引入透明质酸通过氢键、范德华力、静电等作用,形成稳定的网络,提高膜韧性。同时,方案中利用两种透明质酸衍生物中,醛基化透明质酸的醛基、以及季铵化透明质酸的邻苯二酚结构,实现多网络交联,从而产生增韧,提高表面层的力学性能。
29、另一方面,在低分子透明质酸上接枝邻苯二酚结构可以有效提高生物粘附性,增加相容性。同时,虽通过交联度增加提高了力学性能,但仍然保证了表面层的多孔结构;原因在于:邻苯二酚结构在交联过程中会出现重叠电子云,而酚羟基与壳聚糖中的氨基易产生电荷排斥,从而保证了多孔结构。而季铵盐化透明质酸具有抗炎作用,可以促进细胞的增殖。以此利用低分子透明质酸的骨诱导性,中分子透明质酸的抗炎性,协同提高了抗菌骨膜的生物相容性。
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1.一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤3中,所述脱脂清洗过程中,温度为28~32℃,摇床速度为130~140rpm,时间为3~5小时,脱脂清洗次数为2~3次;
3.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤4中,所述脱细胞清洗的过程中,温度为室温,摇床速度为130~140rpm,时间为1~1.5小时;所述纯水清洗的过程中,温度为室温,摇床速度为130~140rpm,时间为0.5~0.6小时;
4.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤3中,所述氢氧化钠溶液的浓度为0.01M~0.1M。
5.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤4中,所述氯化钠溶液的浓度为0.5M~4M。
6.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤7中,羧甲基壳聚糖溶液的涂覆量为0.05~0.5g/cm2。
7.根据权利要求1所述的一种口腔用抗
8.根据权利要求7所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤7中的步骤为:所述醛基化透明质酸的制备方法为:将低分子透明质酸加入至纯水中搅拌均匀,滴加高碘酸钠溶液,避光搅拌4~6小时,加入乙二醇进行中和,透析、干燥,得到改性透明质酸;氮气氛围下,将其进一步加入至纯水中搅拌均匀,加入EDC、NHS中搅拌均匀,加入多巴胺,室温搅拌3~4小时,透析、干燥,得到醛基化透明质酸;
9.根据权利要求8所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:所述透明质酸的平均分子量为8~10kDa;所述中分子透明质酸的平均分子量为100~150kDa。
10.根据权利要求1~9任一项所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法制备得到的抗菌骨膜。
...【技术特征摘要】
1.一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤3中,所述脱脂清洗过程中,温度为28~32℃,摇床速度为130~140rpm,时间为3~5小时,脱脂清洗次数为2~3次;
3.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤4中,所述脱细胞清洗的过程中,温度为室温,摇床速度为130~140rpm,时间为1~1.5小时;所述纯水清洗的过程中,温度为室温,摇床速度为130~140rpm,时间为0.5~0.6小时;
4.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤3中,所述氢氧化钠溶液的浓度为0.01m~0.1m。
5.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤4中,所述氯化钠溶液的浓度为0.5m~4m。
6.根据权利要求1所述的一种口腔用抗菌骨膜的制备方法,其特征在于:步骤7中,羧甲基壳聚糖溶液的涂覆量为0.05~0.5g/cm2。
7.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员:钱恩泽,钱晓锦,
申请(专利权)人:江苏创英医疗器械有限公司,
类型:发明
国别省市:
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