【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置及方法，属于中风后小鼠的行为绝望实验研究。
技术介绍
1、中风是全球第三大致死和致残原因。中风后恢复的患者通常会表现出情绪和情感障碍的迹象，尤其是抑郁症。中风后的抑郁状态被定义为卒中后抑郁（psd）。大多数受影响的个体在中风后不久会发展出轻度至中度的抑郁，但抑郁症可能在数月或数年后出现。中风幸存者中，一年期中，抑郁症的发病率为大约1/3。患有psd的患者更容易出现认知缺陷、自杀倾向和长期残疾。psd的发病可能受到多种因素的影响，与重大抑郁症（mdd）相似而不相同。然而，最近进行的几项多中心、双盲、随机、安慰剂对照研究并不支持在中风后使用选择性5-羟色胺再摄取抑制剂（ssris），这是首选的抗抑郁药6-8，这在psd的临床治疗中留下了空白。需要进一步的研究来确定原因和干预措施，以预防和治疗psd。
2、抑郁情绪和快感缺失是重性抑郁障碍（mdd）的两个基本症状，至少必须有一个与其他关键症状一起出现才能诊断为mdd。在临床上，个体的自我报告提供了抑郁症的关键信息。然而，在实验室中，很难确定一只小鼠是否“抑郁”。人类和小鼠无法通过语言沟通是部分原因。幸运的是，通过简短观察特定物种典型行为，这些行为类似于人类抑郁的某些方面，已经建立了几种行为测试，并广泛用于评估啮齿动物的抑郁样状态，例如悬尾测试（tst）和强迫游泳测试（fst）用于绝望，蔗糖偏好测试（spt）用于快感缺失，以及新奇抑制进食测试（nsft）、开放场测试（oft）和高架十字迷宫测试（epmt）用于评估小鼠抑
3、悬尾试验（tst）是一种评估小鼠行为绝望的经典方法，常用于抑郁症的基础和临床前研究。然而，tst本身依赖于运动功能，当应用于严重运动协调受损的小鼠，如中风后抑郁模型小鼠时，测试结果可能会产生误导。总的来说，cms同时在小鼠中引起行为绝望（在fst和tst中与对照组相比静止时间增加）和快感缺失（在spt中与对照组相比蔗糖偏好降低），如图1a-d所示。然而，我们发现，与对照组小鼠相比，缺血小鼠在spt中蔗糖偏好降低，但在fst和tst中的不动时间相似（图1a-d）。mcao引起的运动功能受损（图1e,f）可以解释这种差异，而mcao不影响运动活动（图1g）。运动功能受损使得小鼠在悬挂或游泳时协调变得困难，所以小鼠本能地为平衡而挣扎，而不是为了生存，导致不动时间减少。此外，使用深度学习框架deeplabcut35对tst视频进行无标记姿态估计（图1h）发现了mcao小鼠后爪轨迹的特征。对照组和cms小鼠的两个后爪轨迹相对分开，但mcao小鼠的轨迹大大重叠，进一步支持了mcao小鼠在tst中的不平衡运动（图1i）。总之，经典的tst和fst在用于评估中风后小鼠的行为绝望时会提供误导信息。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置及方法，是一种基于经典tst改良后的方法，避免运动功能受损的干扰，并可用于评估中风后小鼠的行为绝望，用以解决现有技术的fst或tst不适合评估严重中风后啮齿动物的行为绝望的技术问题。
2、本专利技术用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置采用如下技术方案：一种用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其包括悬挂室，悬挂室的前侧面为透明板，悬挂室外的前方设有摄像机，悬挂室顶部安装有用于悬吊小鼠的吊件，吊件上连接有压力传感器，所述悬挂室内部设有斜板组件，斜板组件包括斜向设置的斜板和滑动支撑件，滑动支撑件设置在斜板底部对斜板进行支撑，所述斜板由前到后向上倾斜且斜板位于吊件的下方，所述斜板与水平面的夹角为40°-80°。
3、所述斜板的底部连接有底板，所述滑动支撑件包括底板和分别设置在底板左右两侧的导轨，所述底板与斜板的底部固定连接，两个导轨平行设置且沿前后方向延伸，两个导轨相互靠近的内侧设有导轨槽，所述底板的两侧分别滑动安装在导轨槽内，每个导轨槽上分别设有用将底板锁紧的锁紧件。
