System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种抗体和IL-2的复合体及其应用制造技术_技高网

一种抗体和IL-2的复合体及其应用制造技术

技术编号:44006836 阅读:1 留言:0更新日期:2025-01-10 20:24
本发明专利技术涉及抗体技术领域,具体地,涉及一种抗体和IL‑2的复合体及其应用。本发明专利技术提供了一种抗体和IL‑2的复合体,包括:共价连接的免疫检查点抗体和IL15Rα受体结构域,以及与IL15Rα受体结构域非共价复合的IL‑2/15嵌合体(S‑unit分子)或其变体。通过本发明专利技术创造性的设计,IL‑2分子从复合体上逐渐解离而实现较短的半衰期,免疫检查点抗体则由于Fc结构域通过结合FcRn循环,而实现很长的半衰期。由此,使得两个分子的半衰期和给药剂量能够相互匹配。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗体,具体地,涉及一种抗体和il-2的复合体及其应用。


技术介绍

1、癌症是一种严重危害人类身体健康和寿命的疾病,其特点是恶性肿瘤细胞的过度生长,并可引起多种并发症状。进入二十一世纪以来,以pd-1/pd-l1为代表的肿瘤免疫治疗改写了肿瘤免疫治疗的历史,取得了巨大的成功,开发新的肿瘤免疫治疗靶点和联合用药方案,成为国内乃至世界新药研发的最大热点之一。但随着keytruda和opdivo等一众pd-1/pd-l1抗体更多临床数据的积累,pd-1/pd-l1抗体在实体瘤治疗领域的局限性也日益显现。

2、细胞因子(cytokine)作为一种天然存在的免疫细胞激动剂,其在增强整体免疫系统和抗肿瘤方面的潜力十分诱人,但是,与其相伴而行的巨大毒副作用又大大制约着这类分子在临床上的使用。因此,以改良型il-2为代表的细胞因子成为众多药企管线布局的重中之重的同时,各类针对il-2,il-15的减毒增效的设计思路被披露出来。2022年,中国专利技术cn114380919a公开了一种全新的il-2设计方案,在该方案中,il-2分子中负责结合cd25(即il-2rα)序列和部分其它序列被置换为il-15中的相对应序列,形成一个全新的细胞因子(s-unit分子),并同cd215片段(il-15rα)结合成一个稳定的复合体(l-unit分子)。复合体l-unit是一个具备很强细胞学活性和抗肿瘤活性的全新细胞因子。

3、2021年,罗氏报道了pd-1抗体与il-2突变体(il-2v)融合蛋白比单独的pd-1抗体具备更强大的抗肿瘤活性,并可以克服免疫检验点耐受。2022年9月,罗氏再次在nature上发表了题为“pd-1-cis il-2r agonism yields better effectors from stem-like cd8+t cells”的研究,该研究在多种肿瘤体内药效模型中,均证实了与pd-1抗体和il-2v单独治疗以及联合治疗相比,pd1-il2v融合蛋白抑制肿瘤生长的能力更强,具有更好的生存益处,并显著扩大了抗原特异性pd-1+tcf-1+干细胞样t细胞的数量。虽然无论是从生物学机制上,还是临床前药效实验中,均显示pd1-il2v融合蛋白相对于单独的pd-1或者il-2v具备更强的抗肿瘤活性,但是在实际药物分子设计中,却存在着很多问题。一方面,pd-1抗体和il-2在人体内半衰期存在着巨大的差异,根据文献报道,pd-1抗体在人体内的半衰期可长达20天(teresa c.longoria等,expert opin drug metab toxicol.2016oct;12:1247–1253.),然而,阿地白介素(野生型il-2)在人体内半衰期仅有大约5~7分钟(m t lotze等,jimmunol.1985jan;134(1):157-66.),两者相差3000倍以上,不适合直接作为融合蛋白开发。另外一方面,pd-1抗体和il-2分子在临床应用时,给药剂量相差也巨大,pd-1抗体keytruda在临床中给药剂量为200~400mg每次,约合2~5mg/kg之间,而野生型il-2阿地白介素的给药剂量仅为0.037mg/kg,两者相差50~100倍,同样不适合直接作为融合蛋白开发。

