【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及真菌多糖应用，特别涉及一种花脸香蘑多糖及其制备方法和应用。
技术介绍
1、食用菌俗称蘑菇，是一种大型真菌，其子实体中富含蛋白质、维生素、矿质元素、氨基酸以及多糖等营养物质。食用菌多糖具有抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、促进免疫细胞的增殖分化和淋巴因子的分泌、激活补体等免疫调节等生物活性等特点，安全无毒，其在保健食品和生物医药等领域受到广泛的关注。而且食用菌多糖是一种非特异性免疫增强剂，它可通过多种途径提高机体免疫功能，而对机体没有副作用。
2、花脸香蘑(lepistasordida)隶属伞菌目(agaricales)、口蘑科(tricholomatacete)、香蘑属(lepista)，主要分布于中国的云南、黑龙江、辽宁、四川、贵州等地，其香味浓郁、口感清脆、色泽怡人。花脸香蘑菌盖直径4cm-8cm，紫罗兰色，粗糙至具有麻点，菌柄长4cm-6.5cm，实心，基部多弯曲；菌肉淡紫罗兰色，较薄，水浸状；菌褶直生，有时稍弯生或稍延生；子实体幼嫩时均呈紫色或淡紫色，成熟后容易褪色，多变为乳白色或粉紫色，即使同一个种在不同发育阶段也会出现不同的表型特征。已有研究发现，花脸香蘑的提取物具有一定的抗氧化及抗肿瘤活性。此外，从该菌发酵液中分离得到的两个二萜类化合物(lepistal、lepistol)具有诱导人贫血性白血病细胞分化的生物活性，其中lepistal还具有抗细菌和抗真菌的作用。
3、胡欣蕾等在《花脸香蘑菌丝体多糖提取条件优化及其体外免疫活性》([j].食品科学,2017,38(20):185-1
4、luo等在structural characterization of an immunoregulatorypolysaccharide from thefruiting bodies of lepistasordida.([j].carbohydratepolymers,2012,88:820–824.)报道了以花脸香蘑为实验材料，采用高效凝胶渗透色谱法(hpgpc)检测其多糖lsp的分子量(mw)约为4×104da。根据傅里叶变换红外(ft-ir)光谱、部分酸水解、高碘酸盐氧化和smith降解、甲基化和气相色谱分析，结果表明lsp以(1→6)-α-d-葡萄糖残基和(1→2,6)-α-d-葡萄糖残基为主链，以(1→)-α-d-半乳糖残基为支链，其摩尔比为2：1.1：0.9。体外细胞试验表明，lsp能够显著地提高小鼠巨噬细胞分泌no和tnf-α(p<0.05)，具有一定的免疫活性。
5、可见，现有技术中缺少对花脸香蘑多糖的精细结构、花脸香蘑多糖在免疫调节活性中应用的研究。
技术实现思路
1、本专利技术克服了现有技术中存在的缺陷，提供了一种花脸香蘑多糖及其制备方法和应用。
2、本专利技术的第一方面提供了一种花脸香蘑多糖(ls-p)，其为由葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖，其中所述葡萄糖、半乳糖的残基的摩尔比约为8:5。
3、进一步地，所述多糖的化学结构中包含由1,4-连接的d-葡萄糖残基、1,4-连接的d-半乳糖残基、1,6-连接的半乳糖残基、2-连接的α-d-葡萄糖残基、1,4,6-连接的葡萄糖残基、1,6-连接的葡萄糖残基。
4、进一步地，所述多糖的化学结构中包含由1,6-连接的葡萄糖残基、1,4-连接的d-半乳糖残基、1,4-连接的d-葡萄糖残基、1,6-连接的半乳糖残基构成的主链，由1,4,6-连接的葡萄糖残基、2-连接的α-d-葡萄糖残基构成的侧链。
5、进一步地，所述多糖的重均分子量为8000-20000da(如8000da、8500da、9000da、9500da、10000da、11000da、12000da、13000da、14000da、15000da、16000da、17000da、18000da、19000da、20000da)，优选地，为10000-15000da。
6、在本专利技术的一个实施例中，该多糖的重均分子量为13135da。
7、进一步地，所述多糖包含如下结构式：
8、
9、其中，n为1-15的整数(如5、6、7、8、9、10)，优选地，n为4-8的整数为其中，glcp为葡萄糖，galp为半乳糖。
10、本专利技术的第二方面提供了一种组合物，所述组合物包含第一方面所述的多糖。