4、所述锁紧件包括u型件，u型件的开口朝向对应的导轨槽且卡在导轨槽上，u型件的下侧压紧在底板上，u型件的上侧位于导轨的上方，所述u型件的上侧设有螺纹孔，螺纹孔内安装有用于顶紧导轨的螺栓。
5、所述底板的前端设有手柄，用于斜板位置调整。
6、所述悬挂室的左右两侧面和顶面均为不透明板，悬挂室的后侧面和底面均为白色发光背板，所述吊件为挂钩。
7、本专利技术用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试方法采用如下技术方案：一种用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试方法，其是采用上述悬尾测试装置，包括以下步骤：（1）剪取一段胶带，该胶带用于固定在小鼠尾巴上；（2）将小鼠放在测试台上，让其自由移动，从小鼠尾巴末端标记3厘米的距离，拉直小鼠尾巴，将步骤（1）剪取的胶带的一端固定在小鼠尾巴的腹侧，另一端固定在小鼠尾巴的背侧，胶带两端粘贴在小鼠尾巴上的长度相等，均为小鼠尾巴末端至3厘米段的长度，将胶带的两端粘合在一起并确保小鼠尾巴被胶带紧密包裹，胶带的中间部位形成一个环；（3）对粘贴有胶带的小鼠称重，记录该小鼠的体重为x克；（4）将粘贴有胶带的同窝调试小鼠悬挂在悬挂室内，将胶带环挂在吊件上，保持小鼠的背部朝向摄像头，移动斜板直到小鼠的前爪刚好能接触到斜板的表面，当压力传感器的数字显示会在x-1至x克之间闪烁时，斜板定位成功，将斜板锁紧该固定位置处；（5）使用同一只小鼠重复步骤（4），直至其他悬挂室调试完成，将小鼠从悬挂室中取出，移除胶带，抚触小鼠并将其放回原笼；（6）打开与摄像机连接电脑行为记录软件的预览窗口，调整相机参数以获得清晰的视频，并记录一个11秒的悬挂室无鼠的背景视频；（7）重复步骤（1）-（3）的操作过程，然后将实验测试小鼠悬挂在悬挂室内，保持小鼠的背部朝向摄像机的摄像头，确保悬挂的小鼠仅能用前爪触碰到斜板的表面，压力传感器显示的数字在x-1至x克之间；（8）对小鼠进行固定时长的视频录制，在测试期间避免噪音、光线和显著的环境变化；视频录制结束后，将小鼠从悬挂室中取出，并取下小鼠尾巴上的胶带，抚触小鼠并将其放回原笼；（9）重复测试程序，即重复上述步骤（7）-（8），直到待测试的所有小鼠都完成测试；（10）选择步骤（8）拍摄的视频用于分析，在行为分析软件中打开实验中录制的视频，并设置分析框，分析框为软件分析涵盖的区域，确保分析框在步骤（8）录制的视频的任何时间点都能容纳小鼠的身体；利用行为分析软件进行自动行为分析；（11）步骤（10）得到小鼠的行为分析结本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其包括悬挂室，悬挂室的前侧面为透明板，悬挂室外的前方设有摄像机，悬挂室顶部安装有用于悬吊小鼠的吊件，吊件上连接有压力传感器，其特征在于：所述悬挂室内部设有斜板组件，斜板组件包括斜向设置的斜板和滑动支撑件，滑动支撑件设置在斜板底部对斜板进行支撑，所述斜板由前到后向上倾斜且斜板位于吊件的下方，所述斜板与水平面的夹角为40°-80°。
2.根据权利要求1所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述斜板的底部连接有底板，所述滑动支撑件包括底板和分别设置在底板左右两侧的导轨，所述底板与斜板的底部固定连接，两个导轨平行设置且沿前后方向延伸，两个导轨相互靠近的内侧设有导轨槽，所述底板的两侧分别滑动安装在导轨槽内，每个导轨槽上分别设有用将底板锁紧的锁紧件。
3.根据权利要求2所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述锁紧件包括U型件，U型件的开口朝向对应的导轨槽且卡在导轨槽上，U型件的下侧压紧在底板上，U型件的上侧位于导轨的上方，所述U型件的上侧设有螺纹孔，螺纹孔内安装有用于顶紧导
4.根据权利要求2所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述底板的前端设有手柄，用于斜板位置调整。
