【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于牙科盖髓材料，具体涉及一种抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂及其制备方法。
技术介绍
1、深龋是发生在牙齿上最常见的疾病之一，常导致牙髓组织的感染和损伤。它是由于致龋菌在牙本质上定植并形成生物膜，使得保护牙髓组织的牙本质受损导致细菌侵入牙髓而引起的牙髓炎症和坏死。活髓保存是治疗深龋的重要手段之一。
2、活髓保存术是通过使用盖髓材料覆盖近髓的牙本质或暴露的牙髓组织，促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化，从而形成修复性牙本质，有助于保护牙髓组织免受外界的影响，并为后续的牙体修复提供良好的硬组织基础，达到保护牙髓、保存牙齿活力的目的。因此，盖髓材料的性能是决定活髓保存术疗效的关键因素，而活髓保存术的成功与否很大程度上取决于牙髓中的感染能否被彻底消除，因为细菌污染会对牙髓-牙本质复合体的修复产生不良影响。
3、目前适用的生物活性盖髓材料，如氢氧化钙和三氧化矿物凝聚体，已被证明具有一定的抗菌特性，并能够促进牙髓细胞的成牙本质分化和诱导修复性硬组织桥的形成。然而，一些研究发现，这些盖髓材料对某些微生物的抗菌作用有限，这可能导致活髓保存术的失败。
技术实现思路
1、针对上述现有技术，本专利技术提供一种抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂及其制备方法，解决了盖髓材料无法同时具备抗炎促修复作用和长效抗菌作用的问题。
2、为了达到上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：提供一种抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，包括以下步骤：
3、s1：
4、s2：将溶液一蒸发浓缩后，再以10000~15000rpm的转速离心15min，取下层沉淀在30℃条件下干燥24h，得agnps-rgo粉末；将agnps-rgo粉末重新分散于无水乙醇，得agnps-rgo溶液；
5、s3：取gelma和pbs混合，35~40℃条件下避光水浴并以300~500rpm的转速搅拌1h至完全溶解，得gelma水凝胶前驱体溶液；
6、s4：取da和tris-hcl溶液混合，常温下避光水浴并以300~500rpm的转速搅拌30min，得聚多巴胺溶液；
7、s5：将agnps-rgo溶液、gelma水凝胶前驱体溶液、聚多巴胺溶液和gap19溶液混合，再避光以300~500rpm的转速搅拌1h，得agnps-rgo/pda/gelma@gap19分散液；
8、s6：将agnps-rgo/pda/gelma@gap19分散液以405nm光源照射20~30s，得抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂。
9、本专利技术的有益效果是：本专利技术中先将agnps胶体与rgo粉末混合超声，得到agnps-rgo，在agnps和rgo协同作用引起的物理破坏、活性氧生成和酶失活等多重机制的作用下，复合材料表现出优异的抑制和破坏金黄色葡萄球菌生物被膜的性能，并且能够加速细菌生物被膜感染的伤口愈合；再将制备好的agnps-rgo与pda、gap19一起添加到gelma水凝胶中形成agnps-rgo/pda/gelma@gap19水凝胶（抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂），gelma有良好的物理化学性质，可填充无机纳米颗粒以提高机械性能；gap19作为一种针对cx43半通道的特异性抑制剂，可阻断其介导的半通道活性，通过抑制tlr4-nf-κb信号通路减轻脂多糖（lps）诱导的人牙髓细胞（hdpcs）炎症反应，并能够促进感染状态下hdpcs的成牙本质分化；pda的加入可作为主要的粘合剂成分；该制备方法简便易行，制备的盖髓材料保存方便，适合工业化生产。
10、在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。
11、进一步，蒸发浓缩工艺为使用旋转蒸发仪以150rpm的转速，50℃水浴的条件下蒸发浓缩2~3h。
12、进一步，agnps溶液的浓度为0.1mg/ml，rgo粉末和agnps溶液的料液比为1mg:2~3ml。
13、rgo粉末和agnps溶液的料液比为1mg:2~3ml。
14、进一步，gelma和pbs的料液比为0.8~1g:10ml。
