【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物外泌体提取，具体涉及一种小球藻外泌体的制备方法及其产品和应用。
技术介绍
1、小球藻是色球藻目中的常见植物，属绿藻门，含多种营养成分，可以作为营养补充品服用，具有抗衰老、养颜等功效，其富含维生素、矿物质、氨基酸等物质，可以完整的修复受损的细胞组织，提高正常细胞的再生能力达到25％以上，帮助肌肤促进胶原带白和弹力蛋白合成，起到修护和抗老化的作用，还具有强大的抗氧化和清除自由基的功能，使皮肤恢复水润光泽，因此被越来越多的被用于护肤产品中。
2、cn114805485a公开了一种含有小球藻活性肽的抗衰老的化妆品，是将小球藻粉溶于热水，溶解后进行高压萃取，萃取液用木瓜蛋白酶进行酶解，酶解液经超滤管进行超滤分离，经纯化后收集冻干，制备成小球藻活性肽提取物冻干粉。该专利技术所提供的小球藻活性肽能够延缓过度氧化造成的皮肤自然衰老和uv照射造成的皮肤光老化，同时促进细胞增殖，增强皮肤代谢，延缓皮肤衰老。
3、cn110801413a公开了一种小球藻发酵提取物及其制备方法。该专利技术利用植物乳杆菌等菌种的培养液对小球藻粉进行液体发酵培养，得发酵产物，发酵产物经过离心、过滤、除菌，得小球藻粉发酵提取物。所述方法反应条件温和，制备工艺简单，无添加任何化学成分。通过实验证明，上述方法制备的小球藻粉发酵提取物，富含蛋白质、粗多糖、总氨基酸和叶黄素等功效成分，具良好的抗自由基、改善皮肤刺激及抗衰老等功效，且生物安全性高，可广泛应用到的各类化妆品中。
4、现有技术的化妆品中使用的小球藻也越来越多，但鲜有使
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种小球藻外泌体的制备方法及其产品和应用。
2、为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、第一方面，本专利技术提供了一种小球藻外泌体的制备方法，所述制备方法包括：
4、(1)将极微小球藻与分离缓冲液混合后进行破壁处理，得到细胞破碎液；
5、(2)将细胞破碎液离心后保留上清液；
6、(3)将上清液过滤后得到所述小球藻外泌体。
7、本专利技术提供的方法以极微小球藻为原材料，然后将极微小球藻与分离缓冲液混合后通过破壁、离心和过滤处理，解决了小球藻外泌体制备过程纯度不高的问题，最终得到的含有高水平的蛋白质、多糖、氨基酸等活性成分，不仅可以具有优异的保湿抗衰老功效，而且还具有抗炎抗敏功效，可用于敏感肌肤，帮助减少红肿和刺激现象。
8、优选地，所述分离缓冲液包括tris、na2hpo4、nacl、吐温80、山梨醇和水。
9、优选地，所述分离缓冲液以摩尔浓度计包括tris 15-20mm、na2hpo4 20-40mm、nacl1-3mm、吐温80 0.1-2mm、山梨醇0.1-1mm。
10、例如，所述分离缓冲液中所述tris的摩尔浓度为15-20mm，例如可以为16mm、17mm、18mm或19mm等；
11、所述na2hpo4的摩尔浓度为20-40mm，例如可以为22mm、24mm、26mm、28mm、30mm、32mm、34mm、36mm或38mm等；
12、所述nacl的摩尔浓度为1-3mm，例如可以为1.1mm、1.3mm、1.5mm、1.7mm、2mm、2.2mm、2.5mm、2.7mm或2.9mm等；
13、所述吐温80的摩尔浓度为0.1-2mm，例如可以为0.3mm、0.5mm、0.7mm、1mm、1.1mm、1.3mm、1.5mm、1.7mm或1.9mm等；
14、所述山梨醇的摩尔浓度为0.1-1mm，例如可以为0.2mm、0.3mm、0.4mm、0.5mm、0.6mm、0.7mm、0.8mm或0.9mm等。
15、优选地，所述分离缓冲液的ph为6-7，例如可以为6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8或6.9等。
16、优选地，所述极微小球藻与分离缓冲液的料液比为0.1-0.8g/ml，例如可以为0.2g/ml、0.3g/ml、0.4g/ml、0.5g/ml、0.6g/ml或0.7g/ml等。
17、优选地，所述破壁处理时转速为2000-5000rpm，时间为10-20min，温度为25-35℃。
18、例如转速可以为2500rpm、3000rpm、3500rpm、4000rpm或4500rpm等，时间可以为11min、13min、15min、17min或19min等，温度可以为26℃、28℃、30℃、32℃或34℃等。
19、优选地，步骤(2)所述离心为梯度离心。
