【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种靶向foxa3的抗体及其应用。
技术介绍
1、foxa3，全称forkhead box a3，该基因编码dna结合蛋白的叉头类成员。foxa3是肝细胞核转录因子家族成员，在代谢稳态中起关键作用，是肝脏特异性转录物(如白蛋白和转甲状腺素)的转录激活剂，与染色质相互作用[1]。在将成纤维细胞转分化为肝样细胞的过程中，foxa3作为一个重要的转录因子参与其中，对肝养细胞药物代谢能力和蛋白表达能力的获得必不可少。目前市售foxa3抗体种类较少，尚不能满足市场需求。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是为了克服现有技术缺少灵敏度高、特异性好的稳定foxa3抗体的技术问题，提供了一种靶向foxa3的抗体及其应用。本专利技术的抗foxa3单克隆抗体，可用于体外检测细胞中foxa3蛋白的表达水平，特异性良好，抗体浓度和纯度高，可用于体外分析蛋白或组织中foxa3蛋白的表达水平，具有良好的稳定性。
2、本专利技术通过以下技术方案解决上述技术问题。
3、本专利技术的第一方面提供一种靶向foxa3的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别如seqid no:1、seq id no:2和mdy所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别如seq id no:5、seq id no:6和seq id no:7所示的lcdr1、lcdr2和lcdr
4、本专利技术一些实施方案中，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:3所示或为与seq id no:3具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列。
5、本专利技术一些实施方案中，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:8所示或为与seq id no:8具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列。
6、本专利技术一些实施方案中，所述抗体为全长抗体、fab、fab’、f(ab’)2、scfv、fv或多特异性抗体。
7、本专利技术中，当所述抗体为全长抗体时，所述全长抗体的重链恒定区源自人源抗体的重链或其变体，所述全长抗体的轻链恒定区源自人源抗体的κ链或者λ链或其变体。
8、本专利技术一些具体实施方案中，所述重链恒定区的氨基酸序列如seq id no:23所示或为与seq id no:23具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列。
9、本专利技术一些具体实施方案中，所述轻链恒定区的氨基酸序列如seq id no:25所示或为与seq id no:25具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列。
10、本专利技术的第二方面提供一种分离的核酸，所述核酸编码如第一方面所述的抗体或其抗原结合片段。
11、本专利技术一些具体实施方案中，编码所述hcdr1的核苷酸序列如seq id no:10所示，编码所述hcdr2的核苷酸序列如seq id no:11所示，编码所述hcdr3的核苷酸序列为atggactac。
12、本专利技术一些具体实施方案中，编码所述lcdr1的核苷酸序列如seq id no:14所示，编码所述lcdr2的核苷酸序列如seq id no:15所示，编码所述lcdr3的核苷酸序列如seq idno:16所示。
13、本专利技术一些实例中，编码所述重链可变区的核苷酸序列如seq id no:12所示。
14、本专利技术一些实例中，编码所述轻链可变区的核苷酸序列如seq id no:17所示。
15、本专利技术的第三方面提供一种重组表达载体，所述重组表达载体包含如第二方面所述的核酸。
16、本专利技术一些实施方案中，所述重组表达载体为质粒、粘粒、噬菌体或病毒载体。
17、本专利技术一些具体实施方案中，所述病毒载体为逆转录病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体或腺相关病毒载体。
18、本专利技术的第四方面提供一种细胞，所述细胞中包含如第三方面所述的重组表达载体或如第二方面所述的核酸；或表达如第一方面所述的抗体或其抗原结合片段。
19、本专利技术一些实施方案中，所述细胞为原核细胞或真核细胞。
20、本专利技术一些较佳实施方案中，所述细胞选自酵母细胞、哺乳动物细胞或适用于制备抗体或其抗原结合片段的其它细胞；所述哺乳动物细胞例如为hek293细胞。
21、本专利技术的第五方面提供一种制备靶向foxa3的抗体或其抗原结合片段的方法，所述方法包括培养如第四方面所述的细胞，从培养物中获得靶向foxa3的抗体或其抗原结合片段。
22、本专利技术的第六方面提供一种试剂盒，所述试剂盒包括如第一方面所述的抗体或其抗原结合片段。
23、本专利技术一些实施方案中，所述试剂盒还包括检测所述抗体或其抗原结合片段与抗原结合的试剂。
24、本专利技术的第七方面提供一种检测foxa3的方法，所述方法包括将如第一方面所述的抗体或其抗原结合片段与待测样本进行接触的步骤。
25、本专利技术一些实施方案中，所述方法为非诊断目的的，例如在实验室进行抗体检测、免疫学检测方法的开发。
26、本专利技术的第八方面提供一种如第一方面所述的抗体或其抗原结合片段、如第二方面所述的核酸、如第三方面所述的重组表达载体或者如第四方面所述的细胞在制备foxa3检测试剂中的应用。
27、在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本专利技术各较佳实例。
28、本专利技术所用试剂和原料均市售可得。
29、本专利技术的积极进步效果在于：
30、本专利技术的抗foxa3单克隆抗体灵敏度高，特异性良好，抗体浓度和纯度高，可用于体外分析蛋白或组织中foxa3蛋白的表达水平，具有良好的稳定性，有广泛的使用前景。
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1.一种靶向FOXA3的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1、SEQID NO:2和MDY所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ IDNO:5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或为与SEQ ID NO:3具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列；和/或，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示或为与SEQ ID NO:8具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列。
3.如权利要求2
4.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1～3任一项所述的抗体或其抗原结合片段；
5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含如权利要求4所述的核酸；
6.一种细胞，其特征在于，所述细胞中包含如权利要求5所述的重组表达载体或如权利要求4所述的核酸；或表达如权利要求1～3任一项所述的抗体或其抗原结合片段；
7.一种制备靶向FOXA3的抗体或其抗原结合片段的方法，其特征在于，所述方法包括培养如权利要求6所述的细胞，从培养物中获得靶向FOXA3的抗体或其抗原结合片段。
8.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1～3任一项所述的抗体或其抗原结合片段；
9.一种检测FOXA3的方法，其特征在于，所述方法包括将如权利要求1～3任一项所述的抗体或其抗原结合片段与待测样本进行接触的步骤；
10.一种如权利要求1～3任一项所述的抗体或其抗原结合片段、如权利要求4所述的核酸、如权利要求5所述的重组表达载体或者如权利要求6所述的细胞在制备FOXA3检测试剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种靶向foxa3的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别如seq id no:1、seqid no:2和mdy所示的hcdr1、hcdr2和hcdr3；所述轻链可变区包含氨基酸序列分别如seq idno:5、seq id no:6和seq id no:7所示的lcdr1、lcdr2和lcdr3。
2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:3所示或为与seq id no:3具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列；和/或，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:8所示或为与seq id no:8具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％序列同一性的氨基酸序列。
3.如权利要求2所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体为全长...
【专利技术属性】
技术研发人员：田娥，杨晨曦，安晓辉，熊子龙，
申请(专利权)人：上海微知卓生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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