【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药鉴别领域，具体涉及鉴别垂盆草真伪的色谱方法。
技术介绍
1、垂盆草为景天科植物垂盆草sedum sarmentosum bunge的干燥全草，属于民间常用药，古代文献未有明确记载，《中国药典》于1977年始录。垂盆草性凉、味甘、淡。归肝、胆、小肠经。具利湿退黄，清热解毒之功效。用于湿热黄疸，小便不利，痈肿疮疡(国家药典委员会.中华人民共和国药典[m].中国医药科技出版社,2015)。现代药理研究表明，垂盆草具有护肝、抗肿瘤、免疫调节、雌激素样、抑制血管紧张素转化酶(ace)、增强肌力等作用；此外，其注射液具有抑菌的作用，提取物具有抗炎、抗氧化、延缓细胞衰老的作用。临床上，垂盆草多用于治疗各种急慢性肝病，颗粒剂用于预防性治疗妊娠期肝内胆汁淤积症，注射液用于治疗角膜溃疡，内服外用可用于治疗暑疖、痈患者，新鲜垂盆草可用于治疗老年压疮、带状疱疹，外敷还可用于治疗水火烫伤、毒蛇咬伤等(李慧娟等.垂盆草的研究进展[j].药学研究,2015,34(11):661～663)。
2、由于近年市场需求的增多，药材市场出现一些混乱情况，严重影响了垂盆草的药材质量，造成临床疗效的下降。市面上垂盆草的常见伪品有墨旱莲、马齿苋、景天三七、凹叶景天等。目前，对于垂盆草及其伪品的鉴别研究，多采用传统的性状鉴别、显微鉴别以及新型的dna条形码鉴别方法等。其中，吴福星采用传统性状的方法区分垂盆草与其常见的混淆品及伪品佛甲草、鼠曲草、鸭跖草、墨旱莲、马齿苋(吴福星.垂盆草和其混淆品及伪品的鉴别[j].云南中医中药杂志,2008(29):
3、但目前对垂盆草及其伪品墨旱莲、马齿苋、景天三七、凹叶景天的区别研究较少，并且以上研究对于区分垂盆草及其伪品均存在一些缺陷：首先，性状鉴别随着社会的发展和环境的改变，相应的性状鉴定指标记述尚未建立起来，加上性状鉴定要求鉴定者具有丰富的实践经验和长期的知识积累，给推广造成一定的难度；其次，显微鉴别存在分辨率低，对于多基原、品种混乱药材鉴定较为困难的缺点；另外，dna条形码鉴别存在灵敏度不足、操作性不强等缺点。
4、因此，有必要建立一种能够区分垂盆草及其伪品墨旱莲、马齿苋、景天三七、凹叶景天，并且能够对垂盆草质量进行专属性评价的方法。
技术实现思路
1、专利技术要解决的问题
2、为了解决现有技术存在的上述问题，本专利技术的目的在于提供一种鉴别垂盆草真伪的色谱方法，该方法适用于垂盆草及其伪品的药材、饮片、标准汤剂和/或配方颗粒，可以鉴别垂盆草与包括墨旱莲、马齿苋、景天三七、凹叶景天在内的伪品，为垂盆草药材的内在质量控制提供了新的分析手段。
3、用于解决问题的方案
4、[1].本专利技术提供一种鉴别垂盆草真伪的色谱方法，其中，所述方法包括以下步骤：
5、(1)垂盆草对照品溶液的制备：用提取溶剂对垂盆草对照品进行提取，收集提取液，得到垂盆草对照品溶液；
6、所述垂盆草对照品选自垂盆草药材、垂盆草饮片、垂盆草标准汤剂以及垂盆草配方颗粒中的一种或多种；
7、(2)对照品溶液的制备：分别取作为对照品的香草酸-4-β-d-葡萄糖苷和异鼠李素-3,7-o-二葡萄糖苷，溶解于溶剂中，得到对照品溶液；
8、(3)特征图谱的建立：采用超高效液相色谱法对步骤(1)中所述垂盆草对照品溶液和步骤(2)中所述对照品溶液进行检测，相应获得垂盆草对照品检测图谱和对照品检测图谱后，建立垂盆草对照品特征图谱，并根据所述对照品的色谱峰对所述特征图谱中的特征峰进行归属；
9、(4)供试品的处理与鉴别：取供试品，按照步骤(1)中的方法得到供试品溶液，再按照步骤(3)中的方法建立供试品特征图谱；将所述供试品特征图谱与步骤(3)中所述垂盆草对照品特征图谱进行比对，鉴别所述供试品为垂盆草或伪品；
10、所述供试品选自待测药材、饮片、标准汤剂以及配方颗粒中的一种或多种。
11、[2].根据[1]所述的方法，其中，步骤(1)中，所述提取溶剂为甲醇、水或二者混合物；优选地，所述提取溶剂为30％～70％v/v的甲醇水溶液；
12、和/或，
13、所述提取的方式为超声处理、振摇提取、加热回流提取；优选地，所述提取的方式为超声提取，所述超声提取的功率为200～300w，所述超声提取的频率为35～45khz，所述超声提取的时间为30～120min；
