【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及植物转基因生物技术育种，具体涉及一种调控糜子香味的 badh2基因、应用及方法。
技术介绍
1、香味是谷物重要的品质性状之一，是谷物蒸煮与食味品质的一项重要指标，也是决定市场价格的关键因素之一。香稻的米香飘溢，入口回香，深受消费者的青睐，具有很高的经济价值。根据成熟稻米产生香味的不同，可以分为爆米花型、茉莉花型、紫罗兰型、烤面包型、山核桃型等。其中大部分香稻中以爆米花香为主。目前研究表明使稻米产生爆米花香的主要物质是2-乙酰-1-吡咯啉（2-acetyl-1-pyrroline，2-ap）。 badh2基因是控制水稻等作物爆米花香味性状的主效基因，该基因编码甜菜碱醛脱氢酶，其功能的丧失会导致水稻中2-ap的含量增加，产生香味水稻。目前已有较多利用基因编辑技术敲除 badh2基因来获得香味水稻、谷子、玉米和高粱的报道。
2、糜子（ panicum miliaceum l.）属禾本科黍属，其营养丰富，具有很高的营养价值。糜子曾经是我国北方重要栽培作物，但随着农业生产的发展，逐渐退出主栽作物地位，成为了区域特色作物，主要原因是糜子产量没有大的突破，品质没有根本提升。若能改良创制出香味糜子新种质，必能提升糜子的食味品质，从而提高其附加价值和市场价值，对糜子产业的发展有重要的意义。
3、目前，尚未发现由
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术提供的是一种调控糜子香味的 badh2（甜菜碱醛脱氢酶2，betaine aldehyde dehydrogenase 2）基因、应用及方法。
2、为实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案为：
3、一种调控糜子香味的 badh2基因，所述 badh2基因包括 badh2-1基因和 badh2-2基因；
4、 badh2-1基因的序列如seq id no：1所示，基因登录号为pm13g12800；
5、 badh2-1基因全长5530 bp，含15个外显子，cds编码区长1518 bp，编码505个氨基酸，氨基酸序列如seq id no：4所示；
6、 badh2-2基因的序列如seq id no：2所示，基因登录号为pm14g14600；
7、 badh2-2基因全长5540 bp，含15个外显子，cds编码区长1518 bp，编码505个氨基酸，氨基酸序列如seq id no：5所示；
8、通过突变糜子中的 badh2-1基因和 badh2-2基因，能够提高糜子中香味物质2-ap含量，从而得到香味糜子。
9、一种调控糜子香味的 badh2基因的应用，所述应用是通过基因编辑技术使上述 badh2-1基因和 badh2-2基因同时失去活性或降低活性，以提高糜子中香味物质2-ap含量。
10、进一步的，所述应用是通过基因编辑的方式同时敲除 badh2-1基因和 badh2-2基因，以提高糜子中香味物质2-ap含量；
11、 badh2-1基因和 badh2-2基因中的基因编辑位点相同，序列如seq id no：3所示。
12、进一步的，所述应用是糜子 badh2基因编辑重组载体或包含 badh2基因编辑重组载体的重组菌株转化入糜子，使糜子的 badh2-1基因和 badh2-2基因同时失去活性或降低活性。
13、进一步的，所述应用是利用crispr/cas9基因编辑方法构建使糜子的 badh2-1基因和 badh2-2基因同时失去活性或降低活性的糜子 badh2基因编辑重组载体，再利用糜子 badh2基因编辑重组载体转化糜子，以使糜子的 badh2-1基因和 badh2-2基因同时失去活性或降低活性。
14、进一步的，糜子 badh2基因编辑重组载体选择sgrna多元载体系统的3个中间载体pjg310、pjg338和pjg471，以及一个骨架载体prlg103，最终构建成为含有1个编辑位点的糜子 badh2基因编辑重组载体。
15、进一步的，所述应用包括以下步骤：
16、构建糜子 badh2基因编辑重组载体；
17、利用糜子 badh2基因编辑重组载体构建包含 badh2基因编辑重组载体的重组菌株；所述重组菌株采用农杆菌，优选农杆菌agl1；
18、利用包含 badh2基因编辑重组载体的重组菌株转化糜子，以使糜子的 badh2-1基因和 badh2-2基因同时失去活性或降低活性。