4、因此,本领域需求一种产品,能够使得免疫检查点抗体和细胞因子在半衰期和给药剂量上能够相互匹配,实现统一。


技术实现思路

1、有鉴于此,第一方面,本专利技术提供了一种抗体和il-2的复合体,包括:

2、共价连接的免疫检查点抗体和il15rα受体结构域,以及

3、与il15rα受体结构域非共价复合的il-2/15嵌合体(s-unit分子)或其变体。

4、在一些具体的实施方案中,所述il-2/15嵌合体包括使用il-15分子中介导il-15分子与il15rα结合的区域取代il-2分子中介导il-2分子与il2rα结合的区域。

5、进一步地,所述il-15分子中介导il-15分子与il15rα结合的区域包含9个以上的氨基酸残基。

6、在一些具体的实施方案中,所述il-15分子中介导il-15分子与il15rα结合的区域是连续的氨基酸序列。

7、在一些具体的实施方案中,所述il-15分子中介导il-15分子与il15rα结合的区域是不是连续的氨基酸序列。

8、在一些具体的实施方案中,所述il-15分子中介导il-15分子与il15rα结合的区域包含1个或以上不连续的氨基酸位点。

9、在一些具体的实施方案中,所述il-2分子中介导il-2分子与il2rα结合的区域是连续的氨基酸序列。

10、在一些具体的实施方案中,所述il-2分子中介导il-2分子与il2rα结合的区域是不是连续的氨基酸序列。

11、在一些具体的实施方案中,所述il-2分子中介导il-2分子与il2rα结合的区域包含1个或以上不连续的氨基酸位点。

12、在一些具体的实施方案中,所述il-2/15嵌合体能够降低il-2分子与il2rα的亲和力。

13、在一些具体的实施方案中,所述il-2/15嵌合体能够消除il-2分子与il2rα的亲和力。

14、在一些具体的实施方案中,所述il-2/15嵌合体包括:

15、使用所述介导il-15分子与il15rα结合的区域内的环m或其变体取代所述介导il-2分子与il2rα结合的区域内的环m或其变体;

16、使用所述介导il-15分子与il15rα结合的区域内的螺旋b或其变体取代所述螺旋b或其变体;

17、使用所述介导il-15分子与il15rα结合的区域内的环n或其变体取代所述介导il-2分子与il2rα结合的区域内的环n或其变体;

18、使用所述介导il-15分子与il15rα结合的区域内的螺旋c或其变体取代所述螺旋c或其变体;或者

19、使用所述介导il-15分子与il15rα结合的区域内的环x或其变体取代所述介导il-2分子与il2rα结合的区域内的环x或其变体中的一个或多个。

20、在一些具体的实施方案中,所述介导il-2分子与il2rα结合的区域包括环m(loopm)或其变体,所述环m包含如seq id no.1所示的序列。

21、在一些具体的实施方案中,所述介导il-2分子与il2rα结合的区域包括环n(loopn)或其变体,所述环n包含如seq id no.5所示的序列。

22、在一些具体的实施方案中,所述介导il-2分子与il2rα结合的区域包括螺旋b或其变体,所述螺旋b包含如seq id no.2所示的序列。

23、在一些具体的实施方案中,所述介导il-2分子与il2rα结合的区域包括环m(loopm)或其变体、螺旋b或其变体,所述环m包含如seq id no.1所示的序列,所述螺旋b包含如seq id no.2所示的序列。...