20、优选地，所述梯度离心的具体步骤为：300-500g(例如可以为320g、350g、380g、400g、420g、450g或480g等)离心5-15min(例如可以为6min、8min、10min、12min或14min等)，1000-2000g(例如可以为1100g、1300g、1500g、1700g或1900g等)离心10-30min(例如可以为12min、14min、16min、18min、20min、22min、24min、26min或28min等)，4000-5000g(例如可以为4100g、4300g、4500g、4700g或4900g等)离心10-30min(例如可以为12min、14min、16min、18min、20min、22min、24min、26min或28min等)，6000-7000g(例如可以为6100g、6300g、6500g、6700g或6900g等)离心10-30min(例如可以为12min、14min、16min、18min、20min、22min、24min、26min或28min等)。
21、优选地，步骤(3)所述过滤为滤膜过滤。
22、优选地，所述滤膜的孔径为0.5-1μm，例如可以为0.6μm、0.7μm、0.8μm或0.9μm等。
23、优选地，步骤(3)所述过滤后还包括浓缩处理。
24、优选地，所述浓缩至过滤液原体积的15-30％，例如可以为16％、18％、20％、22％、24％、26％或28％等。
25、上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
26、第二方面，本专利技术提供了一种小球藻外泌体，所述小球藻外泌体采用如第一方面所述的方法制备得到。
27、第三方面，本专利技术提供了一种如第二方面所述的小球藻外泌体在制备护肤品中的应用。
28、优选地，所述护肤品包括凝胶、精华、乳液、面霜、软膏或面膜中的任意一种。
29、优选地，所述小本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种小球藻外泌体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述分离缓冲液包括Tris、Na2HPO4、NaCl、吐温80、山梨醇和水。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述分离缓冲液以摩尔浓度计包括Tris15-20mM、Na2HPO4 20-40mM、NaCl 1-3mM、吐温80 0.1-2mM、山梨醇0.1-1mM；
4.如权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述极微小球藻与分离缓冲液的料液比为0.1-0.8g/mL；
5.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述离心为梯度离心；
6.如权利要求1-5中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述过滤为滤膜过滤；
7.如权利要求1-7中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述过滤后还包括浓缩处理；
8.一种小球藻外泌体，其特征在于，所述小球藻外泌体采用如权利要求1-7中任一项所述的方法制备得到。
9.一种如权利要求8所
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述护肤品包括凝胶、精华、乳液、面霜、软膏或面膜中的任意一种；
...【技术特征摘要】
1.一种小球藻外泌体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述分离缓冲液包括tris、na2hpo4、nacl、吐温80、山梨醇和水。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述分离缓冲液以摩尔浓度计包括tris15-20mm、na2hpo4 20-40mm、nacl 1-3mm、吐温80 0.1-2mm、山梨醇0.1-1mm；
4.如权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述极微小球藻与分离缓冲液的料液比为0.1-0.8g/ml；
5.如权利要求1-4中...
【专利技术属性】
技术研发人员：李雄山，
申请(专利权)人：阿基米德广州化妆品研究有限公司，
类型：发明
国别省市：
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