19、进一步的，所述转化糜子是以糜子冀黍5号的成熟种子作为外植体，诱导胚性愈伤，再利用包含 badh2基因编辑重组载体的重组菌株进行转化，得使 badh2-1基因和 本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种调控糜子香味的BADH2基因，其特征在于，所述BADH2基因包括BADH2-1基因和BADH2-2基因；
2.一种调控糜子香味的BADH2基因的应用，其特征在于，所述应用是通过使权利要求1所述的BADH2-1基因和BADH2-2基因同时失去活性或降低活性，以提高糜子中香味物质2-AP含量。
3.根据权利要求2所述的调控糜子香味的BADH2基因的应用，其特征在于，所述应用是通过基因编辑的方式同时敲除BADH2-1基因和BADH2-2基因，以提高糜子中香味物质2-AP含量；
4.根据权利要求2所述的调控糜子香味的BADH2基因的应用，其特征在于，所述应用是糜子BADH2基因编辑重组载体或包含BADH2基因编辑重组载体的重组菌株转化入糜子，使糜子的BADH2-1基因和BADH2-2基因同时失去活性或降低活性。
5.根据权利要求2所述的调控糜子香味的BADH2基因的应用，其特征在于，所述应用是利用CRISPR/Cas9基因编辑方法构建使糜子的BADH2-1基因和BADH2-2基因同时失去活性或降低活性的糜子BADH2基因编辑重组载体
6.根据权利要求4或5所述的调控糜子香味的BADH2基因的应用，其特征在于，糜子BADH2基因编辑重组载体选择sgRNA多元载体系统的3个中间载体pJG310、pJG338和pJG471，以及一个骨架载体pRLG103，最终构建成为含有1个编辑位点的糜子BADH2基因编辑重组载体。
7.根据权利要求2-5中任一项所述的调控糜子香味的BADH2基因的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：
8.根据权利要求7所述的调控糜子香味的BADH2基因的应用，其特征在于，所述转化糜子是以糜子的成熟种子作为外植体，诱导胚性愈伤，再利用包含BADH2基因编辑重组载体的重组菌株进行转化，得使BADH2-1基因和BADH2-2基因同时失去活性或降低活性的转基因糜子株系。
9.一种调控糜子香味的方法，其特征在于，所述方法是种植BADH2-1基因和BADH2-2基因同时失去活性或降低活性的转基因糜子，以提高糜子中香味物质2-AP含量；
10.根据权利要求9所述的调控糜子香味的方法，其特征在于，所述BADH2-1基因和BADH2-2基因同时失去活性或降低活性的转基因糜子是利用基因编辑方法使BADH2-1基因和BADH2-2基因同时失去活性或降低活性的转基因糜子株系；
...【技术特征摘要】
1.一种调控糜子香味的badh2基因，其特征在于，所述badh2基因包括badh2-1基因和badh2-2基因；
2.一种调控糜子香味的badh2基因的应用，其特征在于，所述应用是通过使权利要求1所述的badh2-1基因和badh2-2基因同时失去活性或降低活性，以提高糜子中香味物质2-ap含量。
3.根据权利要求2所述的调控糜子香味的badh2基因的应用，其特征在于，所述应用是通过基因编辑的方式同时敲除badh2-1基因和badh2-2基因，以提高糜子中香味物质2-ap含量；
4.根据权利要求2所述的调控糜子香味的badh2基因的应用，其特征在于，所述应用是糜子badh2基因编辑重组载体或包含badh2基因编辑重组载体的重组菌株转化入糜子，使糜子的badh2-1基因和badh2-2基因同时失去活性或降低活性。
5.根据权利要求2所述的调控糜子香味的badh2基因的应用，其特征在于，所述应用是利用crispr/cas9基因编辑方法构建使糜子的badh2-1基因和badh2-2基因同时失去活性或降低活性的糜子badh2基因编辑重组载体，再利用糜子badh2基因编辑重组载体转化糜子，以使糜子的badh2-1基因和badh2-2基因同时失去活性或降低活性。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵辉，夏启玉，降彦苗，刘国庆，李海权，王根平，程汝宏，纪长绵，胡帅，杜晓希，张金鑫，刘亚男，郭安平，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院三亚研究院，
类型：发明
国别省市：
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