【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于先进材料，涉及一种促进dha胞内降脂的水凝胶材料及其制备方法与应用。
技术介绍
1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、人体骨组织的修复与再生是一个动态过程，依赖于骨髓间充质干细胞和成骨细胞的活性与功能。然而，高脂环境导致的细胞内脂滴累积和活性氧自由基产物(reactiveoxygen species，ros)激增强烈抑制干细胞和成骨细胞的生物学活性，进而严重损害各种尺度的局部骨缺损的修复与再生。因此，降低细胞内脂滴累积是促进原位骨再生的有效策略。
3、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，dha)是一种多不饱和脂肪酸，已被证明具有调节局部炎症水平并促进局部骨缺损愈合的作用。因此，在高脂血症患者需要进行局部骨缺损修复的部位施用dha是有望促进其高脂环境下原位骨再生的方式。然而，由于dha是一种化学性质较为活跃的小分子脂肪酸，局部施用面临长期活性丧失等难以解决的问题。同时，高脂环境下细胞对dha等脂肪酸的摄入量显著降低，这将导致通过细胞主动摄入方式吸收dha以促进细胞内脂滴外排效率大大降低。因此，如何在骨缺损局部长期施用活性dha并提升其进入细胞内的有效浓度，以发挥dha促进脂滴外排和促进原位骨再生的功能仍然是亟待解决的关键问题。
技术实现思路
1、为了解决现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种促进d
2、为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、第一方面，一种促进dha胞内降脂的水凝胶材料，以聚乙二醇二丙烯酸酯(peg-da)和二硫苏糖醇(dtt)形成的水凝胶作为支架负载纳米微球，所述纳米微球负载二十二碳六烯酸(dha)，且所述纳米微球由壳聚糖与岩藻多糖按照质量比5:(1～10)构成。
4、本专利技术通过研究发现，在高脂环境下，简单增加dha浓度的方式不能增加dha在细胞内的含量。进一步通过实验意外发现，peg-da与dtt构建的水凝胶具有进一步提高dha在细胞内的含量的效果，在此基础上，本专利技术通过构建的壳聚糖与岩藻多糖纳米微球负载dha，并使其装载于peg-da与dtt构建的水凝胶，dha进入细胞内的速率和浓度能够不受细胞内高浓度dha反馈抑制的影响，以实现活性dha快速甚至逆浓度梯度进入细胞，从而达到显著促进活性dha持续进入细胞、提升细胞内dha浓度峰值、延长细胞内dha浓度峰值存续时间等有益效果，最终实现水凝胶材料在高脂血症环境条件下可长效显著促进活性dha进入细胞并促进脂滴外排，进而显著提升高脂血症患者局部骨缺损修复和再生效果。
5、第二方面，一种上述促进dha胞内降脂的水凝胶材料的制备方法，包括如下步骤：
6、将壳聚糖与岩藻多糖按比例混合制成纳米微球，然后将所述纳米微球与dha进行混合获得负载dha的纳米微球；
7、在4℃～10℃的条件下，将peg-da与dtt在溶液中充分混合，获得前体溶液；
8、在4℃～10℃的条件下，将负载dha的纳米微球与前体溶液进行混合。
9、本专利技术通过预先将活性dha负载至纳米微球，可有效避免温敏水凝胶材料形成过程中的化学键交联反应被dha分子内部的烯烃基和羰基等基团的干扰，从而形成长期稳定性更高的水凝胶材料。peg-da与dtt在4℃～10℃的条件下能够自发交联，交联后的体系具有温度响应性的特点，在4℃～10℃的条件下为液态，在25℃～40℃的条件下为水凝胶态。在4℃～10℃的条件下，有利于负载dha的纳米微球的均匀负载。
10、第三方面，一种上述促进dha胞内降脂的水凝胶材料在制备促进局部骨再生产品中的应用。
11、本专利技术的有益效果为：
12、1、经试验证明，本专利技术所提供的水凝胶材料安全无毒性，其在高脂血症下可长效促进活性dha进入细胞并促进脂滴外排，从而显著提升高脂血症患者局部骨缺损修复和再生效果。
13、2、本专利技术提供的水凝胶材料内负载dha的纳米微球在高脂环境中，具有可穿透细胞膜的粒径和结构，能够保证在10天内长效地将活性dha输送进入细胞内且不受细胞内高浓度dha的反馈抑制，提升细胞内dha浓度峰值并延长其存续时间，从而持续促进高脂血症条件下的细胞内脂滴外排，进而降低细胞内活性氧自由基(reactive oxygen species,ros)水平并重塑细胞生物学活性，最终促进高脂血症患者局部骨缺损的原位修复。
14、3、本专利技术提供的水凝胶材料可于15～20天内完全降解，具有良好的生物相容性，且不形成不必要的空间占位，在重塑高脂血症患者局部骨缺损早期修复过程的同时，不影响后期的骨改建进程(由编织骨向板层骨演变)，从而极大地提升高脂血症患者的原位骨再生效果。
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1.一种促进DHA胞内降脂的水凝胶材料，其特征是，以PEG-DA和DTT形成的水凝胶作为支架负载纳米微球，所述纳米微球负载DHA，且所述纳米微球由壳聚糖与岩藻多糖按照质量比5:(1～10)构成。
2.一种权利要求1所述的促进DHA胞内降脂的水凝胶材料的制备方法，其特征是，包括如下步骤：
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，将壳聚糖与岩藻多糖按比例充分混合后，在4℃～10℃的条件下离心分离获得纳米微球。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，壳聚糖与岩藻多糖的质量比为5:(1～6)。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，壳聚糖与岩藻多糖的质量比为5:(4.5～5.5)。
6.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，所述纳米微球与DHA溶液进行混合，DHA溶液的浓度为1～10mM。
7.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，PEG-DA溶液的浓度为200～400mg/mL；
8.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，PEG-DA与DTT的质量比为(200～400):(0.3～1.0)；<...
【技术特征摘要】
1.一种促进dha胞内降脂的水凝胶材料，其特征是，以peg-da和dtt形成的水凝胶作为支架负载纳米微球，所述纳米微球负载dha，且所述纳米微球由壳聚糖与岩藻多糖按照质量比5:(1～10)构成。
2.一种权利要求1所述的促进dha胞内降脂的水凝胶材料的制备方法，其特征是，包括如下步骤：
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，将壳聚糖与岩藻多糖按比例充分混合后，在4℃～10℃的条件下离心分离获得纳米微球。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，壳聚糖与岩藻多糖的质量比为5:(1～6)。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：王亚楠，刘世岳，葛少华，张东姣，于璐，王婷，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：
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