【技术实现步骤摘要】
本申请涉及医药生物，尤其涉及一种魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗hsv-1药物中的应用。
技术介绍
1、魔芋葡甘露寡糖(konjac glucomannan oligosaccharides，kgmos)是一种低分子量的多糖，属于均一多糖中的杂多糖，是由β-d-葡萄糖和β-d-甘露糖通过β-(1→4)糖苷键连接而形成的平均聚合度为2~10的功能性寡糖。在kgmos中，葡萄糖和甘露糖的摩尔比一般为1:1.6~1.7之间，通常在主链的甘露糖的3号位c位点产生β-(1→3)糖苷键连接的葡萄糖或甘露糖分支而形成短的支链形式。在主链或/和支链位置处的葡萄糖或/和甘露糖产生天然的乙酰化修饰。
2、kgmos是一种被研究较多的功能性寡糖。目前已经报道的功能可以大致分为两类。一是具有免疫调节功能，如能够提高机体的免疫力而作为疫苗的佐剂使用（增强体液免疫和细胞免疫）、提高免疫器官的指数。二是具有调节肠道微生物种群进而改善肠道功能，如维持肠道菌群的稳定性、改善肠道结构、吸附肠道有害菌及其产生的毒素。同时也有文献报道了体内外抗肿瘤活性、抗氧化能力、降低no自由基水平、减轻高脂饮食小鼠体重的增加、改善动物的生产性能以及抗病毒等功能。
3、已有文献报道了kgmos的硫酸酯具有抗hsv-2的活性（杨敏，蒙义文，魔芋低聚糖硫酸酯的制备及抗病毒活性研究[j]，天然产物研究与开发，2002，1（14）：17-19）。还有文献报道了魔芋葡甘露低聚糖醛酸丙酯硫酸酯（hydroxylpropyl oligo-konjacglucomannannur
4、单纯疱疹病毒i型（herpes simplex virus type i, hsv-1）是一种在各类人群中广泛传播和携带的重要人类病原体。hsv-1在人体内会产生裂解感染和潜伏感染2种不同感染状态的周期性转化。潜伏于人体三叉神经节运动神经元中的hsv-1能在应激、环境变化以及免疫力降低的情况下，从潜伏感染的状态转变为裂解感染状态，产生明显的病灶或临床症状。hsv-1感染所产生的临床症状包括口唇疱疹、角膜炎以及病毒性脑炎。其中，单纯疱疹病毒性角膜炎是成年人致盲的主要原因之一。单纯疱疹病毒性脑炎的发病率虽然较低，但预后较差导致产生严重的精神障碍后遗症。
5、抗hsv-1药物在临床上仍以阿昔洛韦（acv）为一线用药，但多年的广泛临床应用导致hsv-1对acv产生了严重的耐药性。其他的抗hsv-1的核苷酸类似物如伐昔洛韦、喷昔洛韦等也面临类似的耐药性挑战。因此，研发新型的抗hsv-1药物是当前临床应用所面临的主要任务之一。目前，没有文献报道酶法制备的kgmos不经化学修饰而具有抗hsv-1野生株以及抗hsv-1 acv耐药株的活性。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供一种魔芋葡甘露寡糖混合物（kgmos）在制备抗hsv-1药物中的应用。魔芋葡甘露寡糖混合物药食同源，所述混合物在体外实验中具有较好的抗hsv-1野生株以及抗hsv-1 acv耐药株的活性，可以用于制备抗hsv-1acv耐药株药物，解决临床治疗上治疗hsv-1感染的耐药性问题。
2、为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案如下：一种魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗hsv-1的药物或保健食品中的应用。
3、本专利技术还提供所述魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗hsv-1 acv耐药株的药物或保健食品中的应用。
4、与acv相比，kgmos具有较低的细胞毒性。所述kgmos混合物对hsv-1野生株在thp-1中的预防和治疗模式下，50%有效/抑制浓度（effective/ inhibitory concentration，ec/ic50）分别为0.675 mg/ml和0.4968 mg/ml，选择指数（selective index，si）分别为24.95和33.90。所述kgmos混合物对hsv-1acv耐药株在thp-1中的预防和治疗模式下，ic50分别为0.6403 mg/ml和0.5974 mg/ml；si分别为26.30和28.19。acv对hsv-1acv耐药株的ic50为0.3192 mg/ml，si为5.04，kgmos的抗hsv-1acv耐药株的效果明显优于acv。
5、所述kgmos混合物不仅能够用于制备预防hsv-1感染的药物，也能够用于制备治疗hsv-1感染所引起的疾病的药物。hsv-1感染所引起的疾病包括口唇疱疹、眼部疾病（角膜炎）和病毒性脑炎。
6、作为对上述方案的进一步描述：所述魔芋葡甘露寡糖混合物是以白魔芋精粉为底物，用重组β-甘露聚糖酶水解后所产生的初产物经膜分离、纯化后所得到；所述重组β-甘露聚糖酶的编码基因在ncbi官网的genebank登录号为：mw357596。