11、本专利技术的第三方面提供了一种如第一方面所述的花脸香蘑多糖的制备方法，所述制备方法包括以花脸香蘑子实体为原料进行提取的步骤。
12、进一步优选地，所述制备方法包括通过水提醇沉法提取得到粗多糖的步骤。
13、进一步优选地，所述制备方法还包括(例如通过离子交换柱层析)对粗多糖进行纯化的步骤。
14、在本专利技术的一个实施方式中，所述制备方法包括如下步骤：
15、(1)取花脸香蘑子实体粉末，用热水浸提，将所得水提物依次经浓缩、醇沉、烘干得到粗多糖；
16、(2)将步骤(1)所得粗多糖通过离子交换柱层析，洗脱，收集洗脱液；
17、(3)将步骤(2)所得洗脱液用透析袋进行透析浓缩。
18、进一步地，所述制备方法还包括步骤(4)，具体为将完成步骤(3)后的透析袋内液体冷冻干燥。
19、进一步地，步骤(1)中，所述浸提的温度可以为80-100℃(如80、85、90、95、100℃)；在本专利技术的一个实施例中，该浸提温度为98℃。
20、进一步地，步骤(1)中，花脸香蘑子实体粉末与水的质量比(w/v，mg/ml)为1:1-10(如1:1、1:2、1:3、1:5、1:8、1:10)；在本专利技术的一个实施例中，该质量比为1:3。
21、进一步地，步骤(1)中，所述浸提的次数为1-5次(如1、2、3、4、5次)；在本专利技术的一个实施例中，该浸提次数为3次。
22、进一步地，步骤(1)中，每次浸提时间为1-10小时(如1、3、6、8、10小时)；在本专利技术的一个实施例中，每次浸提时间为6小时。
23、在本专利技术的一个实施例中，步骤(1)中的浸提步骤可以包括：取花脸香蘑子实体粉末，与水混合，并置于水浴中煮沸。
24、进一步地，步骤(1)中，醇沉步骤中，醇与水提物浓缩液的体积比为1-10:1(如1:1、3:1、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种花脸香蘑多糖，其特征在于，所述多糖为由葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖，其中所述葡萄糖、半乳糖的残基的摩尔比约为8:5；
2.如权利要求1所述的多糖，其特征在于，所述多糖的重均分子量为8000-20000Da，优选地，为10000-15000Da，特别优选地，为13135Da。
3.如权利要求1所述的多糖，其特征在于，所述n为4-8的整数。
4.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1-3任一项所述的多糖。
5.如权利要求1所述的多糖的制备方法，其特征在于，包括以花脸香蘑子实体为原料进行提取的步骤：
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述浸提温度为80-100℃；
8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述离子交换柱为纤维素柱，其填料为DEAE纤维素；
9.根据权利要求1-3任一项所述的多糖或权利要求4所述的组合物或权利要求5-9任一项所述制备方法制备的多糖的应
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述产品中花脸香蘑多糖的终浓度为5-20μg/mL。
...【技术特征摘要】
1.一种花脸香蘑多糖，其特征在于，所述多糖为由葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖，其中所述葡萄糖、半乳糖的残基的摩尔比约为8:5；
2.如权利要求1所述的多糖，其特征在于，所述多糖的重均分子量为8000-20000da，优选地，为10000-15000da，特别优选地，为13135da。
3.如权利要求1所述的多糖，其特征在于，所述n为4-8的整数。
4.一种组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1-3任一项所述的多糖。
5.如权利要求1所述的多糖的制备方法，其特征在于，包括以花脸香蘑子实体为原料进行提取的步骤：
【专利技术属性】
技术研发人员：丁祥，李欣霖，张丁，青昕，赵辉，何雪梅，李彪，孙传奇，马洁，吴俊洁，孙正澳，任兴蕊，侯怡铃，
申请(专利权)人：西华师范大学，
类型：发明
国别省市：
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