【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及体外诊断领域，尤其涉及一种类似物蛋白及其制备方法、体外诊断试剂。
技术介绍
1、在临床医学检测领域，试剂的稳定性是体外诊断试剂产品质量的一个重要参数。例如，校准品或质控品试剂的稳定性影响到试剂经过校准后测值的准确性，当校准品稳定性不佳时，会导致测值偏差较大，影响测量结果的客观性。
2、导致上述体外诊断试剂稳定性较差的因素较多，其中，体外诊断试剂中参加免疫反应的抗原稳定性较差，容易出现聚集和降解是较为常见的因素。以saa(serum amyloida，saa)全称血清淀粉样蛋白a为例，saa是一种由肝细胞产生后被分泌到血清中的一种急性时相蛋白，临床上血常规与crp、saa联合检测。saa对病毒性感染和细菌性感染都有升高，对局部炎症也有灵敏反应；伴随着感染的康复或炎症消失，saa浓度会迅速下降到正常水平，在临床上通常被用于提示炎症反应和鉴别感染类型。但是，saa抗原作为较不稳定的蛋白，在体外稳定性较差，重组表达的saa抗原在体外容易发生聚集和降解，是导致saa稳定性差的主要原因，直接影响到saa相关诊断试剂产品的使用期限及产品质量。
3、在现有技术中，有通过使用稳定的saa突变体作为免疫原，获得稳定的诊断试剂产品；此外，亦有报道使用蛋白交联剂处理获取saa多聚体作为免疫原，从而获得稳定性提高的saa免疫原。但上述两种方法均直接改变了参与免疫反应的抗原结构，可能导致反应性与真实样本的差异。
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的在于提供一种类似物蛋白
2、为实现上述目的，本专利技术提供一种体外诊断试剂，所述体外诊断试剂含有蛋白稳定剂，所述蛋白稳定剂包括类似物蛋白，所述类似物蛋白由目标稳定蛋白突变得到。
3、在本申请的一些实施例中，所述类似物蛋白的氨基酸序列与所述目标稳定蛋白的氨基酸序列重合率为80％以上；
4、和/或，所述目标稳定蛋白包括血清淀粉样蛋白a、c反应蛋白、降钙素原、白介素6、脑钠素或肌红蛋白。
5、在本申请的一些实施例中，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中的第3位苯丙氨酸突变为丙氨酸，第44位的丙氨酸突变为缬氨酸，第66位的谷氨酰胺突变为脯氨酸得到氨基酸序列如seq id no.1所示的类似物蛋白；
6、和/或，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第4位苯丙氨酸突变为亮氨酸，第17位的蛋氨酸突变为亮氨酸，第66位的谷氨酰胺突变位脯氨酸，第68位苯丙氨酸突变为亮氨酸得到氨基酸序列如seq id no.2所示的类似物蛋白；
7、和/或，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中，使第17位的蛋氨酸突变为亮氨酸，使第66位的谷氨酰胺突变位脯氨酸，使第68位苯丙氨酸突变为亮氨酸，使第72位甘氨酸突变为天冬氨酸得到氨基酸序列如seq id no.3所示的类似物蛋白；
8、和/或，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第3位氨基酸和第4位氨基酸中的至少一种氨基酸突变为除苯丙氨酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白；
9、和/或，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第17位的氨基酸突变为除蛋氨酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白；
10、和/或，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第44位的氨基酸突变为除丙氨酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白；
11、和/或，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第66至68位的氨基酸突变为除所述血清淀粉样蛋白a序列氨基酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白。
12、在本申请的一些实施例中，所述类似物蛋白和所述目标稳定蛋白的质量比为(1:10)-(10:1)；
13、或，所述目标稳定蛋白为液态，以所述液态目标稳定蛋白的总体积l为基准，所述类似物蛋白的添加量为(1.0-100)mg/l。
14、在本申请的一些实施例中，所述体外诊断试剂包括质控品、校准品或试剂盒；
15、和/或，所述体外诊断试剂为比浊法、酶联免疫法、放射免疫法或化学发光法所用的诊断试剂；
16、和/或，所述体外诊断试剂的检测样本包括血清、血浆、全血或体液。
17、在本申请的一些实施例中，所述体外诊断试剂为试剂盒，所述试剂盒包括血清淀粉样蛋白a检测试剂盒、c反应蛋白检测试剂盒、降钙素原检测试剂盒、白介素6检测试剂盒、脑钠素检测试剂盒或肌红蛋白检测试剂盒。
18、为实现上述目的，本专利技术还提供一种类似物蛋白的制备方法，通过对野生型蛋白氨基酸序列中20％以下的氨基酸进行突变，获得类似物蛋白。
