【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于甜菊糖苷生产，具体涉及一种葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法。
技术介绍
1、葡萄糖基甜菊糖苷(酶改质)是以甜叶菊叶为原料，经酶法对在甜叶菊叶中提取的甜菊糖苷进行葡萄糖基化，然后经蒸发浓缩、喷雾干燥从而得的食品添加剂。葡萄糖基甜菊糖苷的甜度为蔗糖的250～450倍,带有轻微涩味，适度可口，纯品后味较少，是最接近砂糖的天然甜味剂。
2、葡萄糖基甜菊糖苷作为香精在酒类中应用作为风味调节或修饰剂，其在水中有良好的溶解度，但在高添加量的乙醇溶液中或高浓度酒精配料过程中会发生沉降或呈不澄清的雾状，严重影响产品的品质；现有技术的葡萄糖基甜菊糖苷的生产工艺中，通常使用大孔吸附树脂作为纯化的手段，将转化物料通过树脂吸附甜菊糖苷及糖基化的甜菊糖苷，通过水洗或含水的有机溶剂进行杂质的去除，再通过有机溶剂将吸附的糖苷及糖基化的糖苷解析下来。此过程在连续生产环节中需要足量的吸附树脂进行吸附，且生产过程通过吸附、除杂、解析等工艺环节造成生产周期性较差及溶剂的消耗及损耗。
3、不同的糖基化供体在通过树脂除杂的环节容易造成杂质的吸附或在除杂环节糊精的脱除不彻底，造成杂质残留，影响后续纯化纯度，杂质的残留也同时会影响产品在实际应用；并且目前的生产工艺得到的产品中长链的糖基化产物含量比较高，长链的糖基化产物不仅会影响甜度、溶解度，更会影响产品在应用过程的使用口感特性；因此还需要寻找更好的制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，克
2、为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是：
3、一种葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，包括以下步骤：
4、a.转化：甜菊糖苷与糖基供体在反应体系中添加酶，制备葡萄糖基甜菊糖苷；反应完成后灭活，降至室温，得到转化液；
5、所述甜菊糖苷的总苷≥90％，糖基供体为β环状糊精或麦芽糊精(de值10～15)；甜菊糖苷与糖基供体的重量比为0.5～1:1；所述酶为环糊精葡萄糖基转移酶，酶添加量为甜菊糖苷重量的1～2％，反应温度为75～80℃，反应时间为24～48h；搅拌速度为100～200rpm，ph值为6～7；反应体系浓度为20％～30％，反应溶剂为水；灭活温度为95℃，灭活时间为20～30min；
6、b.水解：将步骤a得到的转化液中加入0.01％体积的水解酶，温度20～25℃、ph值为6～7、搅拌转速20rpm条件下进行水解24～32h，得到水解液；所述水解酶为普鲁兰酶和糖化酶，分别添加转化液的0.01％体积；
7、c.杂质分离：将步骤b得到的水解液通过超滤膜分离水解(去掉水解液中的单糖及低聚糖)；超滤膜为孔径0.02微米的超滤膜，超滤清液透出至物料一半体积时开始加水，加水量为转化液的1倍，过膜压力2～3mpa；得到膜截留液；
8、d.浓缩：将步骤c中得到的膜截留液于温度70℃～75℃，压力-0.08～-0.1mpa条件下进行负压蒸发浓缩，至固含量为70％～75％，然后经喷雾干燥得到干粉；
9、e.精制：将步骤d得到的干粉投入到80％～85％体积浓度的乙醇-水溶液中，搅拌，搅拌均匀后加入硅藻土静置后过滤；所述乙醇溶液的添加量为步骤c得到的干粉添加量的7～8倍，搅拌速度为100～200rpm；搅拌时间为10～60min；加入前述干粉溶解后得到的物料体积1％的硅藻土，于温度20～25℃条件下静置20～60min，过滤得到清液；
10、f.浓缩：将步骤e得到清液中的乙醇通过负压蒸发浓缩进行脱醇，加热温度为70～75℃，压力为-0.08～-0.1mpa，浓缩至固含量为70～75％，得到浓缩液；
11、g.干燥：将步骤f得到的浓缩液进行喷雾干燥，得到葡萄糖基甜菊糖苷成品；喷雾干燥进风温度为175℃～180℃，出风温度85℃～90℃。
12、优选的，所述的步骤a中糖基供体为麦芽糊精；甜菊糖苷与糊精的重量比为1:1；所述酶添加量为甜菊糖苷重量的1％，反应温度为80℃，反应时间为24h；搅拌速度为120rpm，ph值为5.5；反应体系浓度为20％，反应溶剂为水；灭活温度为95℃，灭活时间为20min。
13、优选的，所述的步骤b中在温度25℃、ph值为6.5、搅拌转速20rpm条件下进行水解30h，得到水解液。