5.根据权利要求1所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述悬挂室的左右两侧面和顶面均为不透明板，悬挂室的后侧面和底面均为白色发光背板，所述吊件为挂钩；所述斜板与水平面的夹角为60°。
6.一种用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试方法，其是采用权利要求1中所述的悬尾测试装置，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试方法，其特征在于：所述悬挂室有4个，4个悬挂室同时用于小鼠行为绝望的悬尾测试；在步骤（5）中，每个小鼠尾巴粘附胶带环，依次将4只小鼠分别挂在4个悬挂室中，每次均保持小鼠背部朝向摄像头；每只小鼠的悬挂标准应与步骤（4）中的一致，在同一场次中测试的4只小鼠尽可能快速地依次悬挂，10秒内完成4只小鼠的悬挂。
8.根据权利要求6所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试方法，其特征在于：步骤（6）中录制视频的时长为6min；步骤（9）中，录制视频的时长为11s。
9.根据权利要求6所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试方法，其特征在于：每次测试时，打开悬挂室的发光背板，并关闭检测室内其他灯光，在测试整个过程中，保持悬挂室的发光背板作为唯一的光源；每次测试开始前，用无味洗洁精清洁悬挂室，并用70%的乙醇彻底擦拭斜板，以驱散之前测试过的小鼠留下的气味。
10.根据权利要求6所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试方法，其特征在于：步骤（10）中，分析框比小鼠身体大，分析框中分别在小鼠身体的左右两侧留出一个身体宽度的空间。
...【技术特征摘要】
1.一种用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其包括悬挂室，悬挂室的前侧面为透明板，悬挂室外的前方设有摄像机，悬挂室顶部安装有用于悬吊小鼠的吊件，吊件上连接有压力传感器，其特征在于：所述悬挂室内部设有斜板组件，斜板组件包括斜向设置的斜板和滑动支撑件，滑动支撑件设置在斜板底部对斜板进行支撑，所述斜板由前到后向上倾斜且斜板位于吊件的下方，所述斜板与水平面的夹角为40°-80°。
2.根据权利要求1所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述斜板的底部连接有底板，所述滑动支撑件包括底板和分别设置在底板左右两侧的导轨，所述底板与斜板的底部固定连接，两个导轨平行设置且沿前后方向延伸，两个导轨相互靠近的内侧设有导轨槽，所述底板的两侧分别滑动安装在导轨槽内，每个导轨槽上分别设有用将底板锁紧的锁紧件。
3.根据权利要求2所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述锁紧件包括u型件，u型件的开口朝向对应的导轨槽且卡在导轨槽上，u型件的下侧压紧在底板上，u型件的上侧位于导轨的上方，所述u型件的上侧设有螺纹孔，螺纹孔内安装有用于顶紧导轨的螺栓。
4.根据权利要求2所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述底板的前端设有手柄，用于斜板位置调整。
5.根据权利要求1所述的用于评估中风后小鼠行为绝望的悬尾测试装置，其特征在于：所述悬挂室的左右两侧面和顶面均为不...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗春霞，吴海银，林瑜辉，常磊，孔沛冉，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：
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