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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业生物,特别是涉及一种大飞扬草组织再生培养的快速繁殖方法。
技术介绍
1、大飞扬草是大戟科大戟属的一年生草本植物,主要分布在热带和亚热带地区。其形态直立向上生长,茎高可达50厘米,细长有毛,叶对生呈椭圆形或长圆披针形,有边缘锯齿状和深色的上表面。在我国,飞扬草作为一味传统中药材,具有清热、利湿、消肿、解毒的功效,可主治肺痈、乳痈、痢疾、泄泻、热淋、血尿、湿疹、脚癣、皮肤瘙痒、疔疮肿毒、牙疳等疾病,对产后少乳的病状也有很好的治疗效果。但目前对大飞扬草的采集均来自野外,材料收集受到了地域和气候限制,促使其利用率低,组织培养的方法除了可提供大规模种苗,还可保持优良个体的有利性状。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种大飞扬草组织再生培养的快速繁殖方法,以解决上述现有技术存在的问题,通过探究不同外植体选择、各组培阶段不同激素配比等关键因素,建立并优化大飞扬草组织再生培养中愈伤诱导、不定芽及生根等步骤,成功构建了一种大飞扬草组织再生培养的快速繁殖方法,该方法增殖系数高,操作简易可控,短期内可获得大量的飞扬草幼苗。
2、为实现上述目的,本专利技术提供了如下方案:
3、本专利技术提供一种大飞扬草组织再生培养的快速繁殖方法,包括以下步骤:
4、以大飞扬草叶片为外植体,接种愈伤诱导培养基中进行愈伤组织诱导;所述愈伤诱导培养基包括以下组分:ms液体培养基+萘乙酸+6-苄氨基嘌呤+蔗糖+琼脂;
5、将诱导成功的愈伤上组织接种愈伤分化
6、已诱导生芽的分化愈伤组织接种生根培养基,诱导生根;所述生根培养基包括以下组分:ms液体培养基+萘乙酸+蔗糖;
7、生根后进行移栽炼苗,获取大飞扬草再生苗。
8、优选的是,所述愈伤诱导培养基包括以下浓度的组分:ms液体培养基+0.5mg/l萘乙酸+1mg/l 6-苄氨基嘌呤+30g/l蔗糖+6g/l琼脂。
9、优选的是,所述愈伤组织诱导的条件为:28℃黑暗条件下的恒温培养5-7d。
10、优选的是,所述愈伤分化培养基包括以下浓度的组分:ms液体培养基+0.05mg/l萘乙酸+3mg/l 6-苄氨基嘌呤+2mg/l赤霉素+30g/l蔗糖。
11、优选的是,所述诱导生芽的条件为:25℃,光照强度为10000lux,8h光照/16h黑暗。
12、优选的是,所述生根培养基包括以下浓度的组分:ms液体培养基+0.1mg/l萘乙酸+10g/l蔗糖。
13、优选的是,所述诱导生根的条件为:25℃,光照强度为10000lux,8h光照/16h黑暗,培养30天。
14、优选的是,当不定芽生根后,根长长至3-5cm,植株高4-6cm时进行移栽炼苗;移栽炼苗的基质是由营养土和蛭石按照体积比1:1配制而成,其中蛭石使用前要采用不含维生素的ms液体培养基浸透。
15、优选的是,所述叶片来源于大飞扬草无菌苗,所述大飞扬草无菌苗是采用大飞扬草成熟种子消毒后接种ms固体培养基,在28℃、光照强度为15000lux、光照时间为16h光照/8h黑暗的条件下培养得到;所述ms固体培养基为:ms液体培养基+30g/l蔗糖+6g琼脂。
16、本专利技术公开了以下技术效果:
17、本专利技术通过对外植体的选择、诱导愈伤组织最佳激素的组合、诱导愈伤分化最佳激素配比及诱导不定芽生根中使用萘乙酸的最适浓度等关键因素进行筛选和优化,得到了最适宜大飞扬草快速繁殖的方法,为飞扬草或大戟科大戟属的草本植物的组织再生体系的建立和优化提供了充足的实验依据,极大的提高了大飞扬草的组织再生植株的存活率,缩短种植周期,有利于大规模种植。
18、本专利技术通过优化后的再生组织快速繁殖条件,得到了大飞扬草再生苗,改变了目前大飞扬草依赖于野生资源的现状,为大飞扬草的大规模种植提供了新的方法。
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1.一种大飞扬草组织再生培养的快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述愈伤诱导培养基包括以下浓度的组分:MS液体培养基+0.5mg/L萘乙酸+1mg/L 6-苄氨基嘌呤+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述愈伤组织诱导的条件为:28℃黑暗条件下的恒温培养5-7d。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述愈伤分化培养基包括以下浓度的组分:MS液体培养基+0.05mg/L萘乙酸+3mg/L 6-苄氨基嘌呤+2mg/L赤霉素+30g/L蔗糖。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述诱导生芽的条件为:25℃,光照强度为10000lux,8h光照/16h黑暗。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生根培养基包括以下浓度的组分:MS液体培养基+0.1mg/L萘乙酸+10g/L蔗糖。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述诱导生根的条件为:25℃,光照强度为10000lux,8h光照/16h黑暗,培养30天。
...【技术特征摘要】
1.一种大飞扬草组织再生培养的快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述愈伤诱导培养基包括以下浓度的组分:ms液体培养基+0.5mg/l萘乙酸+1mg/l 6-苄氨基嘌呤+30g/l蔗糖+6g/l琼脂。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述愈伤组织诱导的条件为:28℃黑暗条件下的恒温培养5-7d。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述愈伤分化培养基包括以下浓度的组分:ms液体培养基+0.05mg/l萘乙酸+3mg/l 6-苄氨基嘌呤+2mg/l赤霉素+30g/l蔗糖。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述诱导生芽的条件为:25℃,光照强度为10000lux,8h光照/16h黑暗。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:程汉,吴挺开,强润润,李志民,邓治,安泽伟,吴文冠,王小波,袁渊,许东,王鑫,
申请(专利权)人:中国热带农业科学院三亚研究院,
类型:发明
国别省市:
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