19、在本申请的一些实施例中，所述野生型蛋白包括血清淀粉样蛋白a、c反应蛋白、降钙素原、白介素6、脑钠素或肌红蛋白；
20、和/或，所述野生型蛋白为血清淀粉样蛋白a，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中的第3位苯丙氨酸突变为丙氨酸，第44位的丙氨酸突变为缬氨酸，第66位的谷氨酰胺突变为脯氨酸得到氨基酸序列如seq id no.1所示的类似物蛋白；
21、和/或，所述野生型蛋白为血清淀粉样蛋白a，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第4位苯丙氨酸突变为亮氨酸，第17位的蛋氨酸突变为亮氨酸，第66位的谷氨酰胺突变位脯氨酸，第68位苯丙氨酸突变为亮氨酸得到氨基酸序列如seq idno.2所示的类似物蛋白；
22、和/或，所述野生型蛋白为血清淀粉样蛋白a，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中，使第17位的蛋氨酸突变为亮氨酸，使第66位的谷氨酰胺突变位脯氨酸，使第68位苯丙氨酸突变为亮氨酸，使第72位甘氨酸突变为天冬氨酸得到氨基酸序列如seq id no.3所示的类似物蛋白；
23、和/或，所述野生型蛋白为血清淀粉样蛋白a，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第3位氨基酸和第4位氨基酸中的至少一种氨基酸突变为除苯丙氨酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白；
24、和/或，所述野生型蛋白为血清淀粉样蛋白a，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第17位的氨基酸突变为除蛋氨酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白；
25、和/或，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第44位的氨基酸突变为除丙氨酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白；
26、和/或，所述野生型蛋白为血清淀粉样蛋白a，以所述血清淀粉样蛋白a为模板，将所述血清淀粉样蛋白a中第66至68位的氨基酸突变为除所述血清淀粉样蛋白a序列氨基酸之外的任意一种氨基酸得到所述类似物蛋白。
27、为实现上述目的，本专利技术还提供一种类似物蛋白，所述类似物蛋白由野生型蛋白突变得到，所本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种体外诊断试剂，所述体外诊断试剂含有蛋白稳定剂，其特征在于，所述蛋白稳定剂包括类似物蛋白，所述类似物蛋白由目标稳定蛋白突变得到。
2.根据权利要求1所述的体外诊断试剂，其特征在于，所述类似物蛋白的氨基酸序列与所述目标稳定蛋白的氨基酸序列重合率为80％以上；
3.根据权利要求2所述的体外诊断试剂，其特征在于，
4.根据权利要求1至3任意一项所述的体外诊断试剂，其特征在于，所述类似物蛋白和所述目标稳定蛋白的质量比为(1:10)-(10:1)；
5.根据权利要求1至3任意一项所述的体外诊断试剂，其特在于，所述体外诊断试剂包括质控品、校准品或试剂盒；
6.根据权利要求5所述的体外诊断试剂，其特征在于，所述体外诊断试剂为试剂盒，所述试剂盒包括血清淀粉样蛋白A检测试剂盒、C反应蛋白检测试剂盒、降钙素原检测试剂盒、白介素6检测试剂盒、脑钠素检测试剂盒或肌红蛋白检测试剂盒。
7.一种类似物蛋白的制备方法，其特征在于，通过对野生型蛋白氨基酸序列中20％以下的氨基酸进行突变，获得类似物蛋白。
8.根据权利要求7
9.一种类似物蛋白，其特征在于，所述类似物蛋白由野生型蛋白突变得到，所述类似物蛋白的氨基酸序列和所述野生型蛋白的氨基酸序列的重合率在80％以上。
10.根据权利要求9所述的类似物蛋白，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.一种体外诊断试剂，所述体外诊断试剂含有蛋白稳定剂，其特征在于，所述蛋白稳定剂包括类似物蛋白，所述类似物蛋白由目标稳定蛋白突变得到。
2.根据权利要求1所述的体外诊断试剂，其特征在于，所述类似物蛋白的氨基酸序列与所述目标稳定蛋白的氨基酸序列重合率为80％以上；
3.根据权利要求2所述的体外诊断试剂，其特征在于，
4.根据权利要求1至3任意一项所述的体外诊断试剂，其特征在于，所述类似物蛋白和所述目标稳定蛋白的质量比为(1:10)-(10:1)；
5.根据权利要求1至3任意一项所述的体外诊断试剂，其特在于，所述体外诊断试剂包括质控品、校准品或试剂盒；
6.根据权利要求5所述的体外诊断试剂，其特征在于，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐朝，赵伟，管中来，黄涛，
申请(专利权)人：中元汇吉生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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