【技术保护点】

1.一种抗体和IL-2的复合体,包括:

2.根据权利要求1所述的复合体,其特征在于,所述IL-2/15嵌合体或其变体包括:

3.根据权利要求2所述的复合体,其特征在于,所述IL-2/15嵌合体或其变体包含如SEQID NO.14所示的序列。

4.根据权利要求2所述的复合体,其特征在于,所述IL-2/15嵌合体或其变体是包括N77D,E76Q,I80T,和/或L81T一处或多处氨基酸取代的变体序列;

5.根据权利要求4所述的复合体,其特征在于,所述IL-2/15嵌合体或其变体具有如SEQID NO.15~18或23-25所示的序列。

6.根据权利要求1所述的复合体,其特征在于,所述IL15Rα受体结构域包括sushi结构域或其变体。

7.根据权利要求6所述的复合体,其特征在于,所述sushi结构域或其变体包含如SEQID NO.19所示的序列。

8.根据权利要求1所述的复合体,其特征在于,所述IL15Rα受体结构域连接至免疫检查点抗体重链C末端。

9.根据权利要求8所述的复合体,其特征在于,所述免疫检查点抗体和IL15Rα受体结构域通过融合的方式共价连接。

10.根据权利要求9所述的复合体,其特征在于,所述融合是通过多肽连接蛋白实现的。

11.根据权利要求10所述的复合体,其特征在于,所述多肽连接蛋白为(G4S)n,n为整数。

12.根据权利要求1-11任一项所述的复合体,其特征在于,所述免疫检查点抗体是靶向程序性死亡受体及其配体的抗体。

13.根据权利要求12所述的复合体,其特征在于,所述免疫检查点抗体是PD-1抗体。

14.根据权利要求13所述的复合体,其特征在于,所述PD-1抗体轻链LC如SEQ ID NO.20所示。

15.根据权利要求13所述的复合体,其特征在于,所述PD-1重链HC与IL15Rα受体结构域融合蛋白具有如SEQ ID NO.21所示的序列。

16.一种核酸分子,包括编码如权利要求1~15中任一项所述的复合体。

17.一种核酸分子组合,包括编码如权利要求1~15中任一项所述的共价连接的免疫检查点抗体和IL15Rα受体结构域的核酸分子;以及编码如权利要求1~15中任一项所述的IL-2/15嵌合体的核酸分子。

18.一种载体,包括如权利要求16所述的核酸分子,或者如权利要求17所述的核酸分子组合。

19.一种宿主细胞,包括如权利要求1~15中任一项所述的复合体、如权利要求16所述的核酸分子、如权利要求17所述的核酸分子组合,或者如权利要求18所述的载体。

20.一种药物组合物,包括:

21.如权利要求1~15中任一项所述的复合体、如权利要求16所述的核酸分子、如权利要求17所述的核酸分子组合、如权利要求18所述的载体,或权利要求19所述的宿主细胞用于制备治疗癌症的试剂中的用途。

22.根据权利要求21所述的用途,其特征在于,所述癌症为结肠直肠癌、前列腺癌。

...

【技术特征摘要】

1.一种抗体和il-2的复合体,包括:

2.根据权利要求1所述的复合体,其特征在于,所述il-2/15嵌合体或其变体包括:

3.根据权利要求2所述的复合体,其特征在于,所述il-2/15嵌合体或其变体包含如seqid no.14所示的序列。

4.根据权利要求2所述的复合体,其特征在于,所述il-2/15嵌合体或其变体是包括n77d,e76q,i80t,和/或l81t一处或多处氨基酸取代的变体序列;

5.根据权利要求4所述的复合体,其特征在于,所述il-2/15嵌合体或其变体具有如seqid no.15~18或23-25所示的序列。

6.根据权利要求1所述的复合体,其特征在于,所述il15rα受体结构域包括sushi结构域或其变体。

7.根据权利要求6所述的复合体,其特征在于,所述sushi结构域或其变体包含如seqid no.19所示的序列。

8.根据权利要求1所述的复合体,其特征在于,所述il15rα受体结构域连接至免疫检查点抗体重链c末端。

9.根据权利要求8所述的复合体,其特征在于,所述免疫检查点抗体和il15rα受体结构域通过融合的方式共价连接。

10.根据权利要求9所述的复合体,其特征在于,所述融合是通过多肽连接蛋白实现的。

11.根据权利要求10所述的复合体,其特征在于,所述多肽连接蛋白为(g4s)n,n为整数。

12.根据权利要求1-11任一项所述的复合体,其特征在于,...

【专利技术属性】
技术研发人员:高翔王国永魏婷婷谭伟张婷朱笑婷杜文玉张建军张维
申请(专利权)人:北京志道生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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