14、和/或，
15、所述垂盆草对照品与所述提取溶剂的质量体积比为1g：(5～50ml)。
16、[3].根据[1]或[2]所述的方法，其中，步骤(2)中，所述溶剂为甲醇或其水溶液；优选地，所述溶剂为甲醇或50％v/v以上的甲醇水溶液，
17、和/或，
18、所述对照品溶液的浓度为5～40μg/ml。
19、[4].根据[1]～[3]任一技术方案所述的方法，其中，步骤(3)中，
20、所述超高效液相色谱法的色谱条件包括：
21、固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；
22、流动相：以乙腈为流动相a，以甲酸水溶液为流动相b；
23、洗脱方式：梯度洗脱。
24、[5].根据[4]所述的方法，其中，步骤(3)中，以0.05％～0.20％v/v的甲酸水溶液为流动相b；
25、和/或，
26、所述梯度洗脱的洗脱程序如下：
27、
28、[6].根据[4]或[5]所述的方法，其中，所述超高效液相色谱法的色谱条件还包括：柱温为20～35℃，和/或，流速为0.25～0.30ml/min，和/或，检测波长为220～300nm。
29、[7].根据[1]～[6]任一技术方案所述的方法，其中，步骤(3)中，
30、所述垂盆草对照品特征图谱包括9个特征峰，其中，特征峰3对应香草酸-4-β-d-葡萄糖苷对照品的色谱峰，特征峰9对应异鼠李素-3,7-o-二葡萄糖苷对照品的色谱峰；
31、优选地，以特征峰3为参照本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鉴别垂盆草真伪的色谱方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述提取溶剂为甲醇、水或二者混合物；优选地，所述提取溶剂为30％～70％v/v的甲醇水溶液；
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述溶剂为甲醇或其水溶液；优选地，所述溶剂为甲醇或50％v/v以上的甲醇水溶液，
4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，以0.05％～0.20％v/v的甲酸水溶液为流动相B；
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法的色谱条件还包括：柱温为20～35℃，和/或，流速为0.25～0.30mL/min，和/或，检测波长为220～300nm。
7.根据权利要求1～6任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，
8.根据权利要求1～7任一项所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，
9.根据权利要求1～8任一项所
10.权利要求1～9任一项所述的方法在垂盆草及其伪品的质量检测中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种鉴别垂盆草真伪的色谱方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述提取溶剂为甲醇、水或二者混合物；优选地，所述提取溶剂为30％～70％v/v的甲醇水溶液；
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述溶剂为甲醇或其水溶液；优选地，所述溶剂为甲醇或50％v/v以上的甲醇水溶液，
4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，以0.05％～0.20％v/v的甲酸水溶液为流动...
【专利技术属性】
技术研发人员：何雪霞，翟燕娟，张云天，张宇静，李松，陈盛君，周海琴，
申请(专利权)人：江阴天江药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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