15、进一步，da和tris-hcl溶液的料液比为2mg:1ml。
16、进一步，agnps-rgo溶液、gelma水凝胶前驱体溶液、聚多巴胺溶液和gap19溶液的比例为10~15:10:1:2~3。
17、采用进一步技术方案的有益效果是：利用合理的料液比使原料混合后得到的产品具有更佳的效果。
18、本专利技术还公开了采用该制备方法制得的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂。
19、本专利技术的有益效果是：agnps独特的量子尺寸和表面效应赋予其强大的穿透能力。它们能充分破坏微生物膜，抗菌性能优于传统抗菌剂。rgo的存在可保持agnps稳定的性能而不发生团聚，因此将银纳米颗粒负载到rgo上，可有助于增强其抗菌性能，gap19是由cx43胞质环（cl）衍生的9个氨基酸组成的多肽，通过诱导cx43的降解来阻断细胞间的交换，是cx43半通道的特异性抑制剂。在正常成牙本质细胞及分化过程中cx43均有表达，但在龋齿损伤中呈现异常表达。cx43通过间隙连接通道和半通道进行物质交换，通常情况下，半通道处于闭合状态，以防止atp丢失和钙离子内流，但在生理条件下，它可以短暂开放以发挥生理功能。当机体受到炎症或钙离子浓度变化等相关因素刺激时，半通道可能过度开放，从而促进疾病发展。因此，短暂的半通道开放是正常的，而失控的开放则可能有害。在生理状态下，cx43介导的间隙连接通过在相邻细胞间传递钙离子，进而促进牙髓干细胞向成牙本质细胞分化和矿化，可能与cx43的间隙连接通道活性相关；而在病理状态下，抑制cx43半通道能够减弱lps诱导的hdpcs炎症反应并促进其成牙本质分化。因此cx43参与并调控牙髓组织的炎症和修复反应，但并非单纯依赖表达水平变化发挥作用，而有可能是分别通过形成半通道和间隙连接发挥功能。由此可见，在感染状态下，阻断cx43半通道能够抑制炎症并促进组织修复。因此，gap19作为cx43半通道的特异性抑制剂，在不影响间隙连接通道的情况下能够抑制牙髓的炎症反应，从而促进其修复。pda是一种重要的天然黑色素样物质，它因易制造、良好的的生物降解性、生物相容性和粘附性而备受关注。因此本专利技术的新型盖髓材料能够在抗菌的同时抑制牙髓炎症并促进其修复。
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1.一种抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于：所述蒸发浓缩工艺为使用旋转蒸发仪以150rpm的转速，50℃水浴的条件下蒸发浓缩2~3h。
3.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于：所述AgNPs溶液的浓度为0.1mg/mL，所述rGO粉末和AgNPs溶液的料液比为1mg:2~3mL。
4.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于：所述GelMA和PBS的料液比为0.8~1g:10mL。
5.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于：所述DA和Tris-HCl溶液的料液比为2mg:1mL。
6.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于：所述AgNPs-rGO溶液、GelMA水凝胶前驱体溶液、聚多巴胺溶液和Gap19溶液的体积比为10~15:10:1:2~3。p>
7.权利要求1~6任一项所述的制备方法制得的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂。
...【技术特征摘要】
1.一种抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于：所述蒸发浓缩工艺为使用旋转蒸发仪以150rpm的转速，50℃水浴的条件下蒸发浓缩2~3h。
3.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制备方法，其特征在于：所述agnps溶液的浓度为0.1mg/ml，所述rgo粉末和agnps溶液的料液比为1mg:2~3ml。
4.根据权利要求1所述的抗菌促牙本质修复的复合水凝胶盖髓剂的制...
【专利技术属性】
技术研发人员：李广文，李适廷，兰小蓉，李若彤，陈世超，李红彩，何圆培，宋鑫磊，田青，刘彩霞，杨朝艳，邓云艺，傅靖城，王孜卓，
申请(专利权)人：西南医科大学附属口腔医院，
类型：发明
国别省市：
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