14、优选的，所述的步骤c中过膜压力为2.5mpa。
15、优选的，所述的步骤d中蒸发温度为75℃，压力-0.1mpa，至固含量为70％。
16、优选的，所述的步骤e中乙醇溶液的体积浓度为80％，乙醇溶液的添加量为步骤c得到的干粉重量的7倍；搅拌速度为120rpm；搅拌时间为30min；温度为25℃，静置时间为20min。
17、优选的，所述的步骤f中加热温度为75℃，压力为-0.1mpa，浓缩至固含量为70％。
18、优选的，所述的步骤g中喷雾干燥进风温度为180℃，出风温度85℃。
19、由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：
20、本专利技术通过采用水解酶对转化液中物料的非还原性端的糖链进行水解，降低了多糖基链长的糖基化比例；通过双水解酶同时进行水解，可以有选择性、有目的性地调控葡萄糖基甜菊糖苷的糖链长度；通过使用超滤膜过滤，去除水解产生的单糖和低聚糖，最终获取富含1-5个葡萄糖基化的葡萄糖基甜菊糖苷产品；该产品无论在甜度还是在口感应用方面均有很大的提升，20％终浓度的产品，可以在60％酒精溶液中保持24h澄清状态，与现有技术得到的产品相比有大幅提高。
21、综上所述，本专利技术不仅提高了生产葡糖基甜菊糖苷总苷，调控了整体糖基化链长占比，提升口感甜度及甜感，还增加了其在应用中的溶解度，减缓了其在高醇状态下澄清问题，扩大了市场应用范围。
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1.一种葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤a中糖基供体为麦芽糊精；甜菊糖苷与糊精的重量比为1:1；所述酶添加量为甜菊糖苷重量的1％，反应温度为80℃，反应时间为24h；搅拌速度为120rpm，pH值为5.5；反应体系浓度为20％，反应溶剂为水；灭活温度为95℃，灭活时间为20min。
3.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤b中在温度25℃、pH值为6.5、搅拌转速20rpm条件下进行水解30h，得到水解液。
4.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤c中过膜压力为2.5Mpa。
5.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤d中蒸发温度为75℃，压力-0.1Mpa，至固含量为70％。
6.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤e中乙醇溶液的体积浓度为80％，乙醇溶液的添加量为步骤c得到的干粉重量的7倍；搅拌速度为120r
7.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤f中加热温度为75℃，压力为-0.1Mpa，浓缩至固含量为70％。
8.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤g中喷雾干燥进风温度为180℃，出风温度85℃。
...【技术特征摘要】
1.一种葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤a中糖基供体为麦芽糊精；甜菊糖苷与糊精的重量比为1:1；所述酶添加量为甜菊糖苷重量的1％，反应温度为80℃，反应时间为24h；搅拌速度为120rpm，ph值为5.5；反应体系浓度为20％，反应溶剂为水；灭活温度为95℃，灭活时间为20min。
3.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤b中在温度25℃、ph值为6.5、搅拌转速20rpm条件下进行水解30h，得到水解液。
4.如权利要求1所述的葡萄糖基甜菊糖苷的制备方法，其特征在于：所述步骤c中过膜压力为2.5mpa。...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱理平，宋维才，徐良平，杜萌萌，
申请(专利权)人：东台市浩瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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