7、作为对上述方案的进一步描述：所述魔芋葡甘露寡糖混合物主要由β-d-葡萄糖、β-d-甘露糖以及β-d-葡萄糖和β-d-甘露糖通过β-1,4-糖苷键连接的平均聚合度为2-5的寡糖所组成，其分子式可以表示为[c6h10o5]n，其中，n=2~5。
8、作为对上述方案的进一步描述：所述魔芋葡甘露寡糖混合物的分子量主要为200-1000da；其中二、三、四和五糖的低聚合度寡糖的含量总和达到70%以上。
9、作为对上述方案的进一步描述：所述魔芋葡甘露寡糖混合物能够显著上调与天然免疫和炎症相关的细胞因子水平，如ifnβ、isg15、isg56、mxi、il-1β、il-6和tnfα的表达水平。
10、作为对上述方案的进一步描述：所述魔芋葡甘露寡糖混合物能够在体外抑制hsv-1 acv耐药株基因的复制、转录和病毒的增殖。
11、本专利技术的特点在于：本专利技术首次发现用基因工程β-甘露聚糖酶所制备的kgmos混合物在不经过化学衍生的条件下，具有抗hsv-1野生株和抗hsv-1acv耐药株的活性，这一特征使得在制备抗hsv-1acv耐药株的药物过程中具有非常明显的优势。这种不经化学衍生的kgmos混合物抗hsv-1acv耐药株的部分原因可能是该混合物中功能性的kgmos含量较高，激活了细胞的抗病毒天然免疫响应从而获得抑制病毒在细胞内复制增殖的功能。
12、经化学衍生的kgmos混合物发挥抗病毒的作用主要是能够抑制病毒的衣壳蛋白与细胞表面受体的结合，即抑制病毒与细胞吸附从而抑制病毒的入细胞过程，实现抑制病毒对细胞的感染，其对病毒在细胞内复制的抑制能力较弱。
13、本专利技术所提供的kgmos混合物在体外实验中能以激活细胞天然免疫的方式抑制hsv-1acv耐药株在细胞内的复制，而不是以抑制病毒与细胞的吸附过程为主的抗病毒机制。用kgmos对细胞进行提前预处理，激活细胞的天然免疫响应本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗HSV-1的药物或保健食品中的应用。
2.一种魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗HSV-1 ACV耐药株的药物或保健食品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述魔芋葡甘露寡糖混合物是以白魔芋精粉为底物，用重组β-甘露聚糖酶水解后所产生的初产物经膜分离、纯化后所得到；所述重组β-甘露聚糖酶的编码基因在NCBI官网的GeneBank登录号为：MW357596。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述魔芋葡甘露寡糖混合物主要由β-D-葡萄糖、β-D-甘露糖以及β-D-葡萄糖和β-D-甘露糖通过β-1,4-糖苷键连接的平均聚合度为2-5的寡糖所组成，其分子式表示为[C6H10O5]n，其中，n=2~5。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述魔芋葡甘露寡糖混合物的分子量为200-1000Da；其中二、三、四和五糖的低聚合度寡糖的含量总和达到70%以上。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述魔芋葡甘露寡糖混合物能够上调与天然免疫和炎症相关的细胞因子水平。
7.根据权利要求2所述的魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗HSV-1 ACV耐药株的药物或保健食品中的应用，其特征在于，所述魔芋葡甘露寡糖混合物能够在体外抑制HSV-1 ACV耐药株基因的复制、转录和病毒的增殖。
...【技术特征摘要】
1.一种魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗hsv-1的药物或保健食品中的应用。
2.一种魔芋葡甘露寡糖混合物在制备抗hsv-1 acv耐药株的药物或保健食品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述魔芋葡甘露寡糖混合物是以白魔芋精粉为底物，用重组β-甘露聚糖酶水解后所产生的初产物经膜分离、纯化后所得到；所述重组β-甘露聚糖酶的编码基因在ncbi官网的genebank登录号为：mw357596。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述魔芋葡甘露寡糖混合物主要由β-d-葡萄糖、β-d-甘露糖以及β-d-葡萄糖和β-d-甘露糖通过β-1,4-糖苷键连...
【专利技术属性】
技术研发人员：段永忠，唐湘华，吴嘉，程继帅，孙乐，钱雯，吕雯雯，周磊，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：
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