【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，涉及ceacam6的新用途，具体涉及基于ceacam6的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型的诊断与预后试剂盒中的用途。
技术介绍
1、ceacam6，全称癌胚抗原相关细胞粘附分子6(carcinoembryonic antigen-related celladhesion molecule 6)，是一种横跨细胞膜的糖蛋白分子，归属于重要的癌胚抗原(cea)家族。该分子由其基因编码而成，特征在于拥有一个细胞外区域及一个参与细胞黏连和信号传递的结构域，这一结构对于维持细胞间互动至关重要。研究表明，ceacam6及其抗体参与了结直肠癌、胰腺癌和乳腺癌的发生发展。
2、前列腺癌作为一种常见的男性恶性肿瘤，在我国正呈现发病及死亡率逐年上升的趋势。该病的发展很大程度上依赖于雄激素受体引导的信号传递途径，因而在晚期前列腺癌的治疗中，抑制雄激素作用的疗法(即雄激素剥夺治疗，adt)成为了核心手段。然而，随着时间推移，部分前列腺癌细胞能够适应低雄激素环境，通过恢复雄激素受体信号传导路径实现再生，进而演变成去势抵抗性前列腺癌(crpc)。在此过程中，一种特殊类型的crpc——神经内分泌型crpc(nepc)尤为引人关注，其特征包括雄激素受体表达下降甚至消失、不再依赖雄激素受体信号转导，并展现出神经内分泌特性。
3、关于ceacam6与去势抵抗性前列腺癌神经内分泌转化亚型(nepc)之间的关联及其作用机制，目前尚未有公开的研究报告。本专利技术通过临床数据和基础生物实验数据来研究ceacam6与去势抵抗性前
技术实现思路
1、本专利技术的目的是解决现有技术中对于去势抵抗性前列腺癌(crpc)神经内分泌亚型的诊断和预后判断所面临的挑战，特别是在缺乏对ceacam6与crpc神经内分泌亚型之间关联的深入理解和技术手段的情况下。
2、本专利技术提供了一种基于ceacam6指标的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型诊断与预后判断试剂及其试剂盒，填补了这一研究的空白。通过整合临床案例资料与深入的基础生物实验数据，本专利技术探讨了ceacam6与去势抵抗性前列腺癌神经内分泌转化亚型(nepc)之间的关系。通过本专利技术的试剂盒，可以定量或定性测定样本中ceacam6的表达水平，从而为临床诊断和预后评估提供依据。本专利技术的目的是提供一种基于ceacam6的生物标志物，用于制备诊断crpc神经内分泌亚型和判断患者预后的试剂中的应用。通过本专利技术，我们旨在解决现有技术中对ceacam6在crpc神经内分泌亚型中的角色和作用机理的研究不足的问题，并提供一种新的技术方案，以辅助诊断crpc的神经内分泌亚型，同时用于判断患者预后。预期的研究成果将填补这一领域的研究空白，为临床医生提供一种新的诊断工具，用以准确识别crpc的神经内分泌亚型，并可能助力于评估该亚型病患的预后情况，从而对治疗策略产生重要指导意义。
3、本专利技术的技术方案：
4、本专利技术首先提供了基于ceacam6指标的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型诊断与预后判断试剂及其应用。
5、所述试剂包括ceacam6抗体、包被液、抗体稀释液、封闭液、洗涤液、显色液、终止液和酶标二抗。
6、①包被液：0.05mol/l碳酸盐缓冲液(ph＝9.6)。0.75g碳酸钠,1.46g碳酸氢钠,加去离子水定容至500ml。
7、②抗体稀释液：0.02mol/lpbs(ph＝7.4)+0.2％bsa。0.2gbsa加配好的0.02mol/l磷酸盐缓冲液溶解定量至100g。0.02mol/l磷酸盐缓冲液(ph＝7.4)。0.2g磷酸二氢钾，2.90g磷酸氢二钠，8g氯化钠，加去离子水定容到1000ml。
8、③封闭液：0.05mol/l碳酸盐缓冲液(ph＝9.6)+2.0％质量比的bsa。2.0gbsa加配好的0.05mol/l碳酸盐缓冲液溶解定量至100g。
9、④洗涤液：0.02mol/lpbs(ph＝7.4)+0.05％tween-20。将50ultween-20溶入100ml0.02mol/l磷酸盐缓冲液中，震荡混匀。
10、⑤显色液：tmb-过氧化氢尿素溶液。a液(3，3’，5，5’-四甲基联苯胺，tmb):称取tmb20mg溶于10ml无水乙醇中，完全溶解后，加双蒸水至100ml。b液(0.1mol/l柠檬酸-0.2mol/l磷酸氢二钠缓冲液，ph＝5.0～5.4):称取na2hpo4·12h2o14.34g，柠檬酸1.87g溶于180ml双蒸水，加0.75％过氧化氢尿素1.28ml，定容至200ml，调ph至5.0～5.4。将a液和b液按1：l体积混合后即成tmb-过氧化氢尿素(应用)溶液。
11、⑥终止液：2mol/lh2so4溶液。10ml98％浓硫酸加入60ml双蒸水中，定容至100ml，室温保存。
12、⑦酶标二抗：hrp标记的兔抗人igg，应用时用抗体稀释液稀释3000倍。
13、所述试剂可以用于检测患者血清中ceacam6的含量。本专利技术采用酶联免疫吸附试验(elisa)检测ceacam6。
14、本专利技术同时提供了一种基于ceacam6指标的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型诊断与预后判断的试剂盒，该试剂盒包含以上所述的试剂。所述的试剂盒用于样本处理和试剂分配的辅助工具以及用于稳定性和质量控制的内部标准品。
15、在本专利技术的一些具体实施方案中，所述试剂中抗体是elisa实验中使用的现有的ceacam6抗体。
16、根据本专利技术的一些具体实施方案，当血清中ceacam6水平高于正常人均水平，亦即高于诊断阈值时，则诊断接受检测的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型患者为去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型患者；当血清中ceacam6水平高于正常人均水平时，高于预后阈值，则诊断接受检测的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型患者的预后差。
17、本专利技术的优点和有益效果：
18、利用本专利技术的试剂盒，依据前期研究的临床数据和基础生物实验数据中ceacam6与去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型之间的强相关性。基于ceacam6蛋白的表达量与去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型的这种相关性，以该蛋白作为分子标记对其表达量进行检测可以用于快速指导诊断去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型病人的判断。
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1.一种基于CEACAM6指标的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型诊断与预后判断试剂，其特征在于，所述试剂包括CEACAM6抗体、包被液、抗体稀释液、封闭液、洗涤液、显色液、终止液和酶标二抗。
2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，该试剂可用于检测患者血清中CEACAM6的含量。
3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，该试剂采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CEACAM6。
4.一种基于CEACAM6指标的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型诊断与预后判断的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含权利要求1至3中任一项所述的试剂。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，用于样本处理和试剂分配的辅助工具以及用于稳定性和质量控制的内部标准品。
【技术特征摘要】
1.一种基于ceacam6指标的去势抵抗性前列腺癌神经内分泌亚型诊断与预后判断试剂，其特征在于，所述试剂包括ceacam6抗体、包被液、抗体稀释液、封闭液、洗涤液、显色液、终止液和酶标二抗。
2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，该试剂可用于检测患者血清中ceacam6的含量。
3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋宁，王佑之，何彬，许阳阳，钱涛，郭涛，郭嘉宁，李俊波，曹骞，关赵凯，
申请(专利权)人：天津医科大学第二医院，
类型：发明
国别省市：
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