【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术育种领域，具体涉及一种基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法。
技术介绍
1、羊草（ leymus chinensis）具有较强的适应性，它抗寒、抗旱、耐碱，耐瘠薄，耐风沙，而且叶量多，营养价值高，适口性好，各类家禽一年四季均喜食，其根茎穿透侵占能力较强，能够防风固沙，是极重要的禾本科牧草和生态草。羊草分布范围广泛，种质资源较多。
2、目前，在培育高产、优质、抗逆性强的羊草新品种上具有一定技术瓶颈，比如针对羊草的 “三低”问题，即抽穗率低、结实率低、发芽率低，较难有更好的突破，而利用转基因或基因编辑技术来获得优异羊草新种质是一种较好的选择。羊草的组培再生体系是开展转基因或基因编辑研究的基础，羊草幼穗是诱导羊草植株再生的最佳外植体选择。但目前已公布的利用幼穗构建羊草再生体系的相关报道中，诱导愈伤、分化及生根成苗步骤分别在不同的培养基中进行，整体操作较为繁琐，耗费时间较长，而且诱导出愈率和分化率也不够好。
3、因此，现有技术中亟需一种操作更加简单、用时更短、诱导出愈率和分化率更高的利用羊草幼穗获得再生植株的方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的不足，提供一种操作更加简单、用时更短、诱导出愈率和分化率更高的基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法。
2、本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：一种基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的
3、1）取穗；
4、2）剥穗消毒；
5、3）直接成苗法：将幼穗接种于培养基中，置于黑暗的25℃培养箱培养20d后，转移至新换的所述培养基中，置于光照16 h、黑暗8 h的25℃培养箱培养20d，后转移至新换的所述培养基中培养30天，之后转移至盛装有新换的所述培养基的锥形瓶中再培养15天，植株练苗后移栽至灭菌的营养土中；所述培养基包括4.4 g/l ms、30g/l蔗糖、8g/l琼脂及2mg/l2,4-d，所述培养基的ph值为5.8。
6、所述取穗为取羊草旗叶下方露出茎部长度2-3cm时期的、叶鞘包裹的幼穗于冰盒中，存放于4℃冰箱。
7、所述剥穗消毒为用75% v/v酒精溶液喷洒幼穗外表面后，将幼穗放至超净工作台上，再用75%酒精浸泡的无菌棉球擦拭幼穗的叶鞘处，然后将被叶鞘包裹的幼穗剥出，用无菌纱布包裹后放入锥形瓶中，用75% v/v酒精浸泡30s，无菌水冲洗3次，再用10% v/v次氯酸钠溶液浸泡8min，无菌水冲洗3次，最后用30% v/v过氧化氢溶液浸泡3min，无菌水冲洗5次；消毒过程中始终摇晃锥形瓶，使幼穗与溶液充分接触。
8、本专利技术的有益效果是：在本专利技术中，诱导愈伤、分化、生根过程均采用同一培养基配方，只需要配置同一培养基即可满足整个操作过程使用，无需对应于诱导愈伤、分化、生根过程分别配置不同配方的培养基，本专利技术操作更加简单。本专利技术整体用时更短，成本更低。本专利技术诱导出愈率和分化率更高。
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1.一种基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法，其特征在于包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法，其特征在于：所述取穗为取羊草旗叶下方露出茎部长度2-3cm时期的、叶鞘包裹的幼穗于冰盒中，存放于4℃冰箱。
3.根据权利要求2所述的基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法，其特征在于：所述剥穗消毒为用75% V/V酒精溶液喷洒幼穗外表面后，将幼穗放至超净工作台上，再用75%酒精浸泡的无菌棉球擦拭幼穗的叶鞘处，然后将被叶鞘包裹的幼穗剥出，用无菌纱布包裹后放入锥形瓶中，用75% V/V酒精浸泡30s，无菌水冲洗3次，再用10% V/V次氯酸钠溶液浸泡8min，无菌水冲洗3次，最后用30% V/V过氧化氢溶液浸泡3min，无菌水冲洗5次；消毒过程中始终摇晃锥形瓶，使幼穗与溶液充分接触。
【技术特征摘要】
1.一种基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法，其特征在于包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法，其特征在于：所述取穗为取羊草旗叶下方露出茎部长度2-3cm时期的、叶鞘包裹的幼穗于冰盒中，存放于4℃冰箱。
3.根据权利要求2所述的基于同一培养基的羊草幼穗组培获得再生植株的方法，其特征在于：所述剥穗消毒为用...
【专利技术属性】
技术研发人员：田春育，万文雅，武自念，杨艳婷，宫文龙，冯玉梅，刘乐萌，
申请(专利权)人：中国农业科学院草原研究所，
类型：发明
国别省市：
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